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外泌体要怎么来研究?

外泌体是不是很火?其实外泌体之前我也给大家讲过哦,只是估计你们没好好看而已。



其实外泌体可以理解为细胞排泄出来的代谢产物,后来才发现,有点作用的。


外泌体研究到底复不复杂呢?其实不复杂。早在2014年的时候,J Extracell Vesicles上就发表了一篇外泌体研究指南:



不要觉得这个指南过期了哈,其实一直到现在都还是有价值的,这篇蚊帐提到了大致两点:


1)外泌体的研究,首先要证明外泌体存在

2)要证明外泌体的功能


证明外泌体存在,就需要用电镜和蛋白marker双重证明,当然他们也举了点蛋白Marker的栗子:



那功能呢,就需要使得外泌体被荧光标记后,被吞入靶细胞的证明,然后验证靶细胞的变化。


其实就这么简单,我们可以举个近期的外泌体蚊帐的栗子,下面这篇蚊帐发表在Cellular Physiology and Biochemistry(IF=5.104上:



这主要做的是乳腺癌外泌体里包含的一个miRNA的功能作用,首先他们证明了有外泌体的存在,电镜&蛋白Marker(外泌体存在):



接着说明了一下这个miRNA在乳腺癌中高表达(所以才会被分泌出去对别的细胞产生影响),而正常乳腺细胞中低表达:



接着他们给miRNA做了Fam荧光标记,然后分离出了外泌体,这时候外泌体有荧光了。然后将分离出来的外泌体和正常乳腺细胞一起培养,发现外泌体和miRNA被吞了进去(外泌体被吞),然后正常乳腺细胞的增殖啊、耐药啊等等功能都变了(外泌体功能):



最后用最直接的miRNA功能研究(也就是对靶基因的蛋白翻译)做了个验证:



全文完……

华丽丽的分割线


李莫愁博士:其实我们不难发现,外泌体的研究指南里,已经给我们阐明了最基本的外泌体研究的关键步骤。步骤和思路都不难,难的是实验实在是有点小难度,别说分离了,还带荧光去让靶细胞胞吞,估计只有做这些实验的人才能感同身受吧,好了,今天就先策到这里吧,想要看看这篇指南和外泌体5分文献的,就回复“外泌体指南”就可以了。好了,今天就先策到这里吧。


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