DNA的粗提取和鉴定
一、书本知识整理
1.实验目的
2.目的要求
3.方法步骤
二、思维拓展
1.用猪的血液代替鸡血不行的原理是:哺乳动物成熟的细胞中无细胞核
2.实验成功的关键:能否提取到较纯净的DNA丝状物
3.实验的注意事项:
①实验中共有三次过滤。第1、3次要用其滤液,使用纱布为1~2层,第二次要用其滤出的黏稠物,使用的纱布为多层。
②实验中有6次搅拌。除最后一次搅拌外,前5次搅拌均朝一个方向,且第一次快速搅拌,其余各步搅拌都要不停地轻轻搅拌,玻璃棒插入位置不同,进行第2、3、5次时,玻璃棒不要直插杯底,进行步骤7时,玻璃棒插入烧杯溶液的中间。
③实验中两次使用蒸馏水。步骤1中加入蒸馏水是为了得到浓度低于血细胞内部浓度的溶液,使血细胞吸水膨胀破裂,要充分搅拌不应少于5min。步骤3中加入蒸馏水是为了使氯化钠的物质的量浓度达到DNA溶解度的最低点0.14mol/L,即稀释氯化钠溶液。
④实验中三次加入氯化钠溶液。在步骤2、5中加入的质量浓度为2mol/L,在步骤8中加入的质量浓度为0.015mol/L,目的一样都是为了DNA的溶解。
⑤用冷酒精浓缩和沉淀DNA时所用的95%酒精,必须经过充分预冷后才能使用,冷酒精与含DNA的氯化钠溶液体积比是2:1。如果用冷酒精处理后,悬浮于溶液中的丝状物较少,可将混合液放于冰箱中再冷却几分钟,然后再用玻璃棒卷起丝状物。
⑥盛放鸡血细胞液的容器和实验中的烧杯和试管最好也是塑料制的。由于玻璃表面带电荷,DNA中的磷酸基也带电荷而被吸附于玻璃表面,故实验中用塑料烧杯和试管可减少DNA的损失。
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一、单项选择题
1.下列图示中能反映DNA溶解度与NaCl溶液浓度之间关系的是 ( )
2.下列关于基因、DNA和染色体的叙述,正确的是 ( )
A.DNA只存在于染色体上 B.每个染色体总是只含有一个DNA分子
C.一个DNA分子含有一个基因 D.不同基因中脱氧核苷酸序列不同
3.对真核细胞的基因的叙述不正确的是 ( )
A.没有调控基因 B.有RNA聚合酶结合位点
C.能控制合成RNA聚合酶 D.并不是所有区域都可以编码蛋白质
4.在DNA的粗提取和鉴定的实验中,提取鸡血细胞的核物质和析出含DNA的粘稠物的操作过程中均用到蒸馏水,其作用在于 ( )
A.前者用来溶解血细胞,后者用来溶解DNA
B.前者使血细胞吸水破裂,后者用来稀释NaCl溶液
C.前者用来分离细胞核与细胞质,后者用来提取DNA
D.前者使DNA从核中分离出来,后者使DNA析出
5.制备鸡血细胞液的过程中,要除去上清液的主要原因是 ( )
A.上清液中存在有毒物质
B.上清液中的某些成分能与DNA结合成复合物
C.DNA分子不存在于上清液中
D.上清液中水分含量高,影响DNA的提取
6.在DNA的粗提取和鉴定的实验中,提取含杂质较少的DNA时必须用 ( )
A.0.14 mol/L的NaCl溶液
B.玻璃棒充分搅拌直至丝状物溶解
C.经充分预冷的95%的酒精溶液
D.0.lg/mL的柠檬酸钠溶液
7.科学家利用“同位素标记法”弄清了许多化学反应的详细过程。下列说法正确的是( )
A.用15N标记核苷酸弄清了分裂期染色体形态和数目的变化规律
B.用18O标记H2O和CO2有力地证明了CO2是光合作用的原料
C.用14C标记CO2最终探明了CO2中碳元素在光合作用中的转移途径
D.用35S标记噬菌体的DNA并以此侵染细菌证明了DNA是遗传物质
8.有人从某种哺乳动物体内提取出一种成熟细胞,经化学分析,细胞中不含有DNA而含有红色含铁的蛋白质,请分析最可能发生在该细胞中的生理活动是 ( )
A.DNA→mRNA→蛋白质
C.丙酮酸+H2O→CO2+[H]+ATP
9.水溶性染色剂PI能与核酸结合而使细胞核着色。细胞浸泡于一定浓度的PI中,仅有死亡细胞的核会被染色,活细胞则不着色;但将PI注射到活细胞中,则细胞核会着色。产生上述现象的原因是 ( )
A.死细胞与活细胞的核酸结构不同 B.死细胞与活细胞的核酸含量不同
C.活细胞能分解PI D.活细胞的细胞膜阻止PI进入
10.在“DNA的粗提取与鉴定”实验中,有两次DNA的沉淀析出,其依据的原理是( )
①DNA在氯化钠的物质的量浓度为0.14mol/L时溶解度最低
②DNA在冷却的体积分数为95%的酒精中能沉淀析出
A.两次都是① B.两次都是②
C.第一次是①,第二次是② D.第一次是②,第二次是①
二、多项选择题
11.下列叙述中哪些能表明基因与染色体的平行行为 ( )
A. DNA主要分布在染色体上,是染色体的主要化学组成之一
B.在细胞分裂中,基因和染色体都能进行复制和保持连续性
C.基因突变和染色体变异均导致生物可遗传的变异
D.配子形成时,非同源染色体上的非等位基因间的分离和重组互不干扰
12.下列关于DNA的叙述中,正确的是 ( )
A.人的卵原细胞含有人体的全部遗传信息
B.同种生物个体之间DNA完全相同
C.一个DNA分子可控制许多性状
D.病毒的遗传物质是DNA
13下列关于生物学实验的描述正确的是 ( )
A.观察细胞质流动时,换用高倍镜后视野变暗,这时应该使用较大光圈或换凹面镜采光
B.观察洋葱根尖细胞有丝分裂时,在高倍镜的视野中可以看到一个细胞从分裂前期到中期的变化
C.DNA粗提取与鉴定实验中,第二次加蒸馏水是为了稀释NaCl溶液,以便DNA析出
D.在叶绿体中色素的提取和分离实验中,加入CaCO3,是为了研磨充分
14.下列属于基因的功能是 ( )
A.携带遗传信息 B.携带密码
C.能转录信使RNA D.能控制蛋白质的合成
三.非选择题
15. 关于“DNA的粗提取和物理性状观察”实验:
⑴实验材料选用鸡血球液,而不用鸡全血,主要原因是鸡血球液中含有较高含量的 。
⑵在图A所示的实验步骤中加蒸馏水的目的是 ,通过图B所示的步骤取得滤液,再在溶液中加入2摩尔/升NaCl溶液的目的是 ,图中C所示实验步骤中加蒸馏水的目的是 。
⑶ 为鉴定实验所得丝状物的主要成分是DNA,可滴加 溶液,结果丝状物被染成蓝色。
16.某科研小组对禽流感病毒遗传物质进行了如下实验:
实验原理:略。
实验目的:探究禽流感病毒的遗传物质是DNA还是RNA。
材料用具:显微注射器、禽流感病毒的核酸提取物、活鸡胚、DNA酶、RNA酶等。
实验步骤:
第一步:取等量活鸡胚二组,用显微注射技术,分别向二组活鸡胚细胞中注射有关物质。
第二步:在适宜条件下培养。
第三步:分别从培养后的鸡胚中抽取样品,检测是否产生禽流感病毒。
请将与实验相关的内容填入下表:
注射的物质 | 实验现象预测 (有无禽流感病毒产生) | 相关判断 (禽流感病毒的遗传物质) | |
第一组 | 如果 , 如果 , | 则 是遗传物质; 则 是遗传物质。 | |
第二组 | 如果 , 如果 , | 则 是遗传物质; 则 是遗传物质。 |
17.在“DNA粗提取”实验中,为得到含DNA的黏稠物,某同学进行了如下操作,最后所得含DNA的黏稠物极少,导致下一步实验无法进行。请指出该同学的实验操作上的错误并改正。
①在新鲜家鸽血中加入适量的柠檬酸钠,经离心后,除去血浆留下血细胞备用。
②取5—10mL血细胞放入50mL的塑料烧杯中,并立即注入20 mL0.015mol/L的氯化钠溶液,快速搅拌5min后经滤纸过滤,取得其滤液。
③ 滤液中加入40 mL2mol/L的氯化钠溶液,并用玻璃棒沿一个方向快速搅拌1min。
④ 上述溶液中缓缓加入蒸馏水,同时用玻璃棒沿一个方向不停地轻轻搅拌边加蒸馏水,直到溶液中丝状物出现为止,再进行过滤而滤得含DNA的黏稠物。
①______ ___,②_____ ____,③_____ ____。
答案:
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 |
C | D | A | B | D | A | C |
8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 |
B | D | C | BD | AC | AC | ACD |
15⑴ DNA ⑵使血球破裂;使滤液中的DNA溶入浓盐溶液,使DNA析出
⑶ 二苯胺
16.
第一组 | (2分)核酸提取物+DNA酶 | (1分)有 (1分)无 | (1分)RNA (1分)DNA |
第二组 | (2分)核酸提取物+RNA酶 | (1分)有 (1分)无 | (1分)DNA (1分)RNA |
17.0.015mol/L的氯化钠溶液应改为蒸馏水;滤纸应改为纱布;直到溶液中丝状物出现为止应改为直到溶液中丝状物不再增加为止
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