直接镜检【采集标本】采取标本是检验能否取得正确结果的关键.根据临床表现选取相应的标本.鳞屑、菌痂:用钝刀刮取病损边缘的鳞屑.病甲:先清除甲表面游离的污物,取甲板下靠近甲床上部的甲屑.脓汁,渗出物及各种分泌物:直接用棉拭子采取.毛发:用镊子拔取失去光泽和绕有菌鞘的病发、断发.脑脊液、腹水、尿液、应离心后取沉淀.放线菌病:寻找硫磺样的颗粒.【制片】1.将采集的标本置于载玻片上,加1滴10%氢氧化钾溶液,盖上盖玻片,2.微微加温,避免煮沸,驱逐水泡,轻轻压薄成云雾状,吸去溢液,先置低倍显微镜下观察找到菌丝和孢子后,再用高倍镜证实.【镜下观察】(1)菌丝在镜下粗细一致,绿色折光,有分隔,胞浆均匀,胞浆内可见大小不等的颗粒.孢子多为圆形或卵圆形,大小一致,可见孢浆内结构.(2)墨汁涂片:用于检查隐球菌及其他有荚膜的孢子.方法是取一小滴墨汁与标本(如脑脊液)混合,盖上盖玻片后直接镜检.(3)涂片或组织切片染色:涂片染色可更好地显示真菌形态和结构.革兰染色适用于白念珠菌、孢子丝菌等;瑞氏染色适用于组织胞浆菌;组织切片通常用PAS染色,多数真菌可被染成红色.
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