第1题
【14重庆】下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述，正确的是
A．②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与
B．③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上
C．④的染色体上若含抗虫基因，则⑤就表现出抗虫性状
D．⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异
答案
D
【解析】②为重组Ti质粒，其构建需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶；③含重组Ti质粒的农杆菌侵染植物细胞后，重组Ti质粒上的T-DNA整合到受体细胞的染色体上，并非整个重组Ti质粒整合到④的染色体上；目的基因导入受体细胞后不一定能成功表达，所以抗虫基因导入植物细胞后，培育成的植株也不一定具有抗虫性状；转基因抗虫植株是否培育成功，可以从个体水平上进行检测，即观察植株是否具有抗虫性状，如果具有抗虫性状则说明发生了可遗传变异。
第2题
【14江苏】下列关于基因工程技术的叙述，正确的是
A.切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列
B.PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应
C.载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因
D.抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达
答案
D
【解析】每种限制酶只能识别特定的核苷酸序列，大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸对组成，也有少数限制酶识别的核苷酸序列由4、5或8个核苷酸对组成；PCR技术中温度在90～95℃时，DNA解旋为单链，温度为55～60℃时，引物与作为模板的单链DNA上特定部位互补结合，温度为70～75℃时4种脱氧核苷酸在DNA聚合酶作用下，合成新的DNA链；作为标记基因的通常是抗生素抗性基因；抗虫基因成功导入受体细胞，也未必能正常表达，是否表达需要分子水平和个体水平上的检测和鉴定。
第3题
【13广东】从某海洋动物中获得一基因，其表达产物为一种抗菌体和溶血性均较强的多肽P1。目前在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物，首先要做的是
A．合成编码目的肽的DNA片段
B．构建含目的肽DNA片段的表达载体
C．依据P1氨基酸序列设计多条模拟肽
D．筛选出具有优良活性的模拟肽作为目的肽
答案
C
【解析】蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过对基因的修饰或基因的合成，对现有的蛋白质进行改造，或制造出一种新的蛋白质，以满足人类生产生活的需求。
第4题
【09浙江】下列关于基因工程的叙述，错误的是
A．目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物
B．限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶
C．人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性
D．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达
答案
D
【解析】基因工程的受体细胞常用植物受精卵或体细胞（经组织培养）、动物受精卵（一般不用体细胞）、微生物——大肠杆菌、酵母菌等；常用的工具酶是限制性核酸内切酶和DNA连接酶；人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性，只有经过一定的物质激活以后，才有生物活性；抗性基因是标记基因，是为了检测并筛选出含运载体和基因表达载体的受体细胞。
第5题
【06江苏】我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。下列叙述不正确的是
A．基因非编码区对于抗虫基因在棉花细胞中的表达不可缺少
B．重组DNA分子中增加一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失
C．抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递至近缘作物，从而造成基因污染
D．转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的
答案
D
【解析】基因的非编码区上有调控遗传信息表达的核苷酸序列（主要是RNA聚合酶结合位点）,对于抗虫棉基因在棉花细胞中的表达不可缺少；一种氨基酸可以有几个不同的密码子,所以DNA分子中增加一个碱基对,不一定影响蛋白质的功能；抗虫棉与其他近缘植物杂交,能造成基因污染；检测棉花对抗生素的抗性,不能确定棉花是否具有抗虫的特性。
第6题
【11浙江】ada（酸脱氨酶基因）通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是
A．每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒
B．每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点
C．每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada
D．每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子
答案
C
【解析】由“腺苷酸脱氨酶基因通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶”可推出每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒；同一种限制酶切割质粒和目的基因形成相同的黏性末端，质粒和目的基因连接以后，重组质粒上最起码有2个该限制酶的识别位点；每个限制性核酸内切酶识别位点不一定能插入一个ada；由“腺苷酸脱氨酶基因通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶”可推出每个大肠杆菌的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子。
第7题
【11四川】北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强，下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述正确的是
A．过程①获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序
B．多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因不能得到抗冻型增强的抗冻蛋白
C．过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，需要专入农杆菌才能进行筛选
D．应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达
答案
B
【解析】过程①是通过逆转录获得的目的基因，只有外显子不能用于基因组测序；将多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，有可能得到的是多个抗冻蛋白连在一起的序列，不一定还有原来的功能，因抗冻蛋白是在抗冻蛋白基因中某个序列越多抗冻性越强；重组质粒中有标记基因；利用DNA探针，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在，但不能检测目的基因的表达产物。
第8题
【11天津】土壤农杆菌能将自身Ti质粒的T-DNA整合到植物染色体DNA上，诱发植物形成肿瘤。T－DNA中含有植物生长素合成酶基因(S)和细胞分裂素合成酶基因(R)，它们的表达与否能影响相应植物激素的含量，进而调节肿瘤组织的生长与分化。据图分析，下列叙述错误的是
A．当细胞分裂素与生长素的比值升高时，诱发肿瘤生芽
B．清除肿瘤组织中的土壤农杆菌后，肿瘤不再生长与分化
C．图中肿瘤组织可在不含细胞分裂素与生长素的培养基中生长
D．基因通过控制酶的合成控制代谢，进而控制肿瘤组织生长与分化
答案
B
【解析】基因通过控制酶的合成进而控制代谢来控制生物体的性状。由于土壤农杆菌将自己的Ti质粒的T-DNA整合到植物染色体的DNA上，已经彻底改变了植物的DNA，所以即便把植物肿瘤中的土壤农杆菌清除，肿瘤照样生长与分化。
第9题
【09重庆】下表有关基因表达的选项中,不可能的是
基因
表达的的细胞
表达产物
A
细菌抗虫蛋白基因
抗虫棉叶肉细胞
细菌抗虫蛋白
B
人酪氨酸酶基因
正常人皮肤细胞
人酪氨酸酶
C
动物胰岛素基因
大肠杆菌工程菌细胞
动物胰岛素
D
兔血红蛋白基因
兔成熟红细胞
兔血红蛋白
答案
D
【解析】细菌抗虫蛋白基因可通过转基因技术转入棉花细胞内，在棉花的叶肉细胞中表达产生细菌抗虫蛋白，使棉花具有抗虫能力；正常人皮肤细胞中含有人酪氨酸酶基因，人酪氨酸酶基因能够表达产生人酪氨酸酶；动物胰岛素基因可通过转基因技术转移到大肠杆菌体内，在大肠杆菌工程菌细胞中合成动物胰岛素；兔属于哺乳动物，其成熟的红细胞中没有细胞核和众多细胞器，所以不可能表达出血红蛋白
第10题
【07广东】现有一长度为1000碱基对（bp）的DNA分子，用限制性核酸内切酶EcoRI酶切后得到的DNA分子仍是1000bp，用KpnI单独酶切得到400bp和600bp两种长度的DNA分子，用EcoRI、KpnI同时酶切后得到200bp和600bp两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是
答案
D
【解析】A选项中的DNA用KpnI单独酶切会得到600bp和200bp两种长度的DNA分子；B选项中的DNA用EcoRI单独酶切会得到800bp和200bp两种长度的DNA分子；C选项中的DNA用EcoRI酶切后得到200bp和800bp两种长度的DNA分子；D选项中的DNA用EcoRI酶切后得到的DNA分子是1000bp，用KpnI单独酶切得到400bp和600bp两种长度的DNA分子，用EcoRI、KpnI同时酶切后得到200bp和600bp两种长度的DNA分子
