新朝皇帝王莽与孝睦皇后所生的长女，汉平帝刘衎的皇后。
元始四年（公元4年），王氏被立为皇后。
元始五年十二月（公元6年2月），汉平帝去世，王莽立汉宣帝玄孙刘婴为太子，号为孺子，王莽摄帝位。
初始元年（公元8年），王莽即大位，建立新朝，降刘婴为定安公，王氏改称定安太后，后改称号为“黄皇室主”，地皇四年（公元23年），王氏自焚而死。
王氏是安汉公、太傅、大司马王莽的女儿。元寿二年（公元前1年），汉哀帝刘欣去世，汉哀帝的堂弟中山王刘衎继位，是为汉平帝。汉平帝继位时年仅九岁，由汉成帝的母亲太皇太后王政君临朝，王氏的父亲王莽秉持朝政。
元始三年（公元3年）春天，王莽想依照霍光以女配帝的旧例，将女儿王氏嫁给汉平帝为皇后，以此来加强自己的地位。他首先建议为汉平帝充实后宫；遴选开始后鉴于出自己女儿外还有诸多王氏女子入选，想排除这些竞争者，又故作谦辞，促使太皇太后将包括王莽女儿在内的王氏诸女全部淘汰，而自百姓至公卿大臣纷纷上言，极力推荐王莽的女儿王氏重新入选乃至直接当选皇后，太皇太后迫不得已而同意。
王莽又建议广泛征选，而公卿大臣已经将王莽之女当作正统之选了。太后派遣长乐少府夏侯藩、宗正刘宏、少府宗伯王凤、尚书令平晏到王府下聘礼（纳采），大臣们回奏，称赞王氏的品德和容貌；还派遣太师孔光、大司徒马宫、大司空甄丰、左将军孙建、执金吾尹赏、行太常事大中大夫刘歆以及太卜、太史令等四十九人赐皮冠素裳，行礼问卜，祭庙告祖，大臣们奏报占卜的结果是吉利的，于是等待吉日让王氏与汉平帝成婚。
元始四年（公元4年）二月，派大司徒马宫、大司空甄丰、左将军孙建、右将军甄邯、光禄大夫刘歆奉乘舆驾，到王莽府邸迎娶王氏。马宫和刘歆等呈上皇后印玺绶带，登车称为警跸，择吉日从上林苑延寿门，进入未央宫前殿。群臣就位行礼，大赦天下。加封王莽地满百里，赏赐迎接皇后王氏以及参加婚礼的群臣，从三公以下到驺宰执事及长乐宫、未央宫与王莽府中的人，都增加秩禄，赏赐金帛不等。
王氏成为皇后三个月后，前往太庙行告祖之礼。尊王莽为宰衡，位在各侯王之上。赐王莽妻子为功显君，有汤沐邑。封王莽的儿子王安为褒新侯，王临为赏都侯。
元始五年（公元5年）秋季，王莽因为王皇后有得子的祥瑞，修通了从杜陵到汉中的子午道。
元始五年十二月十六日（公元6年2月4日），汉平帝去世，王莽立汉宣帝的玄孙刘婴为太子，号为孺子，王莽代摄帝位，尊王氏为皇太后。
居摄三年（公元8年）十一月，王莽改元初元，十二月又改元始建国，并以该月为始建国元年正月。正月初一，王莽篡位称帝，建立新朝，降封刘婴为定安公，皇太后王氏改称定安太后。
王氏时年十八岁（应为虚岁），为人婉顺文静有节操。自从刘氏遭废以后，王氏经常称病不参加朝会，王莽对女儿敬惮伤哀，打算将她改嫁，于是又改王氏称号为黄皇室主，派立国将军、成新公孙建世子孙襐扮成医生前去看病调情。王氏大怒，鞭打左右侍御。因此发病，不肯起，王莽就再也不勉强她了。
地皇四年（公元23年），绿林军攻入长安，诛杀王莽，火烧未央宫，王皇后叹息道：“何面目以见汉家！”自焚而死，享年三十二岁。
《汉书·卷一十三·平帝纪》：二月丁未，立皇后王氏，大赦天下。
《汉书·卷九十七下·外戚传第六十七下》：孝平王皇后，安汉公太傅大司马莽女也。平帝即位，年九岁，成帝母太皇太后称制，而莽秉政。
《汉书·卷九十九上·王莽传第六十九上》：莽既尊重，欲以女配帝为皇后，以固其权，奏言：“皇帝即位三年，长秋宫未建，液廷媵未充。乃者，国家之难，本从亡嗣，配取不正。请考论《五经》，定取礼，正十二女之义，以广继嗣。博采二王后及周公、孔子世列侯在长安者适子女。”事下有司，上众女名，王氏女多在选中者。莽恐其与已女争，即上言：“身亡德，子材下，不宜与众女并采。”太后以为至诚，乃下诏曰：“王氏女，朕之外家，其勿采。”庶民、诸生、郎吏以上守阙上书者日千余人，公卿大夫或诣廷中，或伏省户下，咸言：“明诏圣德巍巍如彼，安汉公盛勋堂堂若此，今当立后，独奈何废公女？天下安所归命！愿得公女为天下母。”莽遣长安以下分部晓止公卿及诸生，而上书者愈甚。太后不得已，听公卿采莽女。莽复自白：“宜博选众女。”公卿争曰：“不宜采诸女以贰正统。”
《汉书·卷九十九上·王莽传第六十九上》：莽白：“愿见女。”太后遣长乐少府、宗正、尚书令纳采见女，还奏言：“公女渐渍德化，有窈窕之容，宜承天序，奉祭祀。”有诏遣大司徒、大司空策告宗庙，杂加卜筮，皆曰：“兆遇金水王相，封遇父母得位，所谓'康强’之占，'逢吉’之符也。”信乡侯佟上言：“《春秋》，天子将娶于纪，则褒纪子称侯，安汉公国未称古制。事下有司，皆曰：“古者天子封后父百里，尊而不臣，以重宗庙，孝之至也。佟言应礼，可许。请以新野田二万五千六百顷益封莽，满百里。”莽谢曰：“臣莽子女诚不足以配至尊，复听众议，益封臣莽。伏自惟念，得托肺腑，获爵士，如使子女诚能奉称圣德，臣莽国邑足以共朝贡，不须复加益地之宠。愿归所益。”太后许之。有司奏：“故事，聘皇后黄金二万斤，为钱二万万。”莽深辞让，受四千万，而以其三千三百万予十一媵家。群臣复言：“今皇后受骋，逾群妾亡几。”有诏，复益二千三百万，合为三千万。莽复以其千万分予九族贫者。
《汉书·卷九十七下·外戚传第六十七下》：莽欲依霍光故事，以女配帝，太后意不欲也。莽设变诈，令女必入，因以自重，事在《莽传》。太后不得已而许之，遣长乐少府夏侯藩、宗正刘宏、少府宗伯凤、尚书令平晏纳采、太师光、大司徒马宫、大司空甄丰、左将军孙建、执金吾尹赏、行太常事太中大夫刘歆及太卜、太史令以下四十九人赐皮弁素绩，以礼杂卜筮，太牢祠宗庙，待吉月日。
《汉书·卷九十七下·外戚传第六十七下》：明年春，遣大司徒宫、大司空丰、左将军建、右将军甄邯、光禄大夫歆奉乘舆法驾，迎皇后于安汉公第。宫、丰、歆授皇后玺绂，登车称警跸，便时上林延寿门，入未央宫前殿。群臣就位行礼，大赦天下。益封父安汉公地满百里，赐迎皇后及行礼者，自三公以下至驺宰执事长乐、未央宫、安汉公第者，皆增秩，赐金、帛各有差。
《汉书·卷九十九上·王莽传第六十九上》：四年春，郊祀高祖以配天，宗祀孝文皇帝以配上帝。四月丁未，莽女立为皇后，大赦天下。
《汉书·卷九十七下·外戚传第六十七下》：皇后立三月，以礼见高庙。尊父安汉公号曰宰衡，位在诸侯王上。赐公夫人号曰功显君，食邑。封公子安为褒新侯，临为赏都侯。
《汉书·卷一十三·平帝纪》：夏，皇后见于高庙。加安汉公号曰“宰衡”。赐公太夫人号曰功显君。封公子安、临皆为列侯。
《汉书·卷九十九上·王莽传第六十九上》：其秋，莽以皇后有子孙瑞，通子午道。子午道从杜陵直绝南山，径汉中。
《汉书·卷九十七下·外戚传第六十七下》：后立岁余，平帝崩。莽立孝宣帝玄孙婴为孺子，莽摄帝位，尊皇后为皇太后。
《汉书·卷九十九上·王莽传第六十九上》：始建国元年正月朔，莽帅公侯卿士奉皇太后玺韨，上太皇太后，顺符命，去汉号焉。······莽乃策命孺子曰：“咨尔婴，昔皇天右乃太祖，历世十二，享国二百一十载，历数在于予躬。《诗》不云乎？'侯服于周，天命靡常。’封尔为定安公，永为新室宾。於戏！敬天之休，往践乃位，毋废予命。”又曰：“其以平原、安德、漯阴、鬲、重丘，凡户万，地方百里，为定安公国。立汉祖宗之庙于其国，与周后并，行其正朔、服色。世世以事其祖宗，永以命德茂功，享历代之祀焉。以孝平皇后为定安太后。”
《汉书·卷九十七下·外戚传第六十七下》：三年，莽即真，以婴为定安公，改皇太后号为定安公太后。太后时年十八矣，为人婉有节操。自刘氏废，常称疾不朝会。莽敬惮伤哀，欲嫁之，乃更号为黄皇室主，令立国将军成新公孙建世子礻象饰将医往问疾。后大怒，笞鞭其旁侍御。因发病，不肯起，莽遂不复强也。
《汉书·卷九十七下·外戚传第六十七下》：及汉兵诛莽，燔烧未央宫，后曰：“何面目以见汉家！”自投火中而死。
长乐少府夏侯藩等：公女渐渍德化，有窈窕之容，宜承天序，奉祭祀。
班固：为人婉约，有义举之节，堪称女中英烈。
王钊：嬿，莽公之女也，孝贤之楷模，效法其父也，无愧于心矣。
鹅湖逸士：平帝之王皇后、三国时孙翊之妻徐氏、吴景帝之后朱佩兰，此数人者，类皆淡雅绝俗，举止大方，窈窕而不失为丽。
父亲：王莽
母亲：孝睦皇后
兄弟：
隐太子王宇
戾太子王获
新迁王王安
统义阳缪王王临
功修公王兴
功建公王匡
姐妹：王晔、王捷
丈夫：孝平皇帝刘衎
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