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探究酶活性最适条件的实验
湖南省耒阳市第一中学 周 伟
一、实验类型及设计
1、探究最适温度的实验
(1)自变量的操纵:设置一系列梯度温度(T1、T2、…、Tn)。
(2) 设计思路:
(3)步骤写作:
3、探究最适pH的实验
(1)自变量的操纵:设置一系列梯度pH值(pH1、pH2、…、pHn)。
(2)设计思路:
(3)步骤写作:
二、典型例题透析
例题 果胶是植物细胞壁以及胞间层的主要组成成分之一。果胶酶能够分解果胶,瓦解植物细胞壁及胞间层。在果汁生产中应用果胶酶可以提高出汁率和澄清度。请你帮助完成以下有关果胶酶和果汁生产的实验课题。
实验用具和材料:磨浆机、烧杯、试管、量筒、刀片、玻璃棒、漏斗、纱布等。苹果、质量分数为2%的果胶酶溶液、蒸馏水等。
实验一:果胶酶在果汁生产中的作用
实验方法及步骤:
⑴将苹果洗净去皮,用磨浆机制成苹果泥,加入适量蒸馏水备用。
⑵取两个100ml洁净的烧杯,编号为1、2号,按相应程序进行操作,请把表中未填写的内容填上。
操作顺序
项目
烧杯
1
2
在烧杯中加入苹果泥
20mL
20mL
2mL
注入蒸馏水
在恒温水浴中保温,并用玻璃棒不时搅拌
10min
10min
⑶取出两个烧杯,同时进行过滤。观察或比较                                 ,并记录结果。
实验结果的预测及结论:
如果是                                        ,则说明果胶酶对果胶的水解具有催化作用。
实验二:验证果胶酶在果汁生产中的作用
⑴在课题实验步骤中,在完成“烧杯中分别加入苹果泥、试管中分别加入果胶酶溶液、编号、编组”之后,有下列两种操作:
方法一:将试管中的果胶酶溶液和烧杯中的苹果泥相混合,再把混合液的pH分别调至4、5、6、……10。
方法二:将试管中的果胶酶溶液和烧杯中的苹果泥的pH分别调至4、5、6、……10,再把pH相等的果胶酶溶液和苹果泥相混合。
请问哪一种方法更为科学:           ,并说明理由:                           。
⑵实验步骤中也有玻璃棒搅拌的操作,其目的是使                         ,以减少实验误差。
⑶如果用曲线图的方式记录实验结果,在现有的条件下,当横坐标表示pH,纵坐标表示            ,实验的操作和记录是比较切实可行的。根据你对酶特性的了解,在图20中选择一个最可能是实验结果的曲线图:      。若实验所获得 的最适宜=m,请你在所选的曲线图中标出“m”点的位置。
【参考答案】
实验一:
(2)注入果胶酶溶液;2ml (3)在相同时间内滤出的果汁体积和果汁的澄清度
实验结果的预测及结论;相同时间内1号烧杯滤出的果汁体积比2号烧杯滤出的果汁体积大,澄清度高
实验二:
(1)方法二;方法二的操作能够确保酶的反应环境从一开始便达到实验预设的pH(或回答“方法一的操作会在达到预定pH之前就发生了酶的催化反应”)(2)酶和反应物(果胶)充分的接触(3)果汁体积;甲;
【解析】
本题以“果胶酶在果汁生产中的应用”为背景,综合考查了学生酶方面的基础知识和实验设计能力。解答本题需具备以下知识:
(1)对实验原理的理解:果胶酶是一类酶的酶的总称,其作用是将果胶分解成半乳糖醛酸,因而能提高出汁率和澄清度。依原理和结论就可推出“可能的实验结果”(探究性实验)。特别注意实验结果实际上就是实验现象,而实验结论是对实验现象的分析与讨论,两者不能混淆。
(2)对实验原则的理解:①对照原则,即“实验一”中实验组加酶液,对照组加蒸馏水。②等量原则,即酶液和蒸馏水均加2ml 。③无关变量的控制,即分别调节果胶酶溶液和烧杯中的苹果泥pH至预定值,使反应环境的起始pH相同。
(3)对酶活性的理解:“酶的最适pH”即使酶促反应速率达到最大时的pH,pH过高或过低均会影响酶与底物的接合,从而使酶活性降低,甚至失活。
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