使用Spark 10M实时分析干细胞在分化过程中的细胞增殖1
生命科学及临床诊断
源自血管周祖细胞的间充质干细胞(MSC)属于多能成体干细胞,具有高度的自我更新能力。在体外培养条件下,它可以被定向诱导分化成脂肪细胞、软骨细胞、神经细胞、成骨细胞。
通常,向终末分化的细胞会失去自我更新的能力,这个过程会阻碍细胞增殖。认识细胞在分化和增殖间转换的分子机制,对人干细胞研究有举足轻重的意义。
在Spark
Spark
本实验在96孔微孔板中进行,间充质干细胞过夜贴壁后,我们将细胞培养液分组更换成以下四种定向诱导分化培养液:
Adipogenic(PromoCell C-28016)
osteogenic (PromoCell C-28013)
chondrogenic (PromoCell C-28012)
neurogenic (PromoCell C-28015)
细胞板置于Spark
干细胞的自我更新与分化间的平衡是受到精确调控的,且其终末分化被认为是会中止细胞增殖的。然而,在体外培养时,干细胞对分化刺激的反应有多快,我们知之甚少。本实验的目标就是监测MSC在体外分化早期的增殖特性。
一.WST-8试剂对细胞没有毒性,活细胞可以将其转化成黄色的水溶性甲臜,适合长时间实时监测细胞活性。下图表明,在分化的初始阶段,活性的上升是由于活细胞数量或细胞活力的增加。
图1. 实时测量WST-8转化获得干细胞分化过程中的活细胞数
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