伪狂犬病严重制约着世界养猪业的发展，目前，不少欧美和亚洲部分发达国家已经通过疫苗免疫、检测淘汰、扑杀等措施净化和根除了伪狂犬病，疫苗在伪狂犬净化过程中起到关键性作用。伪狂犬病疫苗毒株的前世今生是怎样的？ 伪狂犬变异株横空出世，净化PRV的武器得靠它 《农财宝典》新牧网
伪狂犬病毒又称猪疱疹病毒，该病毒能引起多种家畜和野生动物以发热、奇痒及脑脊髓炎为主要特征的传染病。猪是该病毒的最重要的储存宿主和带毒者，该病严重制约着世界养猪业的发展，各国专家学者不遗余力的研究疫苗防控该病，欧美和亚洲部分发达国家已经通过疫苗免疫、检测淘汰、扑杀等措施净化和根除了伪狂犬病，疫苗在伪狂犬净化过程中起到关键性作用。
当前国内市场上拥有7个毒株的伪狂犬疫苗，其中以Bartha-K61株为重要代表。目前在售该毒株的疫苗企业有42家国内兽用生物制品企业和4家外企，其约占猪伪狂犬疫苗市场份额的60%。除了Bartha-K61株，还有鄂A株，闵A株，Hb98株，Hb2000株，SA215株，C株等，均拥有各种的特点。
源自国外的经典毒株Bartha-k61
Bartha毒株是1961年由匈牙利学者Bartha分离的猪强毒株，经猪肾原代细胞继代50代，在37℃培养，然后又转入32℃培养20代，并挑选1-2mm的小噬斑连续选斑培育而成。制苗时用40代种毒，先传猪肾原代细胞1-2代复壮，挑取小斑，再传鸡胚成纤维细胞制苗。其冻干后对细胞的滴度最低为103.5-4.5TCID50/0.2ml。该苗用于猪、牛、羊及犬的免疫接种。肌肉注射，两次免疫注射才能获得较好的免疫效果，两次免疫间隔3-4周。
Bartha-K61疫苗株不仅缺失了主要毒力因子gE及能与其组成复合物的蛋白gI，还在US区存在其他一些缺失，这些基因的缺失解释了Bartha-K61疫苗株的安全性。gE基因缺失疫苗结合gE-ELISA鉴别诊断方法是美国和欧盟成员国推行伪狂犬病净化和根除计划的理论基础。为防止不同的疫苗株间发生重组，使疫苗毒株毒力返强，所以gE基因缺失疫苗是欧盟成员国和北美地区各国唯一被允许使用的修饰活疫苗。在美国和欧洲的应用实践表明，伪狂犬病gE基因缺失疫苗的应用对于伪狂犬病的控制和消除是一个突破。
1948年，我国首次检测出伪狂犬病毒，上世纪60年代伪狂犬病在地方流行，并未造成较大的经济损失，随后疫情出现蔓延。中国农业科学院哈尔滨兽医研究所1979年引进了Bartha-K61弱毒株，试制成功了伪狂犬弱毒冻干疫苗，通过Bartha-K61疫苗应用有效遏制住了猪伪狂犬病疫情，为中国养猪业挽回了巨额经济损失。
自主创新：本土毒株的涌现
20世纪90年代初，我国学者从发病猪中分离、鉴定和筛选出了一株免疫原性强的猪伪狂犬病毒鄂A株（Ea），将其接种仓鼠肾细胞（BHK-21）,制备高滴度的抗原液，经福尔马林灭活后，与白油佐剂混合乳化后制备成油乳剂灭活疫苗，临床上较好的防控了由猪伪狂犬病毒引起的母猪繁殖障碍和新生仔猪的死亡。
该灭活疫苗的安全性好，不仅可以有效阻止发病，而且可以缩短猪群向环境中的排毒期，减少排毒量，从而降低伪狂犬病的感染压力；母猪免疫可以产生较高的母源抗体，为仔猪提供良好的被动免疫，但是该疫苗株由于是国内经典强毒经培养后直接灭活，所以疫苗免疫后所产生的抗体无法与自然感染野毒产生的抗体相区分。
华中农业大学徐高原团队又以鄂A株病毒为亲本，通过基因工程技术缺失，构建了带有LacZ基因伪狂犬病病毒TK/gG双基因缺失HB-98株，将冻干毒种按原培养液10%的量，接种于SPF鸡胚成纤维细胞培养1-2天后，收获细胞培养物，加入适当的保护剂，经冷冻真空干燥制成活疫苗。
TK基因与伪狂犬病毒毒力相关，TK基因的缺失可有效降低毒力但不影响病毒在组织培养中的增殖，gG基因缺失也会降低病毒对猪的毒力，但缺失株依然可以诱导机体产生较高的中和抗体，并能有效阻断野毒感染，但由于该疫苗株只缺失了TK/gG基因，而没有缺失gE基因，所以使用该疫苗免疫猪群后，无法使用gE-ELISA试剂盒去鉴别诊断gE抗体是野毒抗体还是疫苗抗体。
鉴于基因缺失疫苗的优点，Van Oirschot等1991年构建了gE—/gI—/Tk—三基因缺失株，具有较好的免疫效果。华中农业大学以猪伪狂犬病毒鄂A株（Ea）为母本，通过基因工程技术构建了gE—/gI—/Tk—三基因缺失HB-2000株，接种Marc-145细胞，培养物加入适当的保护剂，经冷冻真空干燥制成弱毒活疫苗。HB-2000毒株由于缺失了gE—/gI—/Tk—基因，疫苗对仔猪安全性好，可对新生仔猪进行滴鼻接种。
1999年，郭万柱以PRV 闽A株（PRV Fa株）（该毒株是上世纪80年代从牛体分离的一个强毒株）为亲本株，构建了三基因缺失株gE—/gI—/Tk—，并将其制成猪伪狂犬基因缺失活疫苗SA215，可以通过gE-ELISA试剂盒鉴别诊断。
应对变异：HN1201-ΔgE株横空出世
但2011年以后，免疫过伪狂犬疫苗猪场爆发新的伪狂犬病，并从华北开始蔓延至全国，表现为母猪流产死胎、仔猪高死亡率，通过基因测序，发现新分离毒株同经典毒株比较，发生了基因序列的改变，表明伪狂犬病毒在我国发生变异。与此同时，多个变异狂犬病毒被先后分离出来（如：2012年分离的毒株有HN1201株、TJ株、HeN1株、JS株、ZJ01株；2013年分离毒株SD2013株；2014年分离毒株SDYC-2014株等）。
2012年，国家兽用药品工程技术研究中心优选出一株细胞适应性好、致病力强、免疫原性好的伪狂犬病毒HN1201株，利用基因重组技术，成功构建出gE基因缺失的伪狂犬病毒HN1201-ΔgE株。由于该疫苗毒株为流行毒株，可对流行毒株引发的伪狂犬病起到完全保护效果；其次，该疫苗毒株采用基因工程技术缺失gE基因，安全性高，可通过gE-ELISA试剂盒进行鉴别诊断，利于伪狂犬病的防控和净化；再者，该毒株细胞适应性好，便于培养，因此利用该毒株研制的灭活疫苗抗原含量高（不低于108.5TCID50），猪只免疫接种后可产生高水平的中和抗体，可有效防控变异毒株引发的伪狂犬病。
近期，真正的猪伪狂犬流行毒株 gE 缺失基因工程灭活疫苗——“普伪净”即将上市，有针对性的疫苗的推出，将为当前猪场面临的变异伪狂犬病的防控提供有效帮助，敬请期待！
联系客服
