采血指征:对入院的危重患者未进行系统性抗生素治疗前,应及时进行血液
1.发热(≥38℃)或低温(≤36℃)。
2.寒战。
3.白细胞增多(>10×10 9/L,特别有“核左移”未成熟的或带状的白细胞
4.粒细胞减少(成熟的多核白细胞<1×10 9/L)。
5.血小板减少。
6.皮肤粘膜出血。
7.昏迷。
8.多器官衰竭。
或同时具备上述几种体征时应采血培养。
在评估可疑新生儿败血症时,除发热或低烧外,很少培养出细菌,应该补充
2岁以下
一般多见于门诊,常伴有明显发热(≥38.5℃)和白细胞增多(≥20×109/L)。
可能不发热或不低热,如伴有身体不适,肌痛或中风可能是感
血培养为防止皮肤寄生菌污染,可使用消毒剂(碘酊或碘伏)对皮肤进行严
最大限度地减低皮肤污染。感染性心内膜炎,特别是心脏瓣
可能由皮肤寄生的微生物引起(例如:表皮葡萄球菌或棒杆菌
除非静脉穿刺无法得到血液或用来评价
如果抽取了导管血,也应同时在其他部位穿刺获取非导
皮肤消毒严格按以下步骤进行:
1.首先用70%酒精擦拭静脉穿刺部位待30秒钟以上。
2.然后用一根碘酊或碘伏棉签消毒皮肤(1%-2%碘酊30秒或10%碘伏消
60秒),从穿刺点向外以1.5cm~2cm直径画圈进行消毒。
3.最后用70%酒精脱碘。
严格执行三步消毒后,可行静脉穿刺采血。注意对碘过敏的患者,只能用70%
60秒钟,待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血。
培养瓶消毒程序:
1.用70%酒精或碘溶液(不要使用碘)消毒血培养瓶橡皮塞子。
2.酒精作用待60秒。
3.在血液注入血培养瓶之前,用无菌纱布清除橡皮塞子表面剩余的酒精,
要点:血培养的关键是防止皮肤寄生菌或环境引起的污染,由污染菌引起的
延长了住院日,延误病情诊断并增加了经济
3%~5%血培养中混有污染菌,它们
不同类无菌部位标本培养中生长同一种微生
48h内)。上述情况下,应考虑是真正的感染。临床实验
建立良好的交流关系对各方面都
1995~1999年血中分离的70例凝固酶阴
入院48h内检出者,39.3%(24例)为污染菌,48h后检出者(9例)
为污染菌,污染菌检出时间显著长于病原菌。提示血培养中凝固酶阴性葡
采血量:
对从菌血症或真菌菌血症患者血培养中获得微生物,每个培养瓶抽取的血量
2ml增加到20ml时,血培养的阳性率增加
,因为培养的血液量增加1ml,阳性率增加3%~5%。
用静脉穿刺获得的血量,成人和儿童不同。儿童,特别是新生儿很难获得大
1ml~5ml用于血培养,当细菌浓度足
1ml也足以检测菌血症。标本量大于1ml,细菌量也增加,对
对于成人血培养的标本量少于
不易培养出细菌,每瓶最低限量应是10ml血液,20ml~30ml最合适,血液
1:5至1:10。几乎所有现代的血培养系统假如血液量均在
以上。虽然静脉采血30ml可增加细菌量,但这不太切合实际,这很容易造
血培养的数量和采血时间:
血培养的数量和采血时间关系到菌血症的病理生理学,一次静脉采血注入到
研究已经证实,采集适量的血液注入2~3瓶血
对间歇性菌血症,用于培养的血
因为细菌流入血液与寒战发作通常间
1h,在发烧时血液可能没有细菌,实际上,血培养通常是在寒战或发烧后进
我们一般不推荐在任意时间抽取静脉血进行培养,研究资料
24h内同一时
无论何时,采集血培养应该在使
推荐同时采集2~3瓶,每瓶20ml~30ml血样进行培养来做最
这也更切合实际。先前的抗生素治疗可能导致血培养结果阴性,微生
有研究证实,对链球菌心内膜炎患者,在做血培养的前两周内患者接受了抗
97%下降到91%。由于有很好的血培养技术,对
95%以上。
对特殊的全身性和局部感染患者采集血培养的建议:
1.怀疑急性原发性菌血症、真菌菌血症、脑膜炎、骨髓炎、关节炎或肺炎
2或3份血培养瓶,快速进行血培养。
2. 不明病源的发热,如隐性脓肿,伤寒热和波浪热:发热开始采集2或3份
24h至36h后,估计温度升高之前(通常在下午)立即采集2份以上血培
3.怀疑菌血症或真菌菌血症,血培养结果持续阴性,应改变学培养方法,
4.感染性心内膜炎,对急性心内膜炎患者1h(2h内)采集3份血培养,如
24h后阴性,再采集3份血培养瓶。入院前两周内接受抗生素治疗的
2份。
要点:大部分临床医生对成年患者采集血量不足,采集血培养份数不够,采
24h内采集一瓶血培养,降低了血培养
运输标准:
采血后血培养瓶或采集管应立即送到临床微生物实验室。血培养瓶和采集管
不要冷藏,如果血培养瓶在送往实验室培养或
35℃~37℃孵箱中。但含血
若有细菌生长会释放出一些气体,采集管有破裂或
采用自动化连续检测血培养系统,有一点很让人忧虑,那就是标本运送有时
这样会导致微生物检测延迟(尽管微生物生长不受影响)目前很少有人
接收标准:
实验室收到血培养后,应按以下步骤操作:
1.检查培养瓶确保它们被安全地放置。
2.用肉眼观查微生物生长的情况,注意血液层上面是否有絮状沉淀、均匀
3.检查瓶子上的标签,确认资料是否齐全,与申请单上的患者资料是否一
4.保证获得适量的血液。
5.检查血液是否超过要求的基线。
6.放置在孵箱中或上机进行检测。
由于菌血症和真菌菌血症的检测对临床感染性基本的诊断十分重要,实验室
对儿童和成人,不管抽血量多少,均应该进行培养
不规范处理方法:
送到实验室的血标本应认真处理,减少标本错误和标本污染。标本处理不当
医院及实验室工作人员本身携带的病菌均可能造成标本污染。因
1. 血培养或培养管无标签或贴错标签、培养瓶或培养管有渗漏、破裂或明
12h以上、用不适当的培养瓶或培养管收集标本。
处理方法:立即与临床医师联系,报告:“标本不规范的具体理由”。
2. 用失效的培养瓶或培养管收集标本。
处理方法:与医生联系,报告:“用过期培养瓶收集血标本,请用效期内的培
3. 送交血标本的量不足或只送一瓶血培养。
处理方法:与医生联系,报告:“送交的血培养标本量不足,请补送足量血液
”。
4. 未送推荐的培养瓶数或类型
处理方法:与医生联系,报告:如“只送需氧瓶不符合规程,血培养的基本规
”。
要点:每位临床医师都应该对患者负责任,实验室工作人员发现不规范的血
微生物室处理血培养预防感染的安全程序:
1.细菌室工作人员,在所有的血培养处理过程中都应戴乳胶手套。
2.拒收不符合安全标准的血培养瓶或培养管。
3.在生物安全柜内打开或穿刺培养瓶或加一个胶膜防护装置(如:把培
4.在生物安全柜内操作肉眼观察有微生物生长迹象的培养瓶。
5.操作产生的气溶胶,可能含有高浓度的致病菌或真菌,利用实验室的
6.用于培养基的塞子和胶带可能含有高浓度的致病菌,应防止接触。
7.正确处理与血培养有关的污染物。
8.立即报告血培养结果及抗生素敏感试验结果。
血培养检测——阳性结果的处理:
传统手工法血培养应该每天至少检查一次,对48h~72h未生长的培养瓶至少
对培养瓶进行肉眼检查,注意下列几点提示有微生物
1.血与肉汤混合物出现浑浊。
2.在血液层上有絮状沉淀,某些链球菌在沉积的红细胞表面上,会有小
“棉球样”生长。
3.肉汤内出现浑浊生长。
4.肉汤表面有薄膜生长。
5.出现溶血。
6.产生气体,许多发酵菌可产气,梭菌属会产生大量的气体,出现明显
7.血液层表面或深层有白色颗粒。
8.液体培养基凝固。
如果怀疑血培养阳性,应立即进行革兰染色,以无菌操作从培养瓶中取肉汤
滴涂片,自然干燥,加热固定并染色。染色结果应尽快报告,如革兰阳性球
革兰阴性杆菌为小杆菌或球杆菌等。革兰染色结果可指
并作为实验室进行细菌鉴定补充试验的参考
它对于鉴别葡萄球菌和链球菌非常有用。如果血培养阳性革兰染色未发现
应做吖啶橙染色进行二次镜检,这对检测弯曲菌菌血症和布鲁菌菌血症很
而革兰染色很少发现这些细菌。依据细菌革兰染色形态特点,选择适当
1。
1。
5%~10%CO2孵育
ª
EMB 血琼脂 PEA或CAN
× ××
× ××
× ×××
× ××××
b × ×
× ××
c
48h;EMB;伊红美蓝琼脂;PEA;苯乙基醇琼脂;CAN;多
-萘啶酮酸琼脂。
30℃培养。
当革兰染色显示细菌形态均一时,厌氧培养的价值不大。对所有培养阳性,
革兰染色为纯的细菌,可进行初步鉴定并做直接抗生素药敏试验的标准程序,
FDA批准的市售产品。可用于初步鉴定的商品试剂,包括:胆汁溶解,
酶,乳胶凝集分型实验等。
美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的抗生素敏感试验没有血培养
对各种血培养法中的阳性肉汤培养物进行传种并且立即孵育培养,为进一步
5h-7h后有明显的菌落生长,取琼脂表面的菌落用于细菌鉴定和抗
DNA扩增技术可以鉴定血培养中的细菌和检测抗生素
FDA不推荐常规使用。
万一需要进一步的研究,至少保存几个星期。为了让细菌活
兼性需氧菌和兼性厌氧菌应传种到半固体培养基中,例如动力培养基。严格
苛养
为长期储存,细菌可悬浮于15%
-70℃冷冻。
血培养阳性结果的报告程序:
血培养阳性结果十分重要,应立即口头报告给患者的主治医生,报告的日期
应向临床医师提供重要
包括革兰染色的形态,血培养阳性的数量和其他的鉴定资料,如革兰阳
口头报告后应立即进行书面初步报告。除
否则不应更改初步报告的结
当培养24h和48h后,对阴性血培养结果在最短的时间内发出初步报告。有些
“血培养3天后无细菌生长”。
真菌培养:
多种方法可提高血液中真菌的检出率,包括使用通气的真空血培养瓶、双相
-离心技术和特殊营养的肉汤培养基(如脑心浸液肉汤等)。裂解-
特别是对于营养要求苛刻的双相真菌。实
5至7天)可提供充足的营养支持白
-离心技术可获得最高的检出率。霉菌抑
lsolator管结合使用。对于分离糠秕
可在培养基表面覆盖一层橄榄油或其他长链脂肪酸。阴性的真菌血培养
22-30℃孵育4周后再仍弃。
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