一种痹克片在治疗痛风风湿郁热的应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种痹克片在治疗痛风风湿郁热的应用，其特征在于痹克片在治疗痛风风湿郁热具有新的用途。本发明的药理试验结果表明，痹克片对尿酸钠致痛风性关节炎大鼠具有一定的治疗作用，表现为抑制踝关节肿胀度、改善大鼠肿胀足步态、减轻肿胀足疼痛感；痹克片对酵母膏致高尿酸血症大鼠也具有一定的防治作用，痹克片不同程度降低大鼠血清尿酸和黄嘌呤氧化酶活性、促进24h尿量及24h尿酸总排泄量增加。
【专利说明】一种痹克片在治疗痛风风湿郁热的应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种已知物质的新用途，确切地说是一种痹克片在治疗痛风风湿郁热的应用。
【背景技术】[0002]痛风是指长期嘌呤代谢异常、血尿酸增高引起组织损伤的一组疾病，属中医的痹证、痛风、历节等范畴，是指因外邪阻滞经络，气血凝滞，肝肾两虚引起的关节肌肉疼痛麻木、重着、屈伸不利的病症，慢性病人多伴有关节畸形僵硬、痛风石、肾脏病变等。我国痛风发病率高达1.14%，男性发病率明显高于女性，比例约为20:1.[0003]痛风性关节炎是嘌呤代谢障碍、血尿酸增高所致反复发作的关节炎症，有急、慢性之分。急性痛风性关节炎的发作是由于血尿酸浓度过高，呈过饱和状态，从而使尿酸钠微结晶沉积在关节软骨、骨膜及周围组织中，激活局部单核巨噬细胞，诱导中性粒细胞等炎细胞浸润，分泌炎症因子等一系列炎症反应，最终造成关节损伤。但部分急性痛风性关节炎发作时也可无高尿酸血症,而某些大量痛风石的患者,往往无急性痛风性关节炎发作史。当血尿酸水平持续超过其饱和度时，可致尿酸盐以结晶形式沉积在关节软骨、骨质、滑膜、肌腱和皮下组织，引起慢性炎症反应，其周围有大量单核吞噬细胞包绕，形成上皮肉芽肿。急性痛风性关节炎反复发作可发展为多关节受累，并从急性期的关节局部肿胀发展为慢性期骨内痛风石造成的局部骨质缺损和关节畸形。
[0004]痛风性关节炎属中医痹证、痛风、历节等范畴。《素问.痹论篇》有谓:“所谓痹者，各以其时，重感风寒湿之气也”，从而奠定了中医对痹证的认识。并对其证候进一步分类为“其风气胜者为行痹；寒气胜者为痛痹；湿气胜者为着痹”。究其病因，主要责于正气不足，感受风、寒、湿、热之邪所致。其中，感受风热，与湿相博，是为痹证湿热证，亦有感受风湿，郁久化热，是谓风湿郁热证。
[0005]痹克片是贵州苗族民间经典验方，选云贵高原天然野生的中草药白敛，五匹凤，肿节风，青风藤，追风伞等数味中药为原料，制成的纯中药提取物(生物碱)制剂，经临床验证疗效确切，本品清热除湿，活血止痛。用于痹病湿热痹阻，淤血阻络证所致的肌肉、关节疼痛，以及类风湿性关节炎等具有良好疗效。
[0006]我们在临床推广过程中发现，痹克片对痛风性关节炎风湿郁热证有着较为显著的治疗效果，极具临床推广使用价值。

【发明内容】

[0007]本发明的目的是提供一种一种痹克片在治疗痛风风湿郁热的新用途。
[0008]上述目的通过以下方案实现:
[0009]本发明的特征在于:是由以下重量份的白蔹500-1500、肿节风200-400、五匹风200-400、追风伞200-400、青风藤500-1500、知母100-200、丹参100-200组成的复方中药痹
克片在治疗痛风风湿郁热的应用。[0010]所述的复方中药的新用途，其特征在于:是由以下重量份的白蔹1000、肿节风333.3、五匹风333.3、追风伞333.3、青风藤1000、知母166.7、丹参166.7组成的复方中药痹克片在治疗痛风风湿郁热的应用。
[0011]所述的痹克片在治疗痛风性关节炎风湿郁热证中的应用。
[0012]所述的复方中药可以为片剂(痹克片)、胶囊剂(痹克胶囊)或颗粒剂(痹克颗粒)。
[0013]本发明的有益效果为:
[0014]药理试验结果表明，痹克片对尿酸钠致痛风性关节炎大鼠具有一定的治疗作用，表现为抑制踝关节肿胀度、改善大鼠肿胀足步态、减轻肿胀足疼痛感；痹克片对酵母膏致高尿酸血症大鼠也具有一定的防治作用，痹克片不同程度降低大鼠血清尿酸和黄嘌呤氧化酶活性、促进24h尿量及24h尿酸总排泄量增加。
[0015]以上药理试验结果无疑为痹克片治疗痛风性关节炎提供了试验依据。且相对于西药效果更佳，从而为传统中药制剂增加了新的治疗用途，极具推广使用价值。
【具体实施方式】
[0016]本发明是由以下重量份的白蔹1000、肿节风333.3、五匹风333.3、追风伞333.3、青风藤1000、知母166.7、丹参166.7组成的复方中药在治疗痛风风湿郁热的应用。
[0017]发明人已通过大鼠实验 与临床实验证明了本发明在治疗痛风风湿郁热的应用。
[0018]一、动物试验
[0019]I 材料
[0020]1.1实验动物
[0021]雄性SD大鼠120只，体重180_220g，安徽长临河医药科技有限公司提供。实验前适应性饲养lw，动物自由摄食、饮水，室温控制在20-25°C，湿度40%-60%。
[0022]1.2药物与试剂
[0023]痹克片(合肥今越制药有限公司，批号:121201)，别嘌呤醇片(合肥久联制药有限公司，批号:20120825),秋水仙碱片(西双版纳版纳药业有限责任公司，批号:120611),酵母膏(国药集团化学试剂有限公司，批号:20121108)，尿酸(Sigma公司，批号:20101124)，氢氧化钠(上海苏懿化学试剂有限公司，批号:201002201);尿酸测定试剂盒(北京利德曼生化股份有限公司，批号:206072E)，黄嘌呤氧化酶测试盒(南京建成生物工程研究所，批号:20130401);水合氯醛(国药集团化学试剂有限公司，批号:20090724);生理盐水(安徽丰原药业股份有限公司，批号:091135)。
[0024]1.3主要仪器
[0025]AU640型全自动生化分析仪，日本奥林巴斯；BS-110S精密电子天平，北京赛多利斯天平有限公司JDL-16C台式高速离心机，上海安亭科学仪器厂；MP6001电子天平，上海恒平科学仪器有限公司产品；YLS-7A型足趾容积测量仪，山东省医学科学院设备站；UV-160型紫外可见分光光度计，上海美谱达仪器有限公司生产；TGL-16G型离心机，上海安亭科学仪器厂产品；HH-S2系列恒温水浴锅，江苏省金坛市环宇科学仪器厂等。
[0026]2 方法
[0027]2.1痹克片对尿酸钠致痛风性关节炎大鼠的影响
[0028]2.1.1尿酸钠结晶及尿酸钠溶液的制备[0029]将6mLlmol/L的NaOH和Ig尿酸加入至194mL蒸馏水中煮沸，待尿酸完全溶解后，滴入lmol/LHCL调pH值至7.2，溶液呈现乳白色后，搅拌冷却，再将其贮存于4°C冰箱中，24h后除去上清液，用滤纸将析出沉淀物水份吸干，至烘箱内干燥即得尿酸钠结晶。使用前180°C灭菌2h，称取尿酸钠结晶1250mg，用45mL生理盐水、5mL吐温80配制成25mg/mL50mL尿酸钠溶液，并通过超声破碎处理,备用。
[0030]2.1.2模型的制备
[0031]Coderr经典方法:将大鼠紧握于手掌中俯卧固定，再将其右踝关节弯曲，扪及两骨突起，局部消毒后，用4号注射针自两骨突之间45°方向进针，插入胫骨肌腱内侧，感觉有脱空感后，注入尿酸钠溶液0.1mL,以关节囊对侧鼓起为注入标准，制备痛风性关节炎模型。正常对照组右踝关节腔注射等容量对照液。密切观察在模型制备后6-72h内，痹克片对痛风性关节炎大鼠踝关节肿胀度、步态、屈关节疼痛感的影响。[0032]2.1.3实验分组与给药
[0033]取体质量180_220g、健康雄性SD大鼠60只，常规饲养观察lw。大鼠随机分为正常对照组、模型组、秋水仙碱组(0.3mg.kg-1)、痹克片高(1440mg.kg-1)，中(480mg.kg-1)，低剂量组(160mg.kg-1)，每组10只，各组分别灌服相应药物，正常对照组和模型组给予等容量蒸馏水，I次/d，连续15d。实验每5d称取动物体重I次，根据体重调整给药容量。
[0034]2.1.4观察指标
[0035]2.1.4.1 一般状态观察
[0036]每日观察动物的外观、毛色、活动、食量、二便，实验每5d称体重I次，记录动物体重的变化并调整给药容量。制备痛风性关节炎模型后密切观察大鼠活动情况。
[0037]2.1.4.2踝关节肿胀率检测
[0038]实验第15d末次给药Ih后，先在每组大鼠右后足踝关节偏上Icm处用笔标记一圈，再将标记的大鼠右后足置YLS-7A型足趾容积测量仪内，测量各组大鼠右踝关节容积，作为造模前各组大鼠右踝关容积值。测量后，按上述方法建立痛风性关节炎模型，各组于建模611、1211、2411、4811、7211后测量大鼠右踝关节容积，以造模后与造模前右踝关节容积计算右踝关节肿胀率。
[0039]肿胀率(%) =(致炎后踝关节容积-致炎前踝关节容积)/致炎前踝关节容积 X 100%O
[0040]2.1.4.3行为学评分
[0041]造模6h、12h、24h、48h、72h后按Coderre等方法观察大鼠步行时步态。评分标准改良为:
[0042]O级:正常步态，双足均匀着地，计O分；
[0043]I级:轻度跛行，注射尿酸钠的下肢略有弯曲，计I分；
[0044]II级:中度跛行，注射尿酸钠的下肢刚触及地面，计2分；
[0045]III级:严重跛行，注射尿酸钠的下肢离开地面，出现3肢行走步态，计3分。
[0046]2.1.4.4屈关节疼痛度评分
[0047]造模6h、12h、24h、48h、72h后参照文献中慢性关节痛的测定评分方法及标准略以改进。踝关节疼痛实验评分方法:将大鼠装进特制的鼠筒内，后腿及尾部伸出筒外，稳定几分钟后测定，向脚掌侧缓慢屈曲动物的右侧踝关节，每隔5秒进行I次，共5次。屈关节时，动物出现短促而明显的缩腿反应或撕叫则评为I分，无反应为O分。
[0048]2.2痹克片对酵母膏致高尿酸血症大鼠的影响
[0049]2.2.1酵母膏致致高尿酸血症大鼠模型
[0050]按照文献的方法造模:以酵母膏20g/kg灌胃，I次/d，连续10d，复制大鼠高尿酸血症模型，空白组给予等体积蒸馏水。实验第5天称取动物体重I次，根据体重调整酵母膏给予容量。
[0051]2.2.2实验分组与给药
[0052]取体质量180_220g、健康雄性SD大鼠60只，常规饲养观察lw。大鼠随机分为正常对照组、模型组、别嘌呤醇组(20mg.kg-1)、痹克片高(1440mg.kg-1),中(480mg.kg-1),低剂量组(160mg.kg-1)，每组10只，各组分别灌服相应药物，正常对照组和模型组给予等容量蒸馏水，I次/d，连续15d。实验每5天称取动物体重I次,根据体重调整给药容量。
[0053]给药第5天，按照上述方法建立高尿酸血症大鼠模型，正常对照组和模型组给予等容量蒸馏水。实验第13天开始收集大鼠24h尿液，记录尿量，按磷钨酸法测定尿液中尿酸值，并计算24h尿酸排泄量。第15天给药Ih后，腹主动脉取血，分离血清，按磷钨酸法测定血清尿酸值，按酶比色法测定血清黄嘌呤氧化酶活性。
[0054]2.2.3观察指标
[0055]2.2.3.1 一般状态观察
[0056]每日观察动物的外观、毛色、活动、食量、二便，实验每5d天称动物体重I次，观察动物体重的变化并调整灌胃容量。
[0057]2.2.3.2血清中尿酸及黄嘌呤氧化酶的测定
[0058]实验第15天给药Ih后，腹主动脉取血，分离血清，测定血清中尿酸及黄嘌呤氧化酶，按照试剂盒说明书的方法检测。
[0059]2.2.3.324h尿量及尿液尿酸水平的测定
[0060]实验第13天开始收集大鼠24h尿液，记录尿量，按磷钨酸法测定尿液中尿酸值，并计算24h尿酸排泄量。
[0061]2.3实验结果统计方法与处理
[0062]实验结果连续型变量均以“均数土标准差(? 士s)”表示，应用SPSS16.0forwindows软件系统进行统计学分析。组间比较采用One-Way ANOVA分析。P〈0.05表示差异具有统计学意义。
[0063]3 结果
[0064]3.1痹克片对尿酸钠致痛风性关节炎大鼠的影响
[0065]3.1.1动物一般状态观察
[0066]正常对照组大鼠毛色致密光滑，反应灵敏，两眼有神，活跃，饮食与二便正常。实验开始后，痹克片高、中、低剂量组大鼠毛色致 密光滑，反应灵敏，两眼有神，活动自如，饮食与二便正常；造模组大鼠活动量逐渐减少，毛色稍欠光泽，饮食与二便皆正常。秋水仙碱组大鼠毛色亦欠光泽，精神欠佳，懒动，食量稍减少，二便正常。
[0067]3.1.2痹克片对痛风性关节炎大鼠踝关节肿胀率的影响
[0068]模型组大鼠右踝关节注射尿酸钠溶液6h后，关节明显肿胀，12h关节肿胀度达高峰，关节肿胀率在24h、48h、72h虽有所减退，但与正常对照组比较，两组差别仍具有非常显著意义(P〈0.01)。与模型组比较，痹克片高剂量组(1440mg/kg)在造模后6h、12h、48h大鼠关节肿胀率均明显降低(P〈0.05)，痹克片中剂量组(480mg/kg)在造模后6h大鼠关节肿胀率明显降低(P〈0.05)，痹克片低剂量组(160mg/kg)大鼠关节肿胀率有降低的趋势，但无统计学意义。结果见表1。
[0069]表1痹克片对痛风性关节炎大鼠踝关节肿胀率的影响(λ: 土S)
[0070]
【权利要求】
1.一种痹克片在治疗痛风风湿郁热的应用，其特征在于痹克片在治疗痛风风湿郁热具有新的用途。
2.根据权利要求1所述的一种痹克片在治疗痛风风湿郁热的应用，其特征在于:所述的痹克片是由以下重量份的原料组成的:白蔹500-1500、肿节风200-400、五匹风200-400、追风伞 200-400、青风藤 500-1500、知母 100-200、丹参 100-200。
3.根据权利要求1或2所述的一种痹克片在治疗痛风风湿郁热的应用，其特征在于:所述的痹克片可以为片剂、胶囊 剂或颗粒剂。
【文档编号】A61P29/00GK103505618SQ201310415770
【公开日】2014年1月15日 申请日期:2013年9月12日 优先权日:2013年9月12日
【发明者】赵栋磊, 杨波, 刘廷武, 王旦, 李洋, 田开鹏 申请人:合肥今越制药有限公司