作为世界范围内第一大常见肿瘤，肺癌也是临床科学研究的一大热门领域。据不完全统计，肺癌相关的国自然项目接近肿瘤项目总数的10%，每年发表SCI文章逾万篇。纵观这些标书和文章，最经典的思路就是研究某个抑癌基因的失活或者原癌基因的激活了。那么问题来了，如何根据实验需要，对目的基因进行有效的操作呢？ 古人云“工欲善其事，必先利其器”。对于这些操作工具的了解，其实也不可小视。
今天就给大家分享肺癌研究中，慢病毒工具的应用，14年的经验积累倾囊送出，包括吉凯独家的预实验数据哦~一目了然有木有？
慢病毒是一种实现高效体外体内细胞感染的工具。慢病毒能够将外源基因整合入宿主细胞的基因组，使其随细胞增殖稳定表达，并且对分裂期和非分裂期的细胞均有较高感染能力，加之其安全性高、毒性低的特点 , 慢病毒已经成为现代细胞生物学研究中一种广泛应用的基因传递工具。
一 我的实验需要哪种慢病毒载体？
启动子、荧光标记、抗性标签是我们选择载体需要考虑的三大要素。实验不同，这些元件也需要相应变化。下图帮大家梳理了常用载体的选择方案，看一看，是否清晰了呢？
二 我需要哪种细胞模型？慢病毒感染效果如何？
做肺癌研究的筒子可不用担心没好用的工具细胞，这里有各种腺癌、鳞癌、大/小细胞及其他肺癌的常用细胞系，再也不怕用错细胞啦！每株细胞都配有吉凯独家的预实验数据和吉凯病毒发表的参考文献，快来瞅瞅吧～
*更多更全的预实验信息，可咨询当地业务员
三 细胞实验效果不错，那动物实验怎么做？
肺癌研究中动物实验主要分为两种类型：I成瘤实验；II 病毒直接注射动物。
Ⅰ.成瘤实验的操作较为常规，先在体外使用病毒感染细胞，再将感染好的细胞注射入动物体内成瘤。接种手法根据接种部位的不同而不同，肺癌中用到最多的还是皮下和原位两种。
*注：原位成瘤时，若不剖开体表成像，推荐使用luciferase。
Ⅱ.病毒直接注射动物。大家注意了，因是活体注射，能够注射入动物体内的病毒体积有限，此类实验对病毒质量要求更高。所用的病毒需经过特殊纯化处理，确保滴度高，毒性小，不易引起炎症反应。此处以瘤内注射为例。
上海吉凯基因化学技术有限公司成立于2002年，拥有BSL-2级别的慢病毒包装实验室。病毒生产线通过ISO9001质量管理体系验证，月均定制基因病毒产品包装超过1000次。慢病毒生产采用6项QC检测、病毒纯度分级纯化以及病毒滴度绝对定量检测确保病毒质量。
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参考文献
【1】 He D, Wang J, Zhang C, et al. Down-regulation of miR-675-5p contributes to tumor progression and development by targeting pro-tumorigenic GPR55 in non-small cell lung cancer[J]. Molecular cancer, 2015, 14(1): 1.
【2】 Li J, Li X, Ren S, et al. miR-200c overexpression is associated with better efficacy of EGFR-TKIs in non-small cell lung cancer patients with EGFR wild-type[J]. Oncotarget, 2014, 5(17): 7902.
【3】 Fu Q F, Liu Y, Fan Y, et al. Alpha-enolase promotes cell glycolysis, growth, migration, and invasion in non-small cell lung cancer through FAK-mediated PI3K/AKT pathway[J]. Journal of hematology & oncology, 2015, 8(1): 1.
【4】Chen B, Zhang W, Gao J, et al. Downregulation of ribosomal protein S6 inhibits the growth of non-small cell lung cancer by inducing cell cycle arrest, rather than apoptosis[J]. Cancer letters, 2014, 354(2): 378-389.
【5】 Zeng J, Liu D, Qiu Z, et al. GSK3β overexpression indicates poor prognosis and its inhibition reduces cell proliferation and survival of non-small cell lung cancer cells[J]. PloS one, 2014, 9(3): e91231.
【6】 Ni Z, Tao K, Chen G, et al. CLPTM1L is overexpressed in lung cancer and associated with apoptosis[J]. PloS one, 2012, 7(12): e52598.
【7】 Zhang S, Liu L, Wang R, et al. MicroRNA-217 promotes angiogenesis of human cytomegalovirus-infected endothelial cells through downregulation of SIRT1 and FOXO3A[J]. PloS one, 2013, 8(12): e83620.
【8】 Qi W, Chen J, Cheng X, et al. Targeting the Wnt‐Regulatory Protein CTNNBIP1 by microRNA‐214 Enhances the Stemness and Self‐Renewal of Cancer Stem‐Like Cells in Lung Adenocarcinomas[J]. Stem Cells, 2015, 33(12): 3423-3436.
【9】 魏淑珍, 孙宇, 杨志坚, 等. EGFP标记的人肺癌裸鼠原位移植模型的建立[J]. 中国肺癌杂志, 2010 (7): 670-675.
【10】周菁, 徐瑜, 张明慧, 等. 瘤内注射慢病毒载体介导的 Bmi1-shRNA 对 A549 皮下移植瘤的抑制作用[J]. 第三军医大学学报, 2010, 32(20): 2177-2180.
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