1、实验目的
依据国家标准 ,为检验交通事故案件中血液检材中是否含有乙醇成分以及其含量的确定制定本流程。
2、检材范围 血液检材。
3、仪器及器材
3.1 气相色谱仪:配有氢火焰离子化检测器和色谱数据处理机
3.2 高速离心机:附带离心管
3.3 移液管(2ml、1ml、0.5ml)
3.4 试管
3.5 微量进样器(10μl)
4、检验流程
4.1检材前处理
4.1.1 乙醇标准溶液的配置
准确吸取乙醇1.26mL于100mL容量瓶中,添加重蒸馏水至刻度,混匀,得╮10mg/mL乙醇储备液,再稀释10倍得1mg/mL的乙醇标准使用液。
4.1.2 内标物标准溶液的配置 准确吸取叔丁醇1.27mL于500mL容量瓶中,添加重蒸馏水至刻度,混匀,得2mg/mL叔丁醇标准液。
4.1.3
取待测全血2ml于离心管内,加100微升叔丁醇内标液,约1克硫酸铵,瓶口覆盖聚四氟乙烯薄膜,硅胶垫,用密封钳加封铝帽,混匀,置60摄氏度水浴加热15-20分钟。
同时取空白血液两份,其中一份添加内标溶液100微升和乙醇标准使用液20微升,按上述方法平行操作以进行空白对照和已知对照。
4.2 定性分析
4.2.1 气相色谱法
4.2.1.1 进样
用10μl微量进样器分别吸取1μl上述各试样注入到设定好条件的气相色谱仪中,每个试样平行进样三次。
4.2.1.2 记录及分析
分别记录各试样中内标物,乙醇标准品和可疑峰的保留时间,填入GC定性分析结果表中,计算它们的保留时间平均值,并以内标物的保留时间为1,计算醇的相对保留时间值。
4.3 定量分析
4.3.1 进样
用10μl微量进样器分别吸取1μl各试样注入到气相色谱仪中,每个试样平行进样三次。
4.3.2 记录及计算
4.3.2.1 记录
记录检材及空白添加标准品中乙醇及内标物峰面积值,填入GC定量分析联系客服