2. 基因工程的载体如果选择灭活的动植物病毒，需要去掉与病毒复制有关的基因：防止病毒在宿主细胞中复制，给宿主带来伤害
3. 使用相同的限制酶切割目的基因和载体的目的：使目的基因和运载体具有相同的黏性末端，便于连接
4. 将目的基因插入到运载体上再导入受体细胞的目的是：使目的基因能够在受体细胞中稳定存在并遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。
5. PCR技术中 合成引物/扩增目的基因 的前提：具有一段已知的脱氧核苷酸序列
6. PCR技术在第3轮开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段
7. PCR技术将目的基因扩增N次，需要2（N+1）-2个引物，即子链数
8. PCR技术中设计的一对引物不能碱基互补配对
9. PCR技术需要提供：Taq酶、引物、dNTP、DNA模板
10. PCR扩增时退火温度太高，会破坏：引物与模板的碱基互补配对
11. PCR技术加入两种引物的作用：使Taq酶从引物的3’端开始连接脱氧核苷酸
12. 检测目的基因是否发挥功能的第一步：检测目的基因是否转录出相应的mRNA ; 方法：分子杂交技术
13. cDNA文库中所获取的目的基因不含有启动子、终止子和内含子
14. 基因工程的原理：基因重组
15. 与基因工程相比较蛋白质工程所具有的特点是：蛋白质工程可以生产出自然界中不存在的新蛋白质
16. 改造蛋白质结构最终是以改造基因来实现的，原因：改造基因的操作更容易，且改造后可以遗传
17. 识别启动子的是：RNA聚合酶
18. 限制酶作用于：磷酸二酯键
19. DNA鉴定：DNA在260mm的紫外线波段有一段强烈的吸收峰
20. DNA的鉴定：利用DNA在0.14mol/l NaCl溶液中溶解度最小的特性粗提取，然后通过二苯胺试剂来做鉴定，观察溶液是否变蓝
21. 对植物细胞用农杆菌转化法导入目的基因，添加一定量的酚类物质效果更好，原因：酚类物质吸引农杆菌移向植物细胞，利于农杆菌的侵染
22. 将质粒导入细菌常用CaCl2处理，作用：使细胞处于感受态，易于吸收外源DNA
23. 转基因技术的优势：能打破常规育种难以突破的物种之间的界限
24. 某基因留在宿主（植物）体内可能会造成的安全问题是：可能扩散到其他物种
25. 选择细菌作为受体的优点是：繁殖快，易培养，产物含量高，产物易分离
26. 培育脱毒苗选择：根尖或茎尖作为外植体。原因：根尖或茎尖病毒极少甚至无毒
27. 植物组织培养常选用的材料是：分生组织。原因：全能性高，易培养成愈伤组织
28. 植物组织培养中，将细胞培养成完整植株时需要的条件有：无菌，适宜的温度，一定的营养，一定浓度的植物激素等
29. 植物组织培养中，人工种子大体是由胚状体、不定芽、顶芽、和腋芽等材料，包埋胚状体的胶质以及人造种皮等三部分构成，包埋胚状体的胶质中富含营养物质是因为：胚状体的萌发初期不能进行光合作用
30. 植物组织培养脱分化的过程：无菌遮光处理
31. 利用人工种子繁殖后代属于：无性繁殖
32. 利用人工种子萌发的植株是否可育：不一定，由花粉发育而来的植株一般是不可育的，由体细胞发育而来的植株一般可育
33. 植物组织培养原理：植物细胞的全能性
34. 植物体细胞杂交中，如果将原生质体放入等渗溶液中，但是我们一般在去壁阶段使用浓度较大的溶液使细胞发生质壁分离，目的是：保持原生质体不被破坏
35. 植物体细胞杂交中，融合方法有：化学方法：PEG（聚二乙醇） 物理方法：离心、振动、电激
36. 植物体细胞杂交的操作原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性
37. 植物体细胞杂交的育种原理是：染色体变异
38. 植物体细胞杂交的研究在克服远缘杂交不亲和的障碍方面，取得了巨大突破
39. 单倍体培育在育种上的特殊意义是：明显缩短育种年限
40. 动物细胞培养中，使组织块或贴壁细胞分散成单个细胞用：胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理。目的是：解除接触抑制
41. 动物细胞培养中，原代培养是指：动物组织消化后的初次培养
42. 传代培养一般传到10~50代左右时，增值会逐渐缓慢，以至于完全停止，部分细胞的：细胞核核型会发生改变。继续培养时，少部分细胞发生了：突变，朝着等同于：癌细胞的方向发展，所以此时，这些细胞的细胞膜表面糖蛋白的量：减少
43. 动物细胞培养中，一般选用10代以内的的细胞做供体，原因：保持正常的二倍体核型
44. 动物细胞培养中，培养液需要放入CO2培养箱中培养。目的是：维持培养液中的PH值
45. 动物细胞培养中，培养液所需的营养物质：糖，氨基酸，促生长因子，无机盐，微量元素等。还需要加入血清，目的是：补充合成培养基中缺乏的生长因子
46. 动物细胞培养中，通常在:冷冻、液氮、低温条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞：代谢速率降低
47. 动物细胞融合中，融合的方法有：化学、物理(同植物细胞融合)、生物方法，生物方法利用灭活的植物病毒，灭活是指：用物理或化学的手段使病毒失去感染能力
48. 动物细胞融合的优点：突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能
49. 其他物种的基因可以在受体体内成功表达是因为：生物共用一套遗传密码子
50. 制备单克隆抗体中，杂交瘤细胞的特点是：既能无限增值又能产生特异性抗体
51. 制备单克隆抗体中获得杂交瘤细胞的目的是解决：淋巴细胞不能无限增殖、小鼠骨髓瘤细胞不能产生抗体的问题
52. 制备单克隆抗体时，从小鼠的脾中提取已免疫的B淋巴细胞
53. 制备单克隆抗体时，对小鼠注射抗原后能形成相应的B淋巴细胞的原因是：抗原进入小鼠体内引起特异性免疫
54. 制备单克隆抗体时，在扩大培养前，至少经过2次筛选。即在获得相应的B淋巴细胞后，将其与小鼠的骨髓瘤细胞融合，两两融合可产生3种细胞，之后用特定的选择培养基培养，在该培养基上：未融合的亲本细胞与融合的具有同种核的细胞都会死亡，再进行：克隆化培养和抗体检测，再进行体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖
55. 单克隆抗体的特点：灵敏度高，可大量制备，特异性强
56. 制备单克隆抗体的作用：作为诊断试剂，用于治疗疾病，运载药物（生物导弹）
57. 卵子发育到M2中期才具备受精能力。
58. 在体外受精前需要对精子进行获能处理。
59. 精子的获能方法有：在获能液中进行获能（啮齿类动物） 化学诱导法：一定浓度的肝素溶液或钙离子载体A23187溶液（牛）
60. 精子的顶体由高尔基体发育而来，顶体内含有顶体酶能协助精子穿过卵母细胞的放射冠和透明带
61. 防止多精入卵的生理屏障：透明带反应、卵细胞膜反应
62. 精子与卵子在发生上的重要区别是哺乳动物卵泡的形成和在卵巢的储备是在出生前完成的
63. 受精完成的标志：雌雄原核融合
64. 精子与卵子体外受精后，将受精卵移入：发育培养液中进行培养，以:检查受精卵状况和发育能力
65. 哺乳动物胚胎营养液成分：两盐（无机盐、有机盐） 两素（维生素、激素）两酸（氨基酸、核苷酸）还有血清
66. 是否受精的标志：在卵黄膜和透明带之间看到两个极体
67. 胚胎分割选择：桑葚胚或囊胚时期的胚胎进行操作（均等分割）
68. 胚胎分割产生的2至多个个体具有相同遗传性状的根本原因是：具有相同的遗传物质
69. 进行胚胎分割时，应注意：将胚胎均等分割，目的：以免影响胚胎的恢复及进一步发育
70. 胚胎移植时，移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础：子宫对外来胚胎不发生免疫排斥反应
71. 胚胎移植时，移植后的胚胎能在受体子宫中存活的原因是：胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但移入受体的供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受任何影响
72. 核移植时，选用未受精的卵母细胞去核后作为受体，原因是：卵细胞体积大，易操作，营养丰富，还含促进细胞核全能性表现的物质
73. 牛胚胎移植前，要对供体母牛与受体母牛进行同期发情处理。对供体母牛用促性腺素处理，使供体母牛超数排卵，以获取更多卵子
74. 供体母牛的主要职能：产生具有优良性状的胚胎
75. 受体母牛必须具备：健康的体质和健康的繁殖能力
76. 对公牛的要求是：选择遗传性能和生产性能优秀的个体
77. 胚胎移植的意义：充分发挥优良母畜的繁殖潜力，加快优良种畜的繁殖速度，迅速推广新品种
78. 胚胎干细胞（ES细胞）来源于早期胚胎或原始性腺，具有发育的全能性，其形态特征：体积小，细胞核大，核仁明显
79. ES细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中，能够只分裂不分化。使其分化需要加入：分化诱导因子
80. 自体ES细胞诱导分化形成相应组织、器官进行移植，优点：避免发生免疫排斥反应
81. 胚胎性别鉴定，通常选用囊胚中的滋养层细胞。
82. 性别鉴定的方法：做DNA分析性别鉴定（SRY-PCR胚胎的性别鉴定技术）
有性生殖一定有卵子精子结合形成受精卵
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