在检验科生化室工作，熟知仪器的工作原理，定标、质控结果的判读，异常警报的分析及处理是必须掌握知识，对我们的日常工作有着非常重要的作用。下面分享一例质控失控、定标失败，通过结果判读分析原因，并成功解决的案例。
今天，在对P800生化分析仪项目进行常规质控时，发现无机磷（P）备用瓶质控结果严重偏低，质控品为朗道定值质控，分为高值和低值两个水平。对当前瓶和备用瓶进行质控时，使用的是同一批号，同一天复溶的质控品。但是，P当前瓶在控，备用瓶远超过3sd。
基于P备用瓶的高值和低值质控都失控，考虑检测单元异常，即①水质，②透光窗，③反应杯，④试剂，⑤试剂针\样本针吸取异常等。
综合其他项目均在控，优先考虑试剂问题。于是我决定对备用瓶试剂进行定标，形成新的校准曲线，再做质控。
结果，再次定标后，在定标界面显示“failed”，P备用瓶项目发红，即定标失败。
在校准报告页观察，可见S1处，Std1主副波长吸光度差值异常，并有“Dup”报警信息。
想到之前老师讲课时说道，Dup报警信息即Duplication Limit，是重复性界限报警，原因为同一浓度，两次重复测试的吸光度差值超出设定范围。此警报在S1（即0浓度）时，考虑①气泡②光源③试剂状态④水质，等。
此例中，其他指控项目均在控，其他定标项目均通过，开机自检时光源正常，则考虑试剂状态问题。
我随后停机，更换备用瓶P试剂盒，扫描试剂后重新定标。
伴随着我紧张的心情，点开定标报告界面，终于定标通过了！
随后，对P的备用瓶进行两个水平的质控，结果也均在控。
通过此例，我在下班后回想、复习了之前老师讲过的关于生化分析仪定标判读的知识：
1、生化分析仪的基本原理就是朗伯比尔定律，即A=εLc 。
A为吸光度，ε为摩尔吸光系数，L是反应系统的光径，c为溶液浓度。
对于固定的物质，它的ε是固定的，一个反应系统的L也是固定的，所以，测得A，即可求得c浓度。
2、以我们用的罗氏为例，主要分析类型有2 point End（两点终点法），1 point End（一点终点法），Rate A（速率A法），2 point Rate（两点速率法）。
其中，一点终点法，读取终点的吸光度；
两点终点法，读取终点的吸光度，并能去除样本空白的影响；
速率A法，读取一段时间内吸光度的变化率；
两点速率法，读取两个时间点的吸光度，计算吸光度变化率，不受曲线线性约束。
3、对于定标结果的判读，我们首先要知道，仪器实测的是物质的吸光度/光量子数，而定标曲线就是一个桥梁，也是一把尺子。将实测的吸光度/光量子数转化为待测物浓度，这就是仪器的作用和原理。
如上，S1为0浓度，S2为定标品浓度。两个浓度的计算吸光度为定标时形成定标曲线所用，参考吸光度不使用。上图，无报警信息，求得了K值，代表定标成功，但是还要通过质控这一关。
而定标失败时，会有主要四类定标参数，下面简单回顾定标参数的意义。
触发原因：理论吸光度与实际吸光度差距超过设定范围。
报警信息：SD.E
2. Duplication Limit 重复性界限触发原因：同一浓度两次重复测试，吸光度差值超过设定范围。
报警信息：Dup.E
3. Sensitivty Limit 灵敏度界限触发原因：单位浓度吸光度变化/变化率超过设定范围。
报警信息：Sen.E
4. S1 Abs Limit 试剂空白吸光度界限触发原因：Std1/即0浓度的吸光度超出设定范围
报警信息：S1A.E
在我们生化室的日常工作中，熟知定标、质控的意义，常用项目的反应曲线，了解常见的定标参数意义和报警信息，对于解决日常遇到的问题有着非常大的意义。正如此例，通过定标报告的判读，可以最快速度找到定标失败、质控失控的原因，及时纠正，节省了时间成本，同时也保证了检验报告的准确和及时发出，不耽误患者的就诊。
