单克隆抗体

【教材分析】

在细胞融合和单克隆抗体的教学中，教师可以启发学生回顾植物体细胞杂交技术的过程，再通过动植物细胞异同点的比较，引导学生大胆的推测出动物细胞融合与植物原生体融合的原理和基本方法相同

【学情分析】

对植物细胞过程学生已经了解，而本节的知识与植物的很想，相信学生能掌握的不错

【教学目标】

知识目标

举例说出动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用

能力目标

收集有关动物细胞工程研究进展和应用方面的资料

情感态度价值观目标

关注动物细胞工程的发展和应用前景

【教学重难点】

动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用

【教学方式】

课前预习

【教学用具】

挂图及多媒体辅助教学

【教学课时】

1课时

【教学过程】

单克隆抗体

1．概念：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。

2．特点：化学性质单一，特异性强，灵敏度高。

（1）获得杂交瘤细胞

① 将抗原注入小鼠体内获得效应B细胞

② 效应B细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合

③ 用特定培养基筛选出杂交瘤细胞

（2）动物细胞培养

① 筛选能够产生所需抗体细胞群

② 再生培养液或小鼠腹腔中培养

（3）提取单克隆抗体

：从培养液或小鼠腹水中提取

3．单克隆抗体的制备：（展示课件）

动物细胞融合

单克隆抗体

抗原

效应

B淋巴细胞

杂交瘤细胞

筛选（     ）

细胞融合

免

疫

选特定抗体的细胞群继续培养（体外、体内）

提取

单克隆抗体

骨髓瘤细胞

方法：

特点：

☆

杂交瘤细胞具备双亲的遗传物质，不仅具有B淋巴细胞产生特异性抗体的能力，还具有骨髓瘤细胞在体外培养条件下大量增殖的能力。从而可以克服单纯B淋巴细胞不能无限增殖的缺点，能力大量产生单克隆抗体。

4.单克隆抗体的应用：

（1）诊断疾病：诊断病毒引起的疾病和用癌细胞抗原制备的单克隆抗体定位诊断。

（2）药物导向治疗：运用药物与单克隆抗体连接在一起制成“生物导弹”

（3）分离和纯化抗原分子。

☆应抓住三个一，即“一种诱导细胞融合的新方法——灭活的病毒；一种新细胞——杂交瘤细胞；一种优势——单克隆抗体的特异性强、灵敏度高的抗体）。

☆细胞工程中的一些技术手段的比较

1、植物组织培养和动物细胞培养的比较

项目

主要原理

培养基

结果

培养目的

植物组织培养

细胞全能性

固体：营养物质、激素

培育成植株

快速繁殖培育无病毒植株

动物细胞培养

细胞增殖

液体：营养物质、动物血清

培育成细胞株或细胞系

获得细胞或细胞产品等

2、植物体细胞杂交和动物细胞融合

项目

原理

融合方法

诱导手段

用途

植物体细胞杂交

细胞膜的流动性

去细胞壁后诱导原生质体融合

离心、振动、电刺激、聚乙二醇诱导

获得杂种植株

动物细胞融合

细胞膜的流动性

使细胞分散后诱导细胞融合

（同上）再加上灭活的病毒诱导

制备单克隆抗体

3、植物体细胞杂交（番茄马铃薯植株）和动物细胞融合

植物细胞杂交(番茄马铃薯植株)

动物细胞融合(单克隆抗体制备)

过   程

第1步

原生质体的制备(酶解法)

正常小鼠的处理(注射灭活抗原)

第2步

原生质体的融合(物化法)

动物细胞融合(物化生法)

第3步

杂种细胞的筛选和培养

杂交瘤细胞的筛选和培养

第4步

杂种植株鉴定

提纯单克隆抗体(特异性强、灵敏度高)

原理/理论基础

细胞膜的流动性、植物细胞的全能性

细胞膜的流动性、细胞增殖

融合前处理

酶解法除去细胞壁：纤维素酶、果胶酶

注射特定抗原法免疫处理正常小鼠

促融因子

物理法：电刺激、离心、振动

化学法：聚乙二醇

物化法：与植物相同

生物法：灭活的仙台病毒

意义和用途

(1)克服有性远缘杂交不亲和性障碍

(2)培育作物新品种

有助于疾病的诊断、治疗、预防

4、受精作用、原生质体融合、动物细跑融合

受精作用

原生质体融合

动物细跑融合

不

同

点

细胞类型不同

精子与卵细胞

体细胞

体细胞

细胞来源不同

来自同一生物个体

一般来自不同种的生物个体

一般来自不同种的生物个体

染色体数目变化不同

2N

2N+2N不一定是2N×2

2N+2N不一定是2N×2

融合条件不同

不需人工诱导

需人工诱导

需人工诱导

同

都有两个细胞融合成一个细胞，并且融合成这个细胞的遗传物质都是由原来的两个细胞决定的

5、植物体细胞杂交和多倍体育种

植物体细胞杂交

多倍体育种

不

同

点

基本原理不同

原生质体融合和组织培养

染色体数目的变异

方法不同

原生质体融合

秋水仙素处理萌发的种子和幼苗

染色体来源和数目不同

一般来自不同种的生物，染色体不一定是倍数关系（2N+2N）

来自同种生物，加倍的是同源染色体

同

都是通过改变细胞的染色体数目来改变遗传物质，从而改变生物的性状。

【本节小结】

本节的知识重点在于单克隆抗体的制备，要求学生对于流程问题要重点掌握还有应用

【板书设计】

一．     动物细胞融合

1.     概念

2.     原理

3.     方法

4.     意义

二．     单克隆抗体

1．          制备

2．          应用

【课后作业】

立体设计相关习题

【课后反思】

学生对动物细胞融合这部分知识掌握的还可以，但单克隆抗体里的流程里的有些问题还是搞不懂，在讲解题时的时候要注意提醒同学们注意