六味防脱生发制剂及其制备方法和质量检测方法.pdf

技术领域：
本发明涉及一种六味防脱生发制剂及其制备方法和质量检测方法，属于中药制药技术领域。
背景技术：
脱发是一个世界性难题。在美国有8000万人患脱发；日本有2000万人；20-39岁的欧洲人26％患有脱发，40岁以上的超过50％。我国的情况也不容乐观：一份针对北京、上海、广州、杭州等5个城市5779名男士的调查显示：我国男性脱发发病率达25％。以6.72亿男性计算，我国男性脱发患者已经达到大约1.68亿人。而一份名为“医生诚征脱发人士意见”的问卷调查还显示，男性脱发明显“年轻化”，60％的患者在25岁之前就开始脱发，30岁以前脱发的比例竟高达83.9％。
目前市场上治疗脱发和再生发的产品层出不穷，有洗发剂形态的，也有药物形态的，还有按摩器械等，但根据实际使用的情况表明，其治疗效果并不理想，有的使用周期长，见效慢；有的治疗不彻底；有的治疗费用昂贵；有的使用不方便等。例如市场上使用较多的章光101，虽然效果相对较好，但其费用比较贵，并需要在专业人员的指导下使用。
对于脱发，目前尚缺乏较理想的疗法。现代医学常用的方法有局部外用米诺地尔，皮内注射皮质类固酵，使用接触致敏剂如二硝基氯苯、光化学疗法、雌性激素疗法等，这些方法虽有一定疗效，但都有不同程度的不良反应。近年来以脱发为主要症状的疾病日益广泛。此类疾病其病因病机多为肝肾阴虚，血虚风燥，发失所养所致。
发明内容：
本发明的目的在于：提供一种六味防脱生发制剂及其制备方法和质量检测方法。本发明以六味天然中草药组方精制而成，具有去屑止痒、防脱生发、乌发护发之功效，防治兼顾，安全无毒，是治疗脂溢性脱发理想的纯中药制剂。
本发明是这样构成的：一种六味防脱生发制剂，按照重量份计算，它是用大黄25～35份、苦参15～25份、何首乌10～20份、当归10～20份、黄芪10～20份、薄荷3～7份制成的。
作为优选，按照重量份计算，它是用大黄30份、苦参20份、何首乌15份、当归15份、黄芪15份和薄荷5份制成的。
所述的制剂为酊剂、凝胶剂、软膏剂或搽剂。
本发明所述六味防脱生发制剂的制备方法为：取大黄、苦参、何首乌、当归、黄芪和薄荷，粉碎成粗粉，混匀，照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法，用55％乙醇作溶媒，浸渍24小时后，以每分钟2～3ml的速度缓缓渗漉，收集渗漉液，活性炭吸附，滤过、灌装制成酊剂或者加入适量辅料制成其它制剂。
六味防脱生发凝胶剂的制备方法为：取大黄、苦参、何首乌、当归、黄芪和薄荷，粉碎成粗粉，混匀，照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法，用55％乙醇作溶媒，浸渍24小时后，以每分钟2～3ml的速度缓缓渗漉，收集渗漉液，活性炭吸附，浓缩至10～20重量份，加入凝胶剂基质900～990重量份，搅拌均匀，即得。
按重量份计算，所述的凝胶剂基质由卡波姆940或971  1～4份、甘油2～10份、聚乙二醇4000  1～3份、无水乙醇5～40份、三乙醇胺1～5份和水50～120份组成。其制法为：取卡波姆940加适量蒸馏水于研钵中研磨均匀，滴加三乙醇胺调节使成凝胶状，再依次加入聚乙二醇4000、甘油、无水乙醇，研匀即得凝胶剂基质。
六味防脱生发软膏剂的制备方法为：取大黄、苦参、何首乌、当归、黄芪和薄荷，粉碎成粗粉，混匀，照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法，用55％乙醇作溶媒，浸渍24小时后，以每分钟2～3ml的速度缓缓渗漉，收集渗漉液，活性炭吸附，浓缩至10～20重量份，加入冷至室温后的软膏剂基质900～990重量份，研磨混匀，即得。
按重量份计算，所述的软膏剂基质由羧甲基纤维素钠1～5份、甘油1～3份、尼泊金乙酯0.01～0.08份和水5～35份组成。其制法为：取羟甲基纤维素钠置于研钵中，加入甘油研匀，加入水8～15份使完全溶解；然后边研边加入溶有尼泊金乙酯的水溶液，研磨均匀，即得软膏剂基质。
按重量份计算，所述的软膏剂基质也可以由硬脂酸10～18份、单硬脂酸甘油酯3～6份、蓖麻油18～30份、甘油8～17份、三乙醇胺1～3份、对羟基苯甲酸乙酯0.08～0.4份和水3～13份组成。其制法为：取硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、蓖麻油和对羟基苯甲酸乙酯在50～60℃加热搅拌熔化，得油相基质，另将甘油、三乙醇胺、水在50～60℃加热搅拌熔化，得水相基质，将油相基质缓缓加入水相基质中，并不断搅拌，混匀，即得软膏剂基质。
六味防脱生发搽剂的制备方法为：取大黄、苦参、何首乌、当归、黄芪和薄荷，粉碎成粗粉，混匀，照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法，用55％乙醇作溶媒，浸渍24小时后，以每分钟2～3ml的速度缓缓渗漉，收集渗漉液，活性炭吸附，浓缩至10～20重量份，加入水或甘油或乙醇或植物油900～990重量份，混匀，过滤，即得。
本发明所述六味防脱生发制剂的质量检测方法包括鉴别和含量测定，其中鉴别包括对制剂中大黄和苦参的薄层色谱鉴别；含量测定是用高效液相色谱法测定制剂中2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量。
大黄的鉴别方法是以大黄对照药材和大黄酸对照品为对照，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝30∶10∶0.5为展开剂的薄层色谱法；苦参的鉴别方法是以苦参碱对照品为对照，以三氯甲烷∶甲醇∶浓氨试液＝20∶2.4∶0.8、10℃以下放置的下层溶液为展开剂的薄层色谱法。
2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定方法是以2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品为对照，以乙腈∶水＝23∶77为流动相的高效液相色谱法。
所述的质量检测方法包括：
鉴别：(1)取本制剂20ml，水浴上挥去乙醇，加乙醚提取2次，每次15ml，合并乙醚液，浓缩至1ml作为供试品溶液；另取大黄对照药材0.2g，加乙醚10ml振摇提取20分钟，滤过，滤液挥至约1ml，作为对照药材溶液；再取大黄酸对照品，加乙醚制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5～10μl，分别点于同一硅胶H薄层板上，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝30∶10∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的一个斑点；置氨蒸气中熏后，斑点变为红色；
(2)取本制剂20ml，水浴上挥干，加25ml氯仿和0.3ml浓氨试液溶解，滤过，滤液挥至1ml，作为供试品溶液；另取苦参碱对照品，加氯仿制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶浓氨试液＝20∶2.4∶0.8、10℃以下放置的下层溶液为展开剂，置氨蒸气饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；
含量测定：色谱条件与系统适应性实验  用十八烷基硅胶为填充剂；乙腈∶水＝23∶77为流动相；柱温：40℃；检测波长为320nm；理论塔板数按2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷峰计算应不低于2000；
对照品溶液的制备  取2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品适量，精密称定，用50％乙醇溶解，制成每1ml约含0.1mg的溶液，摇匀，即得；
供试品溶液的制备  精密量取本制剂5ml，置50ml量瓶中，加50％乙醇30ml，密塞，超声提取10分钟，取出放冷至室温，用50％乙醇稀释至刻度，摇匀，即得；
测定法  精密吸取上述三种溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
本制剂每1ml含2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C₂₀H₂₂O₉)不得少于0.12mg。
中医认为脱发常由青年之人，血热内盛，复由心绪烦躁，七情不遂，郁久化火，火热内蕴，热盛生风，“风动叶落”，毛发因之秃落。所以青少年患本病，多为内热所致，其治疗亦应以清热凉血，祛风生发之剂。切不可妄服补药。否则越补越热，越热则发越落。精神情绪变化是本病的重要原因之一，这点上中西医是一致的。只要在日常生活中尽量保持情绪的稳定，充足的睡眠，至少可以防止因精神刺激、疲劳过度引起的脱发。中医对秃发早有认识，有肝藏血、发为血之余，肾主骨，其荣原因与肾虚、血虚有关。近年来并有血瘀学说，故大凡秃法治疗以补肾、养血、活血为主。其中医分行大致有心脾气虚型、肝肾不足型、肝郁血瘀型、气血两虚型。患者可由医生辩证以养血补血、滋补肝肾、健脾益气、养阴凉血、疏肝理气、固涩通络等方论治。
本发明六味防脱生发制剂由大黄、苦参、何首乌、当归、黄芪、薄荷制成。方中，大黄、苦参，大苦大寒，驱热燥湿，抑菌止痒，推荡毒邪，有活血化瘀之功；首乌养阴补血，当归活血；黄芪甘温，利水通痹，补气，托里排毒，佐首乌、当归，润血燥，活血通痹之功；辅以薄荷疏散风热，清头目之品，毛孔宣散，气运血循，以减少油脂分泌。诸药合用，活血化瘀，祛风，并将养血，抑菌止痒，滋润毛发寓于其中。因而该制剂具有养血活血、祛风生发的功能，对气血失和、化燥生风而引起的头屑增多、瘙痒症状有一定缓解作用。
六味防脱生发酊为棕红色至深红色澄明液体，具有特殊气味；其中含有一种能够高效抑制皮脂分泌的高分子物质，这种物质能够使过分活跃的皮脂腺萎缩，清除头皮毛囊中的各种霉素，迅速制止脂溢性脱发；还能为毛发生长提供必需的营养物质，激活毛囊，促进头皮血液循环和脱发再生。大量临床应用表明：使用该酊剂治疗脂溢性脱发3～5天，即可明显产生头皮变干，脱发逐渐减轻的疗效；使用20～30天左右，就能够完全抑制脱发，并有大量新发萌生；使用3～4个月，毛囊尚未完全坏死的患者，脱发、白发的症状就会得到较大程度的恢复与改善。
本制剂外用擦搽脱发部位，以透皮给药的原理，深度渗入皮层，促进血液循环，促进毛发再生，对脂溢性脱发、生理性脱发、中青年头发早白功效奇特。对斑秃、全秃、普秃、白发、少白头、头屑过多、头皮瘙痒亦有奇特功效。
六味防脱生发酊的五步疗法：减少表皮油脂，改善皮下血运；直接松弛血管平滑肌，扩张毛细血管，促进皮下微循环，改善毛发生长环境；依靠特有的高分子物质，增强毛囊细胞的含氧量，激活毛囊细胞的再生能力，促进毛囊黑色素的生成；利用所含有的多种氨基酸和微量元素，直接向毛囊提供营养，促使毛囊由休眠期向生长期转化；长出新发，白发变黑。
为了验证本发明六味防脱生发制剂的效果，申请人以六味防脱生发酊为例进行了临床试验研究，应用纯中药配制的“六味防脱生发酊”外用涂剂，取得了明显的防脱发和生发、去屑止痒等功效，并与单纯使用生发酊(北京同仁堂科技发展股份有限公司制药厂)治疗的患者进行对照，前者效果满意，现总结如下：
1、临床资料
脱发患者共126例，随机分成两组，两组在年龄，脱发范围及病程长短上无显著差异。治疗组用六味防脱生发酊治疗共68例，其中男36例，女30例，年龄17-65岁，病程0.7-13年；对照组共56例，其中男32例，女28例，年龄16.5-67岁，病程1.5-10年。两组患者属湿性脂溢性脱发70例，干性脂溢性脱发54例。前额对称脱发较头顶正中为多。皮损处头皮油腻发亮，有大量头皮屑，呈灰白色碎小糠皮状，或头皮干燥缺乏光泽，自觉瘙痒。
1.1治疗方法  治疗组患者外用六味防脱生发酊将药液轻轻涂患处，最后用手指在涂药处轻轻扣击5-10分钟，每日1-2次，30d为1个疗程，连续治疗4个疗程。对照组患者外用生发酊(北京同仁堂科技发展股份有限公司制药厂)用药棉蘸药擦患处，3次/d。所有患者治疗前及治疗后4个月随访记录结果，停药后评定疗效。
1.2观察指标  脂溢性脱发患者观察治疗前、后脱发程度、头皮瘙痒、鳞屑、皮脂及每平方厘米新生毛发数量。毳毛样发是否变粗、黑、硬、长等。斑秃患者观察用药前、后局部表现，如脱发区是否光滑，有无毳毛、终毛，毳毛、终毛占脱发区比例等。每月复诊1次。
1.3疗效判定标准  痊愈：脱发区恢复正常，无瘙痒感；显效：脱发明显减少或恢复正常，头屑、瘙痒消失，患处有明显新发生长或原毳毛样发变粗、黑、硬、长，外观明显改善；有效：脱发、头屑减少，瘙痒减轻，患处有新发生长，外观有所改善；无效：脱发、头屑略减少或无变化，瘙痒略轻或同前，无新发生长，外观改善不明显。
1.4统计学方法  所有数据采用X₂检验，以P判定有无统计学意义。
2、结果
两组治疗效果(见表1)两组患者4周痊愈率比较有统计学意义(X²＝10.7324，P＜0.01)，治疗组总有效率为57.35％，对照组为33.93％，两组疗效经X²检验，差异有统计学意义(X²＝6.7683，P＜0.01)。
表1 两组患者临床疗效比较(例，％)

  组别  例数  痊愈  显效  有效  无效  有效率(％)  治疗组  68  19  20  21  8  57.35  对照组  56  3  16  22  15  33.93
注：P＜0.05。
3、讨论
六味防脱生发酊剂的最初效果表现为固发，即停止脱发或脱发减少，随后出现生发、长发，即先生出毳毛样发，再逐渐变为终毛，或毳毛样发逐渐变黑、粗、硬、长。该药除有固发、生发作用外，对头皮瘙痒、头屑、皮脂过多都有不同程度的治疗作用，使瘙痒消失或减轻，头屑消退或减少。该药能使头部过多的皮脂减少，使部分头部皮脂少而干燥者变柔润。本试验中未发现明显不良反应。
六味防脱生发酊为纯中药制剂，具有养血活血、祛风生法之功。对气血失和、化燥生风而引起的头屑增多，瘙痒症状有一定缓解作用，配合适当的按摩患处以加强毛囊微循环，改善毛发营养，促进毛发生长和药物吸收，有更好的生发固发效果。
为了确保本发明质量检测方法的科学、有效、合理，申请人也对其进行了相关的试验研究：
原防脱生发灵[黔卫药准字(1993)L第29号]的质量检测标准{贵州省卫生厅文件[黔卫药字(93)第476号]}中没有含量测定项目，且未明确处方量及详细制法。本发明六味防脱生发制剂处方中含有的何首乌为方中主药，为更好地控制产品质量，申请人对其含量测定进行了方法学研究。
处方中的何首乌为主要成分，参考《中国药典》2005版何首乌药材检测成分为2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C₂₀H₂₂O₉)，选择何首乌所含2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C₂₀H₂₂O₉)含量为指标，对本发明制剂中2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C₂₀H₂₂O₉)的高效液相含量测定方法进行了精密度、稳定性、重现性、回收率试验线性范围等项目的研究，建立了行之有效的含量测定方法，以控制产品质量。
1、仪器与试药
仪器：岛津prominence LC-10Atvp高效液相色谱仪
色谱柱：Hypersil-ODS C₁₈(4.6×150mm)
HS10260D超声波清洗机(260W，40KHZ，天津市恒澳科技发展有限公司)
AUW120D电子天平(十万分之一，日本岛津公司)
试药：2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C₂₀H₂₂O₉)对照品(中国药品生物制品检定所，批号：100080-200306)
六味防脱生发酊样品及何首乌阴性样品；
一般用乙腈为分析纯，流动相用乙腈为色谱纯，水为超纯水，其它试剂均为分析纯。
2、测定条件的选择
供试品溶液的制备：精密吸取本发明酊剂5ml，置50ml量瓶中，加50％乙醇30ml，密塞，超声提取10min，取出放冷至室温，用50％乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。
3、色谱条件的确定
参照相关资料2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C₂₀H₂₂O₉)含量测定项下方法，2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C₂₀H₂₂O₉)在320nm处有较大吸收峰，故选择波长320nm作为测定波长。
另对流动相进行研究，用乙腈-水(23∶77)为流动相进行试验，对2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C₂₀H₂₂O₉)分离效果、理论塔板数都比较好。同时得到流速控制在1.0ml/min时，保留时间、分离度均理想，阴性样品无干扰。
故最终确定色谱条件为：检测波长为320nm；流动相为乙腈-水(23∶77)；流速为1.0ml/min。
4、线性关系的考察
精密称取2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C₂₀H₂₂O₉)对照品25.92mg，置25ml容量瓶中，加50％甲醇溶液溶解，定容至刻度(浓度为1.0368mg/ml)。分别精密吸取1ml、1ml、1ml、3ml、5ml，各置于50ml、25ml、10ml、10ml、10ml容量瓶中，加50％甲醇至刻度，摇匀，配制成不同浓度溶液，精密吸取上述5份对照品溶液各10μl，按照色谱条件进样，测定峰面积。以对照品浓度为横坐标，峰面积积分值为纵坐标绘制标准曲线，以峰面积对样品浓度(μg/ml)进行线性回归计算。得线性回归方程为：2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C₂₀H₂₂O₉)：y＝0.0000771X-1.52572058，r＝0.9999，由表可知2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C₂₀H₂₂O₉)在20.736μg/ml～518.4μg/ml范围内线性关系良好。结果见表2：
表2  2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C₂₀H₂₂O₉)线性关系

5、精密度试验
取2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C₂₀H₂₂O₉)对照品溶液(103.68μg/ml)10μl，重复进样5次，测定峰面积，2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C₂₀H₂₂O₉)的平均峰面积为1362173；RSD(％)为0.62％。结果见表3：
表3  2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C₂₀H₂₂O₉)的精密度试验

6、样品提取时间的考察
精密吸取本发明酊剂5ml 4份，置50ml量瓶中，加50％乙醇30ml，密塞，超声处理5分钟、10分钟、15分钟、20分钟，取出放冷至室温，用50％乙醇稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取上述供试品液和对照品10μl注入液相色谱仪，测定，即得。结果如下：
表4 超声时间的考察
  超声时间(分钟)  5  10  15  20  含量(mg/ml)  0.1432  0.1416  0.1395  0.1407
由结果可知提取时间对含量测定结果影响不大，故选择提取时间为10min。
7、稳定性试验
取本发明酊剂5ml，按含量测定项下供试液的制备方法制备供试液，分别于0、2、4、6、8小时进样，测定2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C₂₀H₂₂O₉)峰面积，2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C₂₀H₂₂O₉)平均峰面积为187961，RSD为0.487％，说明供试液在8小时内稳定性良好。结果见表5。
表5  2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C₂₀H₂₂O₉)的稳定性试验

8、重复性试验
按本发明拟定的含量测定方法，取同一批号样品5份，精密量取5ml，按供试品溶液制备和测定项下的方法进行操作，依法测定，结果如表6：
表6  2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C₂₀H₂₂O₉)的重复性试验

9、回收率试验
精密量取已知含量的本发明酊剂5份，每份3ml，分别精密加入一定量2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C₂₀H₂₂O₉)对照品溶液1ml(浓度1.0368mg/ml)，按照供试品溶液制备方法处理，即得5份样品溶液。依含量测定项下的方法测定，计算回收率，结果见表7。
表7加样回收率试验

试验表明：平均回收率为101.2％，RSD＝1.6％，该方法具有较好的回收率。
实验总结：经对六味防脱生发酊中2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C₂₀H₂₂O₉)的含量测定实验，表明：在20.736μg/ml～518.4μg/ml范围内线性关系良好，精密度实验平均峰面积为1362173，RSD(％)为0.62％；稳定性试验平均峰面积为187961，RSD为0.487％，说明供试液在8小时内稳定性良好；重复性试验平均含量为0.1432，RSD为0.23％；加样回收率试验平均回收率为100.186％，RSD＝0.7197％。因此，该含量测定方法可行。
与现有技术相比，本发明所提供的六味防脱生发制剂具有去屑止痒、防脱生发、乌发护发之功效，临床验证其总有效率达96％；且防治兼顾，安全无毒，是治疗脂溢性脱发理想的纯中药制剂；所述质量检测方法专属性强，精密度高，稳定性好，测量结果准确，可有效控制六味防脱生发制剂的质量，从而确保其临床疗效。
具体实施方式：
以下为实施例：
本发明的实施例1：六味防脱生发酊的制备：
大黄30g、苦参20g、何首乌15g、当归15g、黄芪15g、薄荷5g
取以上六味，粉碎成粗粉，混匀，照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法(药典附录I O)，用55％乙醇作溶媒，浸渍24小时后，以每分钟2～3ml的速度缓缓渗漉，收集渗漉液1000ml，活性炭吸附，滤过，灌装，包装，即得六味防脱生发酊。其使用方法分为外洗法和外擦法两种。外洗法：洗头后取本制剂20ml，加温水100ml稀释后直接淋在头皮及发部，并轻轻拍打2～3分钟后擦干，不再冲洗；2～3天一次。外擦法：先用热毛巾将局部擦洗干净，然后将药液轻轻涂擦患处，最后用手指在涂药处轻轻叩击5～10分钟，每日1～2次。治疗期间，忌食烟、酒及辛辣物。对酒精过敏者禁用。
本发明的实施例2：六味防脱生发凝胶剂的制备：
取大黄25g、苦参15g、何首乌10g、当归10g、黄芪10g和薄荷3g，粉碎成粗粉，混匀，照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法，用55％乙醇作溶媒，浸渍24小时后，以每分钟2～3ml的速度缓缓渗漉，收集渗漉液，活性炭吸附，浓缩至10g，加入凝胶剂基质(由卡波姆94020g、甘油60g、聚乙二醇4000  20g、无水乙醇220g、三乙醇胺30g和水800g组成；取卡波姆940加适量蒸馏水于研钵中研磨均匀，滴加三乙醇胺调节使成凝胶状，再依次加入聚乙二醇4000、甘油、无水乙醇，研匀即得)940g，搅拌均匀，即得六味防脱生发凝胶剂。该制剂外用，每次取10～30g，涂擦于头皮及发根部，2～3天一次。
本发明的实施例3：六味防脱生发软膏剂的制备：
取大黄35g、苦参25g、何首乌20g、当归20g、黄芪20g和薄荷7g，粉碎成粗粉，混匀，照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法，用55％乙醇作溶媒，浸渍24小时后，以每分钟2～3ml的速度缓缓渗漉，收集渗漉液，活性炭吸附，浓缩至20g，加入冷至室温后的软膏剂基质(由羧甲基纤维素钠150g、甘油100g、尼泊金乙酯2.5g和水1000g组成；取羟甲基纤维素钠置于研钵中，加入甘油研匀，加入水800ml使完全溶解，然后边研边加入溶有尼泊金乙酯的水溶液，研磨均匀，即得)950g，研磨混匀，即得六味防脱生发软膏剂。该制剂外用，每次取10～30g，涂擦于头皮及发根部，2～3天一次。
本发明的实施例4：六味防脱生发软膏剂的制备：
取大黄25g、苦参25g、何首乌10g、当归20g、黄芪10g和薄荷7g，粉碎成粗粉，混匀，照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法，用55％乙醇作溶媒，浸渍24小时后，以每分钟2～3ml的速度缓缓渗漉，收集渗漉液，活性炭吸附，浓缩至15g，加入冷至室温后的软膏剂基质(由硬脂酸14重量份、单硬脂酸甘油酯4重量份、蓖麻油24重量份、甘油12重量份、三乙醇胺2重量份、对羟基苯甲酸乙酯0.24重量份和水8重量份组成；取硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、蓖麻油和对羟基苯甲酸乙酯在50～60℃加热搅拌熔化，得油相基质，另将甘油、三乙醇胺、水在50～60℃加热搅拌熔化，得水相基质，将油相基质缓缓加入水相基质中，并不断搅拌，混匀，即得)920g，研磨混匀，即得六味防脱生发软膏剂。
本发明的实施例5：六味防脱生发搽剂的制备：
取大黄35g、苦参15g、何首乌20g、当归10g、黄芪20g和薄荷3g，粉碎成粗粉，混匀，照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法，用55％乙醇作溶媒，浸渍24小时后，以每分钟2～3ml的速度缓缓渗漉，收集渗漉液，活性炭吸附，浓缩至18g，加入水或甘油或乙醇或植物油980g，混匀，过滤，即得六味防脱生发搽剂。该制剂外用，每次取10～30g，涂擦于头皮及发根部，2～3天一次。
本发明的实施例6：六味防脱生发制剂的质量检测方法包括以下项目：
鉴别：(1)取本制剂20ml，水浴上挥去乙醇，加乙醚提取2次，每次15ml，合并乙醚液，浓缩至1ml作为供试品溶液；另取大黄对照药材0.2g，加乙醚10ml振摇提取20分钟，滤过，滤液挥至约1ml，作为对照药材溶液；再取大黄酸对照品，加乙醚制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5～10μl，分别点于同一硅胶H薄层板上，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝30∶10∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的一个斑点；置氨蒸气中熏后，斑点变为红色。
(2)取本制剂20ml，水浴上挥干，加25ml氯仿和0.3ml浓氨试液溶解，滤过，滤液挥至1ml，作为供试品溶液；另取苦参碱对照品，加氯仿制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶浓氨试液＝20∶2.4∶0.8、10℃以下放置的下层溶液为展开剂，置氨蒸气饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。
含量测定：色谱条件与系统适应性实验  用十八烷基硅胶为填充剂；乙腈∶水＝23∶77为流动相；柱温：40℃；检测波长为320nm；理论塔板数按2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备  取2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品适量，精密称定，用50％乙醇溶解，制成每1ml约含0.1mg的溶液，摇匀，即得。
供试品溶液的制备  精密量取本制剂5ml，置50ml量瓶中，加50％乙醇30ml，密塞，超声提取10分钟，取出放冷至室温，用50％乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。
测定法  精密吸取上述三种溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本制剂每1ml含2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C₂₀H₂₂O₉)不得少于0.12mg。