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2022.06.17 江苏

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Toll 样受体 9 (TLR9) 可识别微生物而非脊椎动物基因组 DNA 中普遍存在的特定未甲基化 CpG 基序,从而引起先天性和获得性免疫反应。CpG ODN 是含非甲基化CpG基序的寡聚脱氧核苷酸( Oligodeoxynucleotides containing CpG motifs) ,合成的CpG ODN具有和细菌DNA类似的免疫刺激作用。CpG ODN广泛应用于细胞的刺激和活化、动物体内注射、佐剂等方面,但是你真的了解CpG ODN吗?不同的种类的CpG ODN的免疫刺激性不同,你使用的CpG ODN选对了吗?
CpG ODN的区分
与基因组细菌DNA中发现的天然磷酸二酯(PO)骨架相反,CpG ODN具有部分或完全硫代磷酸化(PS)骨架。基于其结构特征和对人外周血单核细胞( PBMC ) ,特别是B细胞和pDC细胞的刺激活性,将其分为A、B、C三类。
A类ODN 的特点是含有PO中心CpG 的回文基序和 PS 修饰的 3’端poly-G。能够诱导pDC细胞产生大量IFN-α,但它们是TLR9 依赖性NF-κB信号传导和促炎细胞因子产生的弱刺激剂。
B类ODN 包含带有一个或多个CpG二核苷酸的完整PS主链能够,强烈激活 B 细胞和TLR9 依赖性NF-κB信号传导,刺激IFN-α分泌的效果微弱。
C类ODN 结合了A类和B类的结构特征,包含一个完整的PS主干和一个包含 CpG的回文基序。在功能上,具有诱导pDC产生IFN-α以及B细胞刺激的活性,但是其效果分别弱于单独使用A类或B类ODN 。
· 图1 ·   CpG ODN结构图解
· 图2 ·   CpG ODN功能图解
ODN不仅有刺激活性上的区分,还有种属之分,你敢信吗?工欲善其事,必先利其器。选对了ODN,做实验也能“事半功倍”。
A类ODN
名称
种属特异性
描述
ODN 1585
小鼠
文献引用最多小鼠A类ODN
ODN 2216
文献引用最多人A类ODN
ODN 2336
应用:
1. 抑制HUVEC细胞IL-8分泌,ODN 2336
2. 诱导pDC细胞产生IFN-α、TNF-α,ODN 2216
3. 诱导PBMC细胞产生IFN-α、IFN-γ,ODN 2216
4. 诱导Mincle介导的小鼠巨噬细胞活化,ODN 1585
5. RAW 264.7细胞NLRP3激活Priming,ODN 1585
B类ODN
名称
种属特异性
描述
ODN 1668
小鼠
ODN 1826
小鼠
文献引用最多小鼠B类ODN
ODN 2006
文献引用最多人B类ODN
ODN 2007
牛/猪
ODN BW006
人/鼠
ODND-SL01
人/大鼠/小鼠/兔/猪/狗
应用:
1. 注射小鼠体内可以激活kupffer细胞,ODN 1668
2. 诱导小鼠骨髓来源的巨噬细胞 , ODN 1826
3. 瘤内注射上调肿瘤内T细胞OX40表达, ODN 1826
4. 诱导小鼠DC细胞成熟, ODN 1826
5. 增强肿瘤内T细胞浸润(提高T细胞数量、增强T细胞活化), ODN 1826
6. 诱导BMDM细胞分泌TNF-α, ODN 1826
7. 诱导人CLL细胞分泌IL-10,ODN 2006
8. 刺激PBMC细胞表达CD19、pSTAT3,ODN 2006
9. 诱导PBMC细胞产生IL-10,ODN 2006
10. 刺激兔B细胞分泌免疫球蛋白,ODN D-SL01
C类ODN
名称
种属特异性
描述
ODN 2395
人/小鼠
文献引用最多C类ODN
ODN M362
人/小鼠
ODN D-SL03
人/大鼠/小鼠/兔/猪/狗
应用:
1. 作为纳米佐剂注射C57BL6小鼠,ODN 2395
2. 诱导原代人CLL细胞极化和迁移,ODN 2395/ODN 2006
ODN 2088 —TLR 9拮抗剂
通过破坏CpGODNs与TLR9在内涵体囊泡中的共区域化而发挥作用,而不影响细胞结合和摄取。
应用:
1. TLR9抑制剂治疗大鼠疾病模型,ODN 2088
CpG ODN的选择你明白了吗?
InvivoGen 1977年成立于法国,是法国第一家生物科技公司。公司成立的初期阶段主要提供细胞培养相关试剂,如抗支原体、细菌、真菌污染的抗生素以及基因筛选抗生素(Blasticidin, Puromycin, HygromycinB,G418, Zeocin)。随着天然免疫研究热点的兴起,InvivoGen于2000年开始致力于天然免疫相关产品的研发和生产,并成为全世界最优质、最专业的天然免疫相关产品生产商。InvivoGen为天然免疫研究提供一整套研究方案,包括不断更新的模式识别受体(PRRs)激动剂和拮抗剂,PRRs报告基因细胞以及天然免疫信号通路的诱导剂和抑制剂等。
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