淀粉样变性肾病诊断的病理技术探析

目的：深度解析淀粉样变性肾病的临床诊断病例技术。方法：通过对2000例肾活检病例诊断资料进行分析，结合透射电镜检查、光镜以及免疫病理等多种病理技 术，探讨淀粉样变性肾病的病理诊断技术。结果：通过对收治的2000例肾活检病例检出的15例淀粉样变性肾病患者研究发现，淀粉样变性病中肾脏损伤的机制 主要包括两方面：即淀粉样纤维蛋白在细胞外的沉积和淀粉样蛋白前体对肾组织有毒性；患者的临床表现与患者的年龄、合并疾病等有着密切的联系。结论：通过对 肾淀粉样变性病的临床病理技术方面近几年来的研究成果进行阐述，预期为临床针对此病的早期诊断和治疗提供有效的科学依据。通过对此病病理的进一步研究，希 望为临床制定相应的治疗策略提供新思路。
　　淀粉样变性病（amyloidosis）的临床病理机制为由一组有着相似的超微结构，但化学成分及病因不同的淀粉样蛋白质在细胞外组织沉积， 形成不可溶解的原纤维的疾病。由于淀粉样蛋白物质不断累积增加，继而引发受累器官出现进行性的功能障碍甚至衰竭。临床累及的器官多见于患者的胃肠道、肝 脏、心脏和肾脏。当淀粉样变性累及肾脏器官时称肾淀粉样变性病（renal amyloidosis）。虽然淀粉样变性肾病很少见与临床，但是由于人类年龄结构不断攀升，其发病率也呈逐年上升的趋势。而在60岁以上的肾病综合征患 者中，淀粉样变性肾病占到了10%～12%[1]。肾脏是系统性淀粉样变性病最常累及的器官之一，肾脏事件也常常是系统性淀粉样变性病首要临床表现。若得 不到及时有效的治疗，肾淀粉样变性病很快发展至终末期肾脏病（end-stage renal disease，ESRD），对患者生命造成威胁。临床针对该病的诊断和分型主要依赖于组织病理学，本文现通过结合2000例肾活检临床资料，采用多种病 理技术对淀粉样变性肾病诊断进行深入分析，现报告如下。
　　1 资料与方法
　　1.1 一般资料
　　本次研究对象为2011年3月-2013年3月笔者所在医院肾内科收治的2000例肾活检病例检出的15例淀粉样变性肾病患者作为研究对象，其中男9例，女6例，进行肾活检时，年龄29～66岁，平均（45.2±15.4）岁。
　　1.2 方法
　　统计分析患者在进行肾活检时的年龄、性别和血压情况。高血压的诊断标准根据世界卫生组织1999年颁布的高血压诊断标准：收缩 压>140 mm Hg或舒张压>90 mm Hg。对肾脏病理进行检查，研究所取标本的肾小球数量都保持在10个以上，对每例标本进行电镜、光镜和免疫荧光检查。首先是按照规范对标本进行固定、包 埋、切片、脱蜡至水；然后配置染液，主要包括PASM染液，具体方法根据染液配置标准进行，本文在此不做赘述，其次是要配置试验使用的储备液、碱性工作 液、刚果红源液、碱性刚果红工作液、碱性高锰酸钾溶液、草酸溶液等，对碱性刚果进行染色，再对碱性高锰酸钾溶液氧化刚果红染色；最后是对标本进行偏振光显 微镜检查和免疫组织化学染色，在研究过程中肾小球的观察指标包括系膜基质增多、系膜细胞增生和肾小球硬化，肾小管间质病变主要表现形式是淋巴间质纤维化、 细胞浸润、肾小管萎缩。
　　1.3 统计学处理
　　采用SPSS 13.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，比较采用t检验。P<0.05为差异有统计学意义。
　　2 结果
　　通过对本组15例淀粉样变性肾病患者研究发现，淀粉样变性病中肾脏损伤的机制主要包括两方面：（1）淀粉样纤维蛋白在细胞外的沉积和淀粉样蛋白前体对肾组织有毒性；（2）患者的临床表现与患者的年龄、合并疾病等有着密切的联系。
　　3 讨论
　　淀粉样变性是指以慢性细胞外不溶性纤维丝蛋白沉积的均匀、无定形物质为特征的一组病变的统称，临床上分为原发性和继发性淀粉样变两种。前者无 基础病因，后者常继发于慢性炎症或感染性疾病（如结核、骨髓炎、支气管扩张、肺脓肿等）、肿瘤（多发性骨髓瘤、何杰金病等），少数见于遗传性家族性疾病 （如家族性地中海热）。目前多以免疫组化特点分类，原发性淀粉样变和多发性骨髓瘤所致的淀粉样蛋白为AL淀粉样蛋白，继发性淀粉样变则为AA蛋白。淀粉样 物质可在体内各器官和组织的血管壁内沉积，产生多器官病变，肾脏是最常见的受累器官。
　　本次研究结果显示，不同的淀粉样蛋白，其前提蛋白、肾脏受累部位以及其他器官受累各不一样：淀粉样蛋白轻链的前体蛋白为单克隆免疫球蛋白轻 链，肾脏受累部位为肾小球、肾血管、肾间质，其他器官受累包括：脏、肝脏、胃肠道、脾脏、神经系统、软组织、甲状腺、肾上腺；淀粉样血清蛋白的前体蛋白为 血清淀粉蛋白，肾脏受累部位为肾小球、肾血管、肾间质，其他器官受累包括：质肝脏、胃肠道、脾脏、自主神经系统、甲状腺、心脏；淀粉样纤维蛋白的前体蛋白 为淀粉样纤维蛋白原a链，肾脏受累部位为肾小球，其他器官受累包括：肝脏、脾脏；淀粉样载脂蛋白AⅠ的前体蛋白为载脂蛋白AⅠ，肾脏受累部位为肾小球、肾 间质，其他器官受累包括：肝脏、心脏、皮肤、喉头；淀粉样载脂蛋白AⅡ的前体蛋白为载脂蛋白AⅡ，肾脏受累部位为肾小球、肾血管，其他器官受累包括：肝 脏、心脏、皮肤、肾上腺、骨髓；淀粉样溶菌酶的前体蛋白为溶菌酶，肾脏受累部位为肾小球、肾血管、肾间质，其他器官受累包括：脏、胃肠道、脾脏、淋巴结、 肺、甲状腺、唾涎腺；淀粉样转甲状腺素蛋白的前体蛋白为转甲状腺素蛋白，肾脏受累部位为肾小球、肾间质，其他器官受累包括：肝脏、自主神经系统；淀粉样钙 结合丝蛋白的前体蛋白为钙结合丝蛋白，肾脏受累部位为肾小球、肾间质，其他器官受累包括：神经系统；淀粉样β2微球蛋白的前体蛋白为β2微球蛋白，肾脏受 累部位未知，其他器官受累包括：透析相关淀粉样变性、骨关节组织、胃肠道（小部位）、血管、心脏。
　　针对患者的不同类型的临床淀粉样变的表现形式，其对应的治疗方式也就存在着一定的差异性，临床仅仅是对淀粉样变做出诊断尚且不足，要做到针对 患者的不同淀粉样做出正确的分型。不同前体蛋白来源的淀粉样变在光镜下的组织形态学改变和电镜下的纤维丝结构并无显著区别。常用的鉴别淀粉样病变气体蛋白 的方法便是免疫荧光法和免疫组化法。为了加强临床诊断的准确性，抗体的使用最好做到统一，包括AL-κ、AL-λ、AA、AFib、ATTR、 AApoAI和ALys。过去的研究过程中一直讲免疫组化法的作为针对于AA的诊断最佳方式，但是针对AL型，由于在形成淀粉样变的过程中轻链可能发生断 裂，使部分抗原决定簇缺失，所以可能对抗体无反应，出现假阴性。近年来研究显示，应用多种抗体进行免疫组化染色，使得肾脏淀粉样变明确分型的比例大大提高。