郭海滨,雷家军
(沈阳农业大学园艺学院,辽宁沈阳110161)
摘要:对叶子花(Bougainvillea glabraChoisy)茎尖组织培养技术进行了研究,筛选出适宜的增殖培养基为MS+6-BA0.5mg·L-1+NAA0.2mg·L-1,增殖系数达到4.0;最适合的生根培养基为MS+IBA1.0mg·L-1,每株平均生根7.2条,根长4.2cm,侧根数4.5条。以河沙为基质进行试管苗移栽有利于叶子花的成活,25d后成活率可达78.6%。
关键词:叶子花;茎尖;组织培养；
中图分类号:S50353文献标识码:B
（英文略）
叶子花(B.glabra Chosiy)又名九重葛、宝巾、三角梅,为木质常绿大藤本,是重要的观赏花卉,我国各地都有栽培,喜热怕冷,在北方主要以室内盆栽为主。叶子花扦插不易成活,利用组织培养法不仅可以解决其生根难的问题,而且还能快速繁殖优质种苗。
1、材料与方法
1.1试验材料
材料来源于沈阳农业大学花卉基地,为红色大花品种,在生长良好健壮、无病虫害的优良母株上剪取茎尖作为外植体。
1.2试验方法
1.2.1外殖体消毒先用自来水冲洗,冲刷干净后,用75%的酒精浸泡2～3s,后用无菌水冲洗,再用0.1%的HgCl2溶液浸泡6min,最后用无菌水冲洗5～6次。
1.2.2培养基及培养条件
诱导培养基MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.5mg·L-1;增殖培养基MS+6-BA(0～0.5)mg·L-1+NAA(0～0.5)mg·L-1共6个组合;生根培养基MS+IBA(0～2.0)mg·L-1共4个组合,在生根培养基中培养30d后调查生根情况。培养温度为23～27℃,光照强度3000lx,光照时数12h;光质为荧光灯;环境相对湿度为70%～80%。
1.2.3炼苗移栽取苗高约3～5cm、5～6片叶的试管苗(有根或无根),先在室内炼苗5～6d,洗净培养基,移栽到基质中。移栽基质为河沙,草炭:园土=3:1,盖塑料小拱棚保温,湿度控制在85%～90%,每天喷水1～2次,中午适当遮荫。10d、15d、20d、25d分别调查成活率。
2、结果与分析
2.1不同激素浓度组合对叶子花诱导与增殖的影响
不同培养基诱导愈伤组织的时间、颜色有差异,增殖系数也不同(见表1)。当6-BA浓度<0.5 mg·L-1,苗生长较慢,形成的侧芽数量少,但植株形态正常;当6-BA浓度达到0.5 mg·L-1、NAA浓度达到0.2mg·L-1植株长势良好,产生的侧芽较多,增殖系数可达4.0,愈伤组织形成时间最短,为5d,并且愈伤组织量较少,叶片的形状正常,新生的幼叶颜色偏红,但过几天后转绿,进入正常生长,生长速度快,个别生根;当6-BA为0.5 mg·L-1、NAA的浓度达到0.5mg·L-1时组培苗出现玻璃化,侧芽少,愈伤组织多,有的甚至生长到培养基的表面上,苗比较细弱。可见愈伤组织的多少在一定程度上影响着苗的长势。叶子花在增殖培养过程中,产生的愈伤组织较疏松,颜色较浅。MS+6-BA0.5+NAA0.2为叶子花增殖最适合的培养基。
表1不同浓度激素处理对叶子花外植体愈伤组织诱导与增殖的影响
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2.2不同IBA浓度对叶子花生根的影响
叶子花个别植株在增殖培养基中就有生根发生,出现的根有两种情况,即皮部生根和愈伤组织生根。皮部生根有利于试管苗移栽成活,另外,试管苗生根的好坏主要体现在根系的质量(粗度、长度)和根系的数量两个方面。不仅要求不定根比较粗壮,更重要的是要有较多的毛细根,以扩大根系的吸收面积,增强根系的吸收能力,提高移栽成活率。MS+IBA1.0为最适合叶子花的生根培养基。
表2不同IBA浓度对叶子花生根的影响
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2.3不同基质对叶子花移栽成活的影响
由图1可知,河沙作为移栽基质较合适,25d后移栽成活率达78.6%,明显高于草炭+田园土。由于草炭+田园土的保水能力太强,幼苗长时间处于高湿缺氧的条件下,组培苗从基部向上腐烂,导致苗大量死亡。在河沙中,组培苗移栽成活率较高,这可能是由于河沙具有一定的保水能力,且透气性较好。但在15d左右时叶片发黄,变褐脱落,并且无根苗开始死亡。而后,情况逐渐好转,25d左右根系生长良好。移栽半年后,组培苗就可开花。
图1不同基质对叶子花扦插成活率的影响
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3、讨论
在增殖过程中,不同培养基中均有愈伤组织的出现,颜色多为黄绿色和绿色,并且很疏松,愈伤组织越多,越不利于叶子花组培苗的生长。这样的愈伤组织能否进一步诱导分化出苗还有待于进一步研究。
叶子花试管苗容易出现玻璃化,主要表现为叶片呈水浸状,叶色变深,部分叶片变红,畸形,严重时下部叶片变黑脱落。适当增加琼脂含量,减少培养基中的游离水,从而降低培养瓶内的湿度,能使玻璃化苗的比率降低;适当降低细胞分裂素的用量;加大光照强度;适当缩短每次的继代时间;降低培养瓶植株的密度,均可有效的控制玻璃化。
参考文献
[1]李师翁.叶子花的组织培养与快速繁殖[J].植物生理学通讯,2000,36(3):230
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