原发性中枢神经系统淋巴瘤细胞学形态特征分析

       

中枢神经系统淋巴瘤（central nervous system lymphomas，CNSL）分为原发中枢神经系统淋巴瘤（primary central nervous systemlymphomas，PCNSL）和继发性中枢神经系统淋巴瘤(secondary centralnervous system lymphomas ，SCNSL)两大类。PCNSL是一种罕见的特殊类型的结外非霍奇金淋巴瘤，原发于脑、脊髓、眼和颅神经。仅占全部颅内肿瘤的2%～3%^[1]。主要的病理类型为弥漫大B细胞淋巴瘤（diffuse large B-cell lymphoma，DLBCL）^[2]。

      CNSL是一种高度侵袭性肿瘤，诊断主要依靠MRI及PET-CT的影像学表现，确诊必须通过手术切除及穿刺确定病理，因此从脑脊液中寻找肿瘤细胞或特异性高的生物标志物将有助于快速诊断该疾病。通过脑脊液脱落细胞来诊断，常常受到细胞数、肿瘤生长部位等多种因素限制。我院近三年收治的PCNSL患者脑脊液细胞学阳性率仅为46.2%（25/54），玻璃体液中细胞学阳性率78.5%（11/14），对于异常淋巴细胞主要通过细胞形态学判断，但常受到主观因素影响，如果采用流式细胞检测异常淋巴细胞又受到细胞数的影响，仅有少数细胞数多的标本能够进行检测。回顾性分析54例PCNSL患者脑脊液的有核细胞数仅有3.0（1.0～8.5）X10⁶/L，绝大部分标本不能用于流式细胞的检测，我们通常采用细胞免疫酶标记的方法来实现异常细胞的定位，由于PCNSL的病理类型为DLBCL，因此我们采用CD20，CD3和PAX5进行酶免细胞定位。回顾性分析发现PCNSL患者脑脊液中异常淋巴细胞大部分存在形态学上的共性，即细胞体积较大，胞浆量中等或较丰富，核常呈不规则形，大部分呈分叶状，常见核分裂型、微核现象，核染色粗糙或成网状结构，核仁大而明显见图1～2。而在玻璃体液中的异常淋巴细胞形态也类似于脑脊液见图3，而通过免疫酶标也可证实这些异常淋巴细胞。但仅仅依靠细胞病理学并不能区分原发性还是继发性，因为一些继发性中枢神经系统淋巴瘤也可见类似形态见图5。因此细胞病理学的诊断存在较大局限性。

图1 瑞氏染色 10X100 DM3000摄脑脊液形态变异的异常淋巴细胞

图2 瑞氏染色 10X100 DM3000摄脑脊液形态变异的异常淋巴细胞

图3 瑞氏染色 10X100 DM3000摄 玻璃体液 形态变异的异常淋巴细胞，细胞核均呈分叶状

图4 CD20 10X100 DM3000摄 玻璃体液 形态变异的异常淋巴细胞，细胞核均呈分叶状CD20（+++）

图5 瑞氏染色 10X100 DM3000摄 脑脊液 间变大细胞淋巴瘤脑膜累及的形态变异的异常淋巴细胞，细胞核呈分叶状

近期，多个研究展示了PCNSL患者脑脊液中的生物标记物在诊断该疾病中的前景，提示检测脑脊液中有效的生物标记物可以为PCNSL的诊断及病程监测提供新思路^[3]。我们通过对PCNSL患者脑脊液Th17的15项细胞因子谱进行检测发现IL-10显著高于其他非PCNSL颅内肿瘤。PCNSL病因和发病机制仍不清楚，目前认为在先天性免疫缺陷病、器官移植及获得性免疫缺陷综合征的患者中患病机会明显增加，但此类患者的临床特征及预后与免疫功能正常的PCNSL患者有着明显差别^[4]。随着机体免疫系统和肿瘤发生之间的相关性研究越来越深入，研究发现某些细胞因子与B细胞肿瘤发生发展密切相关，这些细胞因子可通过正常淋巴细胞和恶性淋巴瘤细胞自分泌和旁分泌刺激自身的生长，如IL-6和IL-10。目前已知IL-10在原发性DLBCL中发挥至关重要的作用，特别是在活化B细胞样亚型的DLBCL中高表达^[5]。回顾性检测脑脊液IL-10，当脑脊液IL-10为19.62pg/ml时，诊断PCNSL的敏感度为77.5%（31/40），特异度为70.1%（47/67）。提示脑脊液中IL-10有可能成为PCNSL有效的诊断和预后相关生物标记物。

图6 PCNSL和NPCNSL脑脊液 IL-10表达水平

参考文献

[1]Swerdlow SH,CampoE,Harris NL,et al,WHO Classification of tumors of  hematopoietic and lymphoid tissues[M]. France:Lyon:IARC:2008:240-241.

[2]Brastianos P K, BatchelorT T. Primary central nervous system lymphoma: overview of current treatmentstrategies[J]. Hematol Oncol Clin North Am.2012, 26(4): 897-916.doi: 10.1016/j.hoc.2012.05.003.PMID:22794289

[3]Sasayama T, Tanaka K,Mizowaki T, et al. Tumor‐Associated Macrophages Associate with CerebrospinalFluid Interleukin‐10 and Survival in Primary Central Nervous System Lymphoma(PCNSL)[J]. Brain Pathol.,2015.DOI:10.1111/bpa.12318

[4]Anthony I C, Crawford DH, Bell J E. B lymphocytes in the normal brain: contrasts with HIV‐associatedlymphoid infiltrates and lymphomas[J]. Brain, 2003, 126(5): 1058-1067.PMID:12690046

[5]Béguelin W, Sawh S,Chambwe N, et al. IL10 receptor is a novel therapeutic target in DLBCLs[J]. Leukemia.2015;29(8):1684-94. doi:10.1038/leu.2015.57. Epub 2015 Mar 3.PMID: 25733167