两种儿茶素成分逆转人肝癌和口腔鳞癌MDR作用的体外实验研究

【摘要】：目的：研究两种儿茶素成分对人肝癌和口腔鳞癌MDR的逆转作用。方法：用CN1060488A专利法并作改进分离和纯化两种儿茶素单体成分，与化疗药联合作用于体外培养的两株MDR细胞，以MTT法检测细胞耐药性及药物的细胞毒作用，RT-PCR法检测MDR_1基因的表达，FACS检测P-gp的表达、以Rh-123为底物检测P-gp的功能，荧光分光光度法研究肿瘤细胞内药物的累积量，原位组织化学法及琼脂糖凝胶电泳法检测肿瘤细胞的凋亡，PI染色FACS法检测凋亡过程中细胞周期的变化。结果：从广西绿茶中提取得到两种儿茶素单体成分ECG、EGCG；人肝癌细胞BEL-7404和BEL-7404／Adr对ADM的IC_(50)分别为0.94mg／L和36mg／L，人口腔癌细胞KB和KBV200对VCR的IC_(50)分别0.036mg／L和1.91mg／L，两株耐药肿瘤细胞的耐药倍数分别为38倍(BEL-7404／Adr)和53倍(KBV200)；ECG的细胞毒性(IC_(50))为：504mg／L(对BEL-7404)、2200mg／L(对BEL-7404／Adr)、462mg／L(对KB)、1250mg／L(对KBV200)，EGCG的细胞毒性(IC_(50))为：545mg／L(对BEL-7404)、1300mg／L(对BEL-7404／Adr)、262mg／L(对KB)、480mg／L(对KBV200)；用60mg／L的ECG和14mg／L的EGCG分别联合2.3mg／L和1.9mg／L的ADM对耐药人肝癌细胞BEL-7404／Adr的细胞毒增敏倍数分别为15.8倍和19.2倍，用80mg／L的ECG和30mg／L的EGCG分别联合0.24mg／L和0.14mg／L的VCR对人耐药口腔 【论文】两种儿茶素成分逆转人肝癌和口腔磷癌MDR作用的研究癌细胞KBVZOO的细胞毒增敏倍数分别为8倍和13倍;两种儿茶素单体与化疗药物联合应用可降低MDR，的表达，下调P一gP的表达，使肿瘤细胞膜上的P一gP整体泵出药物能力下降沪0.01);两种儿茶素成分可提高肿瘤细胞内化疗药物的累积量，促进肿瘤细胞的凋亡，使肿瘤细胞增殖阻滞在S/GZ期。结论:儿茶素成分ECG、EGCG具有体外逆转耐药人肝癌细胞BEL一7404/A dr和耐药人口腔癌细胞KBVZoo的多药耐药作用，机制可能与降低MDR，表达，下调P一gP表达，从而提高肿瘤细胞内药物的累积量，促进肿瘤细胞的凋亡作用有关。