酶标仪「罢工」了，教你如何排除故障

作者：康县CDC 贾世生

酶标仪也称为ELISA测试仪，现多为多通道型，使用的载体微孔板多为96孔，其次是48孔。是实验室进行各种临床免疫指标检测的重要检验设备之一，由于酶标仪具有检测结果特异性高、检测范围广、操作简单、性价比适中，在基层医疗机构实验室，尤其在免疫学检验工作中发挥着重要的作用，广泛应用于传染病、肿瘤标志物、血液病、艾滋病、内分泌障碍测定等临床诊断领域。并随着酶标仪技术的发展。与互联网技术的相互融合，实现检测结果的资源共享，极大地提高了酶标仪的使用领域。

1、故障现象

2016年6月。我实验室在做HIV、HCV和TP抗体酶联免疫检测时，打开电脑和酶标仪预热，系统能通过酶标仪自检程序，电脑显示屏没有出现什么异常，在我们加完血清和试剂，按照试剂说明书的步骤完成所有加样、温浴、洗板等程序后，采用450nm和630nm双波长上机检测时，点击酶标仪软件系统测试键，发现主波长检测和次波长检测时间比往常缩短很明显，所得测试结果吸光度值：阳性对照、阴性对照、质控品及所有检测标本吸光度均为“0”，反复测试和通过关机、重启故障依旧，最后通过断开酶标仪与电脑的链接，观看酶标仪侧方散热孔，没有光透出，查看酶标仪显示屏，显示屏屏亮，关机重新启动酶标仪完成自检程序后，就停留在如下405nm波长空白太低，通过安返回键，屏幕依次显示405nm、450 nm、492 nm、630 nm波长空白太低，如此循环，见下图1：

图1

2、故障分析

2.1酶标仪工作原理：光源发出的光经光栅或滤光片的作用，经调整使其达到我们需要的波长的光，一定波长的光通过各种有色溶液时，一部分波长的光被有色溶液吸收，而另一部分光通过溶液微孔条，而照射到光电检测器，光电检测器检测到的光信号与溶液所测物质含量即溶液的颜色成反比，溶液所测物质的含量越多，吸收光越强，而透光度越低，光电检测器检测到的信号再通过信号处理，经计算机控制运算，通过显示屏或打印机，呈现所检测数据结果，以供检测者分析。

2.2通过电脑显示问题分析，当我们通过正常开机，启动酶标仪和电脑，电脑屏幕显示几乎和往常一样，不注意的话系统很快通过自检，是很难看出问题所在，只有在我们设置好检测项目和技术参数后，放入酶标板，启动测试后，等待光源稳定的提示很短暂，几乎听不到走板声，并且酶标仪检测到主波长后很快就转到次波长，时间比往常明显缩短，显示检测结果的所有吸光度均为零，这是为什么？通过酶标仪与电脑链接线拔插检查和酶标仪工作原理分析，初步判断问题可能在酶标仪本身，而没在电脑显示和链接问题上。

2.3直接查看酶标仪，当打开电源，电源指示灯亮，说明供电正常，仔细查看酶标仪外壳各孔，均没见到有任何光源从孔里透射出来，用酶标仪直接测试，测试无法进行，屏幕均显示如上问题，见上图，根据酶标仪工作原理，分析问题可能出在光源和光源电路系统。

2.4综合分析处理：通过对以上两个问题的分析，最后推测问题可能出在酶标仪，经查阅酶标仪使用说明书，说明书列举的几项故障现象如：“灯泡不亮和光线过弱”和故障原因；“灯泡已损坏和灯泡损坏”及解决方案如；“更换灯泡”，结合酶标仪使用年限，进一步确定问题可能出在光源即灯泡不亮，用专用工具仔细打开酶标仪外壳，轻轻的取出酶标仪旧灯泡，用手拿住新灯泡的外部，切记一定不要用手接触到灯泡的内部，以免影响灯泡的发光，仔细察看把新灯泡对准原来灯泡的位置，固定好灯泡（如图2），盖上酶标仪外壳。打开电源，启动酶标仪电源开关，酶标仪自检顺利通过，没有出现前述如405nm波长空白太低等现象，在酶标仪上点击PC控制，与电脑链接，设置好检测项目参数，打开电脑的酶标测试系统软件，进行空板测试，电脑的屏幕显示待光源稳定，光源稳定后就顺利进入测试状态。

图2

2.5预实验 实验方法步骤条件与原来酶标仪故障前试验一致，用450/630nm双波长做HCV抗体检测，经检测阳性对照吸光度值为2.34、2.29，均≥0.5，阴性对照吸光度值为0.03、0.05、 0.00，均≤0.12，符合检测试剂的各项指标，与酶标仪没出现故障前试剂阴阳性对照测试结果一致，酶标仪故障排除。

3、体会

3.1酶标仪在计量认证的实验室属于需要检定的实验室仪器，已经出现故障，就应该贴上标签，不能再使用，只有维修好后重新检定合格后，方可使用，但在基层单位的实验室一台酶标仪，如果贴上标签，那就等于停下了这项工作，往往基层单位离维修厂家都很远，为一台小型酶标仪，很多厂家也是不乐意大老远跑来专门维修，增加费用。快递去厂家一来时间长，二是在运送过程中，可能会出现二次损坏，修好这个问题又会出现在那个问题，极不方便。

3.2基层单位的实验室标准化建设也不规范，检验设备也无法做到专人保管专人使用，人员的检验技术水平也是参差不齐，对仪器设备的知识了解不足，保养不到位，同样的仪器使用年限也不一样，检验仪器有些问题是通过现有的条件和人员技术水平、查看资料是可以解决，但有些问题需要更专业的技术人员，经过专业检测，找出问题，排除故障。

3.3 检验人员在日常工作中要做到“三要”；1、要用心，有时候在工作过程中出现的实验现象和设备故障，要用心去分析，查找问题所在，提出解决问题的方案和思路。2、要用手，找出故障所在，克服等、靠、要的思想，自己能解决的设备故障，就自己尽量动手去解决，排除故障提高工作效率。3、要说或讲，把解决的问题经验和想法，要讲出来。以便同事或同行指点，相互促进，取长补短，有利于工作的开展和提高。

虽然这些问题是其他检验同行中认为微不足道的问题，但对于我们的实验室来说，解决了日常工作中最迫切事情，使HIV、HCV和TP抗体得以顺利地进行检测，使检测结果更准确，更容易判读，更容易记录。暂停使用快速检验方法检测HIV，总之在检验工作中，检验设备就像检验人的眼睛和手臂。发现所检标本中的异常，真实的反应所检样品性状，为临床提供真实的临床检验数据，支持了临床医生对病人的疾病诊断和治疗评价。

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