1.七类物质鉴定和提取类实验归纳
实验名称 | 试剂 | 颜色 | 生物材料 | 备注 |
淀粉的鉴定 | 碘液 | 蓝色 | 脱色的叶片 | |
还原糖的鉴定 | 斐林试剂 | 砖红色沉淀 | 苹果或梨匀浆等 | 现配现用、水浴加热 |
脂肪的鉴定 | 苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)染液 | 橘黄(或红)色 | 花生种子切片 | 需用高倍镜观察 |
蛋白质的鉴定 | 双缩脲试剂 | 紫色 | 豆浆、稀蛋清等 | 先加A液,后加B液 |
绿叶中色素的提取和分离 | 提取液:无水乙醇; 分离液:层析液 | ①胡萝卜素:橙黄色 ②叶黄素:黄色 ③叶绿素a:蓝绿色 ④叶绿素b:黄绿色 | 新鲜的绿叶(如菠菜叶) | 加入二氧化硅是为了研磨得更充分;加入碳酸钙可防止在研磨中色素被破坏 |
酒精的鉴定 | 重铬酸钾溶液 | 灰绿色 | 无氧环境中的酵母菌 | 酸性条件 |
鉴定CO2 | 澄清石灰水 | 变混浊 | 有氧或无氧环境中的酵母菌 | |
溴麝香草酚蓝水溶液 | 由蓝变绿再变黄 |
2.物质鉴定类实验应注意的四个问题
(1)在显色实验(如物质鉴定)中,材料最好不带颜色或颜色较浅,或实验时对有色材料进行脱色处理。
(2)物质鉴定实验一般不设立对照实验,若需设立对照实验,对照组应加入成分已知的物质,如验证唾液淀粉酶是蛋白质,对照组可加入稀释的鸡蛋清。鸡蛋清作为鉴定蛋白质的材料时,因其较黏稠,故使用时需稀释。
(3)可溶性还原(性)糖鉴定中不宜选择甜菜、甘蔗等作为实验材料,因它们几乎不含还原(性)糖。
(4)颜色深浅与所鉴定的物质的含量有关,含量越多,颜色越明显。
3.显微观察类实验的染色剂与材料选择
实验名称 | 细胞状态 | 装片制作 | 生物材料 |
观察叶绿体和细胞质流动 | 活细胞 | 直接制片 | 藓类叶片或菠菜叶稍带些叶肉的下表皮 |
观察植物细胞的质壁分离和复原 | 直接制片 | 洋葱表皮细胞 | |
观察细胞的有丝分裂 | 死细胞 | 用龙胆紫或醋酸洋红染液染色 | 洋葱根尖分生区细胞 |
观察细胞的减数分裂 | 龙胆紫溶液或醋酸洋红液染色 | 蝗虫精母细胞 | |
用显微镜观察多种多样的细胞 | 直接制片 | 相关细胞 | |
生物组织中脂肪鉴定 | 活细胞或死细胞 | 需用苏丹Ⅲ染液或苏丹Ⅳ染液染色 | 浸泡后的花生米 |
4.常用试剂的种类与作用的归纳
试剂 | 体积分数(或质量浓度) | 作用原理 | 相关实验 |
酒精 | 50% | 洗去浮色(溶剂) | 脂肪的鉴定 |
95% | 与质量分数为15%的盐酸混合用于解离 | 观察细胞的有丝分裂 | |
100% | 溶解、提取色素 | 绿叶中色素的提取和分离 | |
盐酸 | 5% | 营造酸性环境 | 探究pH对酶活性的影响 |
15% | 质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精按1∶1混合成解离液,使组织中的细胞相互分离 | 观察细胞的有丝分裂 | |
NaOH | 0.1 g/mL | 斐林试剂的甲液、双缩脲试剂的A液 | 检测还原糖、蛋白质 |
5% | 营造碱性环境 | 探究pH对酶活性的影响 | |
CuSO4 | 0.05 (g·mL-1) | 斐林试剂的乙液 | 检测还原糖 |
0.01 (g·mL-1) | 双缩脲试剂的B液 | 检测蛋白质 |
[技能展示]
1.(2019·山东济南模拟)下列有机物的鉴定实验中,导致实验失败的操作是( )
①脂肪鉴定时,花生子叶染色后,没有用酒精洗去浮色 ②蛋白质鉴定时,把A、B液混合后再加入蛋白质样液中③还原糖鉴定时,用60 ℃水浴加热 ④淀粉鉴定时,直接把碘液滴加到淀粉样液中 ⑤鉴定酵母菌是否产生酒精的实验中,直接把重铬酸钾加入到酵母菌培养液的滤液中
A.①②⑤ B.②④⑤
C.③④⑤ D.①②④
解析 脂肪鉴定时,花生子叶染色后,没有用酒精洗去浮色,染液本身颜色会影响结果,故①错。蛋白质鉴定时,先加A液,后加B液,故②错。还原糖鉴定时,可用60℃水浴加热,故③正确。淀粉鉴定时,直接把碘液滴加到淀粉样液中,碘液与淀粉溶液反应呈蓝色,故④正确。要将重铬酸钾与硫酸配制为酸性重铬酸钾溶液才能检测酒精,故⑤错。
答案 A
2.(2019·北京东城模拟)下列是关于酒精的鉴定及酒精在相关实验中运用的叙述,其中错误的是( )
A.用质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%酒精(1∶1)混合液对洋葱根尖进行解离
B.在提取绿叶中的色素时可用无水酒精作为提取剂提取色素
C.在碱性条件下用重铬酸钾溶液鉴定酒精,溶液颜色由橙色变成灰绿色
D.用苏丹Ⅲ染液鉴定花生子叶中的脂肪时,需要用酒精洗去浮色
解析 观察植物细胞有丝分裂实验中,用质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精(1∶1)混合液对洋葱根尖进行解离,A正确;叶绿体中的色素易溶于有机溶剂,在提取绿叶中的色素时可用无水酒精作为提取剂提取色素,B正确;在酸性条件下用重铬酸钾溶液鉴定酒精,溶液颜色由橙色变成灰绿色,C错误;用苏丹Ⅲ染液鉴定花生子叶中的脂肪时,需要用酒精洗去浮色,D正确。
答案 C
3.观察藓类叶片细胞叶绿体的形态与分布、观察黑藻叶片细胞的细胞质流动、观察植物根尖细胞的有丝分裂和对花生子叶中脂肪的鉴定,四个实验的共同点是( )
A.实验全过程都要使实验对象保持生活状态
B.都必须使用高倍显微镜观察
C.适当提高温度将使实验结果更加明显
D.都需要对材料进行染色
解析 实验全过程都要使实验对象保持生活状态的是:观察藓类叶片细胞叶绿体的形态与分布、观察黑藻叶片细胞的细胞质流动,而观察植物根尖细胞的有丝分裂和对花生子叶中脂肪的鉴定,没有保持生活状态;适当提高温度对观察植物根尖细胞的有丝分裂和对花生子叶中脂肪的鉴定影响不大;观察藓类叶片细胞叶绿体的形态与分布、观察黑藻叶片细胞的细胞质流动对材料不进行染色;而以上几个实验都必须使用高倍显微镜观察。
答案 B
4.(2019·山东青岛模拟)下列是生物研究中常用的实验方法,错误的是 ( )
A.研究细胞器结构和种类,采用差速离心法和显微观察法
B.提取和分离叶绿体中的色素,采用研磨过滤法和纸层析法
C.探究酵母菌呼吸方式,采用对比实验法和产物检测法
D.观察植物细胞有丝分裂过程,采用活体染色法和持续的显微观察法
解析 用差速离心法能分离各种细胞器,用显微镜能观察到叶绿体、线粒体和液泡,A正确;提取叶绿体中的色素时,采用研磨过滤法,而分离色素时采用纸层析法,B正确;探究酵母菌细胞呼吸方式时,设置有氧呼吸和无氧呼吸两组对比实验,用澄清石灰水和酸性重铬酸钾对产物进行鉴定,C正确;观察植物细胞有丝分裂实验,经过解离步骤后,细胞已经死亡,所以不能进行活体染色,也不能观察到细胞分裂的动态过程,D错误。
答案 D
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