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Re:【求助】小鼠肾脏masson染色问题 - 形态学讨论版 -丁香园论坛
Masson 三色染色法
1、试剂配制:
丽春红酸性品红液: 丽春红 0.7 g 酸性品红 0.3 g
蒸馏水 99ml 冰醋酸 1 ml
苯胺蓝液: 苯胺蓝 2 g 蒸馏水 98 ml 醋酸 2 ml
亮绿液: 亮绿 0.2g 蒸馏水 100 ml 冰醋酸 0.2 ml
苦味酸酒精液:苦味酸在95%酒精中的饱和液 20 ml,加95%酒精10 ml
2、染色步骤:
(1)切片脱蜡至蒸馏水
(2)苏木素染5~10分钟
(3)盐酸酒精分化
(4)流水蓝化,蒸馏水洗(苏木素可不染)
(5)丽春红酸性品红液中染5~8分钟
(6)蒸馏水洗
(7)1% 磷钼酸中染1~3分钟
(8)不用水洗直接入苯胺蓝液或亮绿液5分钟 (如染色效果不佳,可在冰醋酸内脱色后重染)
(9)水速洗,置60℃温箱中烘干,二甲苯透明,封固
3、结果:胶原纤维蓝色(苯胺蓝复染)或绿色(亮绿复染),肌纤维、纤维素红色。
4、注意:
(1) 此法广泛用于胶原纤维和平滑肌的鉴别,也为肾组织活检,观察肾小球病变的重要染色法,常用于观察缺血病变的心肌。 用于观察肾小球病变时,一定要用2um以下半薄切片。
(2) 细胞核染色后分化很重要,观察控制着色程度。而HE染色则是最常用的一种常规染色方法,但无法区别胶原纤维和肌肉。
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