细胞增殖到底用MTT还是CCK8呢？

MTT增殖曲线，基本上就是最基础的功能实验了，养过细胞的你应该都会做。

但是，要怎么样才能省时省力呢？你也知道，如果用MTT的话，加入10ul的MTT后要等四个小时，在活细胞的线粒体中形成甲囋，然后在把培养基吸掉，再加上DMSO溶解，进行检测。

这个方法是最常用的MTT方法，但是会有三个问题，第一个是有的甲囋不容易溶解。

还有一个问题就是，由于要让DMSO充分溶解甲囋，所以会要混匀，就会产生泡沫，影响酶标仪读值：

第三个问题，就是在吸去培养基的时候，容易把甲囋也吸走，导致最终读值不准。

当然也不是没有办法的，这篇文献中提到在DMSO中加入8到800mM的氨的碱性DMSO能更快更好地溶解甲囋：

当然，这个也是有人亲测可用的。不过，我们还是来谈谈另一种溶剂哈，就是传说中的三联液，这个其实是1983年Mosmann大神第一次发明MTT法时所采用的溶解液：

最初的版本是酸化异丙醇，也就是加入了0.04N的盐酸的异丙醇。但是后来又衍生成为了：SDS10g，异丁醇5ml，0.1ml的10M HCl，用双蒸水溶解配成100ml溶液，这就是三联液。

三联液的优点在于不用吸去培养基，当然，缺点就是要溶解很久。不过加完三联液后可以过夜，第二天再测。

还有一种检测方法也很常见，就是CCK8，和MTT的区别就在于……贵。比如MTT要5分钱，CCK8差不多就5毛……还有一点就是，CCK8会形成水溶性的橙色甲囋，MTT形成的是紫色的有机溶剂溶解的甲囋。

所以CCK8加入后，就直接等4小时左右，让橙色甲囋溶解到培养基就能检测了。而MTT，就需要用DMSO再溶解出来……

华丽丽的分割线

李莫愁博士：其实我比较喜欢的是用酸化异丙醇(acidified isopropanyl），加完隔夜就行了，比吸出培养基加DMSO方便多了。还比CCK8来得省钱些。好了，今天就先策到这里吧。

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