细胞划痕实验步骤及注意事项

实验材料

细胞样品

试剂、试剂盒

无血清培养基PBS

仪器、耗材

6孔板marker笔直尺枪头

实验步骤

一.准备：

所有能灭菌的器械都要灭菌，直尺和marker笔在操作前紫外照射30min（超净台内）

二.流程：

1.先用marker笔在6孔板背后，用直尺比着，均匀得划横线，大约每隔0.5~1cm一道，横穿过孔。每孔至少穿过5条线。

2.在空中加入约5X105个细胞，具体数量因细胞不同而不同，掌握为过夜能铺满。

3.第二天用枪头比着直尺，尽量垂至于背后的横线划痕，枪头要垂直，不能倾斜。

4.用PBS洗细胞3次，去处划下的细胞，加入无血清培养基。

5.放入37度5%CO2培养箱，培养。按0，6，12，24小时取样，拍照。