作者：上海市临床检验中心 龚晓霖
当人体肝脏、心脏等器官损伤特别严重时，ALT、AST、CK等酶类会大量释放，使其在外周血中的浓度大幅升高，此时的酶活性远远超过试剂盒的线性范围，极易出现参与反应的底物迅速消耗殆尽，使反应不再为零级，导致被测物报告浓度远远低于实际浓度。
BS-2000M2全自动生化检测系统（简称BS-2000M2）是深圳迈瑞医疗生物电子股份有限公司自主研发的模块化生化检测系统。在封闭项目参数设置中，BS-2000M2提供了底物耗尽报警参数（即底物耗尽限）。当仪器判断反应发生底物耗尽时，会启动酶线性扩展功能，利用反应时间内或延迟时间内测光点来计算△A/min和结果。
本研究通过对临床常见生化检测项目ALT、AST、ALP、GGT、LDH、α-HBDH、CK、CKMB、α-AMY和尿素高浓度样本的检测，初步评估BS-2000M2酶线性扩展功能的临床实际应用效果。
1、样本来源
收集复旦大学附属中山医院徐汇医院门诊及住院患者检测后剩余血清，筛选出ALT、AST、ALP、GGT、LDH、α-HBDH、CK、CKMB、α-AMY、尿素的高浓度样本，浓度需覆盖各项目试剂盒的线性范围、线性范围上限附近及线性范围上限以上，共收集到63例样本，所有样本均无肉眼可见溶血及脂血。
2、仪器及试剂
BS-2000M2及配套ALT、AST、ALP、GGT、LDH、α-HBDH、CK、CK-MB、α-AMY和尿素试剂盒、校准品和质控品均购自深圳迈瑞医疗生物电子股份有限公司。
3、方法
按照厂商推荐方法进行仪器校准与维护，所有检测项目均在有效校准期内，质控在控。
BS-2000M2酶线性扩展功能的基本原理当反应结束，计算结果时，仪器会通过底物耗尽限查找反应区间内的线性区间。若测定结果高于线性范围上限会有结果标记“>”提示审核者。当延迟时间内未发生底物耗尽的测光点为1或0时，无法计算结果，给出无计算区间“ENC”标记。此时需选择减量参数（稀释法）进行重测或启动仪器自动重测功能。
4、讨论
生化分析仪的临床性能受仪器、试剂、仪器和试剂的集成参数、厂家溯源体系、实验室日常校准操作和维护力度等多方面因素的影响。实验室在选择生化分析仪时，应特别关注动力学法检测项目底物耗尽限。
本研究对BS-2000M2的线性扩展功能进行了验证，结果显示十个测试项目的可报告范围上限分别扩展至3339 U/L、7411 U/L、3407 U/L、3945 U/L、7646 U/L、9783 U/L、14106 U/L、3296 U/L、9700 U/L和54 mmol/L。当各项目低于以上浓度时，酶线性扩展功能的检测结果与稀释法检测结果的相对偏差均为临床可接受。手工计算是否发生底物耗尽与实际反应曲线或仪器结果标记一致，未出现误报或漏报底物耗尽现象。
封闭检测系统的生产厂商会主动构建测量溯源体系、验证检测项目基本性能和优化集成参数，以保证各项目性能（如精密度、线性范围、可报告范围、抗干扰、准确性、交叉污染、底物耗尽能力、抗Hook效应的能力等）满足分析质量指标的要求。然而，国内有很多实验室使用的是自建检测系统，因此应注意仪器空白时间和反应时间的设置、校准算法的选择和各检测项目溯源性的建立。
综上所述，BS-2000M2的酶线性扩展功能大大延伸了可报告范围，有效解决了高浓度样本假阴性结果的风险，降低了重测频率，缩短了样本周转时间。
致谢：感谢复旦大学附属中山医院徐汇医院检验科宋云霄老师在本研究样本收集方面提供的帮助，特此致谢。
医院简介：复旦大学附属中山医院徐汇医院年门急诊量高达百余万人次，目前正在和复旦大学附属中山医院建设中山医院徐汇医疗联合体。医联体的建设促进了徐汇区域检验中心的形成，而打造一个优秀的检验中心，提升自动化和信息化能力成为必然选择。目前该院检验科使用全套的迈瑞一站式血清检测解决方案，包括全自动生化流水线、全自动化学发光免疫分析系统和天河生化免疫分析流水线，帮助科室更好地服务于临床。
本文发表于《检验医学》2017年9月第32卷第9期，
原文题目：BS-2000M2全自动生化检测系统底物耗尽限参数的临床应用评价
本文系部分节选，相关数据及完整内容详见原文
联系客服
