这几天师兄在追科研热点（说得好像我自己平常就不追似的），哪些热点呢？m6A，势头很猛，师兄发现m6A主题的文章连续发在了Nature和Cell，这是有多热啊，估计明年国自然m6A估计要更火了。
来看看这篇Cell吧，看看咱们能学到什么。
作者：何川教授、陈建军教授
单位：芝加哥大学、浙大附属第一医院
已知的研究：异柠檬酸盐脱氢酶1（IDH1）和异柠檬酸盐脱氢酶2（IDH2）的两种基因的突变（(IDH2R140和 IDH2R172)）在癌症中很常见，并且突变后导致一种称为R-2-hydroxyglutarate（R-2-HG）的因子过量表达，长期以来，R-2HG被认为是促癌代谢物。
我们以前介绍过来自于芝加哥大学的何川教授的论文“N6-Methyladenosine in nuclear RNA is a major substrate of the obesity-associated FTO”，第一次开启了FTO是m6A的去甲基化酶的大门，从此m6A的研究如火如荼，成果斐然。
这篇文章却很好滴为R-2HG平了一次冤，因为R-2HG有抑制癌症的一面。
(1)在体外、体内发现AML细胞对药物敏感性呈现时间和剂量依赖
看看人家是如何展示药物在不同白血病细胞系、不同时间点、不同浓度情况下，细胞的活性
A图中颜色代表时间，颜色的直径代表细胞的活性高低，虽然不同细胞系对R-2HG的敏感性不同，但是总体呈现时间依赖抑制（浅色大，红色小）。
B图代表96h，不同浓度对27株细胞系的生长抑制情况，呈现剂量依赖。
体内实验证明R-2HG能提高白血病小鼠的生存率，镜检发现体内白血病细胞液大量被抑制。
(2)科学问题提出：为何有些AML细胞系敏感？有些不敏感？RNA-seq
FTO的表达水平和R-2HG的敏感性是呈正相关的，GSEA发现差异基因相关的通路调控基因MYC。
（3）第一条机制：R-2HG能抑制CEBPA对FTO启动子的结合，抑制转录
大家都知道FTO是一个去甲基化酶，何川教授研究的就是m6A，于是乎做实验了，R-2HG提升了敏感细胞的m6A总水平提升，非敏感细胞的m6A水平变化不大。
另外前面测序结果显示FTO的mRNA水平有变化？很多同学都知道做转录水平研究啊，因为我们一般的经验是mRNA水平有变化，肯定是转录水平有变化呗。
CEBPA都知道是AML的致病基因之一，一个核转录因子，R-2HG可以抑制CEBPA转录因子结合FTO的启动子区，FTO的表达受到抑制。
写到这里，很多同学就可以发发6分求毕业了，但是你想错了，老板可不会让你轻松如愿的。
（4）第二条机制：R-2HG抑制FTO蛋白的活性，提高了细胞m6A水平
何川教授还想研究出了转录水平，R-2HG和FTO蛋白有没有直接的结合关系。
于是学生就做了两种实验：Drug affinity responsive targets stability (DARTS) assays and cellular thermal shift assays (CETSAs)
DARTS实验证明了R-2HG和FTO蛋白是直接结合的。
在无细胞的培养体系中，将ssRNA，FTO，R-2HG不同浓度加入进去，来说明m6A的程度是随着R-2HG升高而提升的。
（5）R-2HG降低MYC的mRNA稳定性
前面讲到GSEA发现差异基因相关的通路调控基因MYC转录因子有关，那么实验证明在对R-2HG敏感的细胞中，MYC的mRNA的m6A水平升高，而非敏感株里，并没有太大变化。同时作者又做了挽救实验，那就是在敏感株中敲减FTO，而在非敏感株中过表达FTO，均能引起MYC的m6A水平逆转。
案子终于破了，原来R-2HG既可以抑制FTO的蛋白活性，又可以抑制FTO的转录水平，从而提升mRNA的m6A水平，介导促癌基因MYC的mRNA降解。
好了，这下可以发个20分了吧，可以发发毕业了吧？你又想错了，老板不发Cell是不会罢休的！
（6）科研现象结合临床问题：反馈回路的存在
老板在想IDH1突变型能够产生抑制白血病细胞的R-2HG，那么为何还会有20%左右的IDH1突变是AML呢？还会有一些AML细胞对R-2HG不敏感呢？为何会有人做出结果显示R-2HG是促进白细胞增殖的呢？
可就不得不提出一个负反馈回路的存在，那就是FTO和MYC之间存在着负反馈回路。
这下科研问题就完美地和临床问题结合在一起了，终于可以答辩毕业了
另外一篇Nature，大家自己去消化一下吧，没地方写了。
于是咱们今天学到了①CNS的文章要在临床问题中找科学解释②10分以上的文章要么有反馈回路，要么有两条分子机制
技术解读：
DARTS(drug affinity responsive target stability, DARTS):一种药物靶标鉴定的新技术，药物亲和反应的靶点稳定性。
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Recent studies further showed that IDH mutations and R-2HG exhibit growth-suppressive activity and glycolysis-inhibitory function in gliomas
We repeatedthe same experiments and found that R-2HG indeed increased cell proliferation under cytokine-poor conditions
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