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食用菌制种技术(二)

三、接种设备

接种设备,是指分离和扩大转接各级菌种的专用设备,主要有接种室、接种箱、超净工作台以及各种接种工具。

(一)接种室

接种室又称无菌室,是进行菌种分离和接种的专用房间。此室的设置不宜与灭菌室和培养室距离过远,以免在搬运过程中造成杂菌污染。生产量较大的菌种厂,应充分注意各个工作间的位置安排,总体布局参见下图。

接种室的面积一般5m2~6m2,高2m~3m即可,过大过小都

难于保证无菌状态。接种室外面设缓冲间,面积约2m2。门不宜

对开,最好安装移动门。接种室内的地面和墙壁要求光滑洁净,

便于洗清消毒。室内和缓冲间装紫外线灯(波长265nm,功率30W)

及日光灯各一支。 接种室具有操作方便,接种量大和速度快

等优点,适宜于大规模生产。

(二)接种箱

缓冲室

接种箱是供菌种分离,移接的专用木制箱,实际上是缩小的接种室。接种箱有多种形式和规格,医药器械部门出售的接种箱,结构严密,设备完善,但价格较高。目前多数生产者采用木材和玻璃自己加工制作成一人或双人操作箱,其样式和大小大致。

接种箱内顶部装紫外线杀菌灯和日光灯各一盏。箱前(或箱后)的两个圆孔装上40cm长的布袖套或橡皮手套,双手由此伸入操作。圆孔外要设有推门,不操作时随即关门。箱体安装玻璃,木板均要注意密封,箱的内外均用油漆涂刷。

接种箱结构简单,制造容易,造价较低,移动方便,易于消毒灭菌,由于人在箱外操作,气温较高时也能维持作业,适合于专业户制作母种、原种。

(三)超净工作台

超净工作台是一种局部层流(平行流)装置,能够在局部造成洁净的工作环境。室内的风经过滤器送入风机,由风机加压送入正压箱,再经高效过滤器除尘,洁净后通过均压层,以层流状态均匀垂直向下进入操作区(或以水平层流状态通过操作区),以保证操作区有洁净的空气环境。由于洁净的气流是匀速平行地向着一个方向。空气设有涡流,故任何一点灰尘或附着在灰尘上的杂菌,很难向别处扩散转移,而只能就地排除掉。因此,洁净气流不仅可以造成无尘环境,而且也是无菌环境。

使用超净工作台的好处是接种分离可靠,操作方便,尤其是炎热夏季,接种人员工作时感到舒畅。

(四)接种工具

接种工具是指分离和移接菌种的专用工具,样式很多。用于菌种分离\母种制作和转接母种的工具,因大多在试管斜面和平板培养基上操作,一般是用细小的不锈钢丝制成。用于原种和栽培种转接的工具,因培养基比较粗糙紧密,可用比较粗大的不锈钢制成。

四、培养菌种设备

培养菌种设备,主要是指接种后用于培养菌丝体的设备,如恒温培养室、恒温培养箱、摇床机等。

(一)恒温培养室

恒温培养室用于培育栽培种或培育较多的母种和原种。恒温培养室的大小,视菌种的生产量而定。室内放置菌种培养架。加温可采用电加温器或安装红外线灯加温,最好在电加温的电源上安一个恒温调节器,使之能自动调节温度。

(二)恒温培养箱

在制作母种和少量原种时,可采用恒温培养箱,根据需要使温度保持在一定范围内进行培养。市售的恒温箱多为专业厂家生产的电热恒温培养箱,使用比较方便,但价格较贵,而且购买和运输多有不便。因此可以用木板自己制造。自制恒温箱用一只大木箱做成,箱的四壁及顶、底均装双层木板,中间填充木屑隔水保温,底层装上石棉板或其它绝缘防燃材料,箱内装上红外线灯泡或普通灯泡加温,箱内壁安装自动恒温器,箱顶板中央钻孔安装套有橡皮塞的温度计以测试箱内温度。

(三)摇瓶机(摇床)

食用菌进行深层培养或制备液体菌种时,需设置摇瓶机。摇瓶机有往复式或旋转式两种。往复式摇瓶机的摇荡频率是每分钟80~120次,振幅(往复距)为8cm~12cm。旋转式的摇荡频率为每分钟180~220次。旋转式的耐用,效果较好。

五、实验室设备

具有一定规模的专业菌种厂,为了便于对菌种、培养料及其代谢产物进行检查、观察、化验和分析,有必要设置个普通的实验室。实验室常用的仪器设备有天平、干湿温度计、玻璃器皿和器具、孢子采集器、光学显微镜、电冰箱、冷藏箱及电热干燥箱等,可根据单位的具体条件设置。

(一)天平

天平的类型有多种,常用的托盘天平,又称架式天平,称量为1000g,感量1.0g(即精确度为士1.0g);扭力天平,称量100g,感量为0.01g;分析天平,称量100g,感量0.1mg~1.0mg。

(二)干湿温度计

常用的是市售干湿球温度计,可同时观察环境的温度与湿度。将干球温度计的读数减去湿球温度计的读数得差数。旋转制动螺丝,对准其差数,差数与干球温度垂直交叉处的读数即为空气的相对湿度。例如,干球温度计的读数为22℃,湿球温度计的读数为19.5℃,干湿温度差2.5。在纵行22℃与横行2.5垂直交叉处的读数为73,即说明空气相对湿度73%。

自动记录温度计,能自动记录一天24小时内的温湿变化,因价格较贵,一般菌种厂很少购置。购买2支普通温度表(用前最好进行校对),找一个薄木板,将2支温度表并列固定在木板上。 2支温度表中间留出10cm左右的间隔,以便安放盛水的小瓶。其中1支温度表的水银柱头,用易吸水的纱布条包裹扎牢,纱布的另一端放入装有清水的小瓶内作为湿球,即成为自制干湿球温度计。观测时先看干、湿温度计的度数,计算出干湿球温度差,再查看温湿度换算表即可。例如:干球温度计读数为18℃,湿球温度计读数为16℃,在温、湿度换算表纵行中查找18℃,再查横行干、湿温度差为2℃,其垂直交叉处的读数为76,即空气相对湿度为76%。温湿度换算见附表。无条件的单位自己可制造干湿球温度计。

(三)玻璃器皿和器具

常用的玻璃器皿有烧杯、烧瓶、培养皿、漏斗、量筒、酒精灯、称量瓶、试管、接管研钵等;其它器具有剪刀、镊子、试管架等。

(四)孢子采集器

是采取菌类孢子的一种专用装置,它是由有孔钟罩、搪瓷盘、培养皿、不锈钢丝支架和纱布等组成(见图4—8)。

(五)光学显微镜

采用一般双目或单目光学显微镜,观察菌丝的生长状况,分辨杂菌及病虫害的种类等。显微镜是贵重的光学仪器,使用时应严格操作程序,平时应避免和酸碱、氯仿、乙醚、酒精等放在一处,以免受腐蚀。

(六)电冰箱和冷藏箱

电冰箱和冷藏箱是冷冻器具中的两种小型冷藏设备,在食用菌制种中主要用于保藏菌种和其他物品。

(七)电热干燥箱

用于烘干测定产品及配料等的含水量,以及各种玻璃器皿的干热消毒。

六、培养容器

培养食用菌的容器有玻璃容器和塑料容器两大类。玻璃容器透明度好,污染率低,但价格较高,且易损坏。其主要用于菌种分离、保存、鉴定和母种、原种的制作。塑料容器较轻便,成本低,但较易污染杂菌,且不易重复使用(薄膜容器)。其一般用来制作栽培种或直接用于栽培。具体品种、规格和用途见表4—1。

在食用菌生产中,进行熟料栽培或制作栽培种,常常用到塑料袋。下面是选择塑料袋的根据和鉴别塑料袋的一般方法。
进行常压蒸气灭菌,可用聚乙烯塑料袋,厚度0.05mm~0.06mm(5~6丝)为宜。其中高压聚乙烯塑料袋透.明度高于低压聚乙烯塑料袋,但低压聚乙烯塑料的抗张强度是高压聚乙烯塑料的2.2倍(厚度相同时),且低压聚乙烯能耐120℃高温。食用菌生产中应首先选用低压聚乙烯塑料袋。
 进行高压蒸汽灭菌时,宜用聚丙烯塑料袋,厚度0.06毫米(6丝)为宜。聚丙烯能耐1500℃高温,但其冬季柔韧性差,低温时使用应小心。
聚氯乙烯塑料有毒,不到100℃就软化。熟料栽培或制种时不能使用聚氯乙烯塑料袋。
塑料鉴别可采用简便易行的灼烧法。取少量样品,用镊子夹住,点燃,仔细观察塑料燃烧时的易燃性、离火后的特征、火焰特征、软化拉丝现象等,即可鉴别样品种类(表4—2)。

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