曹雪涛院士：想发Hepatology没有那么难

前几天，梦熊看到Hepatology上online了一篇文章，眼前一亮：

恍惚间觉得假以时日，梦熊的名字都可以挂在10分的期刊上呢！

这是曹雪涛院士署名通讯作者的最新一篇文章。

先看一下文章做了什么内容吧：

1、通过表达谱芯片筛选到了一个circRNA分子MTO1，检测到其在肝癌中显著低表达。

2、MTO1丰度越低病人预后越差。

3、通过RIP检测，发现MTO1与miR-9结合。

4、细胞实验表明，干扰MTO1能下调miR-9靶基因p21的表达，结果促进细胞增殖、侵袭。

恩，基本就是这样了。

就问你羡慕不羡慕！

不管你羡慕不羡慕，咱先看看套路再说！

1、分子的确定，这个大家最关心的

a、筛分子：作者通过7对7HCC及正常肝组织做circRNA表达谱芯片。最终，选了表达差异最显著的10个上调、10个下调的circRNAs做了热图。

b、小样本验证：通过21对肝癌及正常肝脏组织，验证上述20个circRNAs分子表达变化，确定了跟芯片结果最匹配的6个circRNAs分子。

c、作者最终直接确定后期研究MTO1。

正常步骤是，对b步骤筛出的分子做一下“大样本验证”。不过也给大家提供了一个榜样，筛出的分子最终确定研究哪个分子，有时候原因不一定很明确，有可能查了相关报道、也有可能做了其他的分子并没有做出结果。

这里作者是先确定了MTO1，再对其表达进行了大样本验证。作者是这样描述的，也不无可能是先进行了上述6个分子的表达验证，最终确定了MTO1作为后续研究的分子。

2、分子功能实验：沉默MTO1能促进肝癌细胞株增殖及侵袭。体外过表达MTO1能抑制HCC细胞增殖及侵袭作用。

原文中，这部分及动物实验内容逻辑展示一般。

3、动物实验：干扰MTO1的HCC细胞能提升小鼠体内成瘤速度（生长）。

4、临床相关性：结合临床数据，MTO1表达越低，病人预后越差。

5、机制研究

作为热门的circRNA，跟lncRNA、假基因、mRNA等均类似，均可作为ceRNA竞争性吸附miRNA，促进下游靶基因表达。

a、首先，通过MiRanda预测到99个miRNAs与MTO1结合，结合RIP（接生物素的方法）检测结果，作者选了其中20条miRNAs继续研究。最终通过丰度检测，发现MTO1与miR-9在细胞中均有富集现象，而其余的miRNAs富集不明显。

荧光定位实验表明，两者在胞浆里面结合（小张之前讲过，研究lncRNA时需要主要分子定位，circRNA也是一样。而且，作为ceRNA机制，两者必须符合定位于胞浆这个条件）。

b、p21作为miR-9的靶基因，当MTO1上调表达时，p21丰度也相应提升。

到这里，作者已经证明了MTO1通过ceRNA机制抑制HCC细胞增殖及侵袭。

好，全文实验内容完。

总体来说，本文较适合我们去学习，其研究内容无非有如下几个方面：

1、确定项目研究的分子

2、细胞功能实验

3、动物实验

4、临床相关性

5、机制研究

天哪，这些不都是小张日常在讲的嘛！