答 :你觉得质粒上的35s启动子、lac启动子都是天然存在的么?都是人工构建上去的!探针可以是基因的一部分序列。这样用探针可以调出其旁邻序列,从而获得全长基因。限制性内切酶不能获得基因,只能获得可能带有基因的DNA片段。所以现在找基因都是直接构建cDNA文库来搜。探针是单链的。
问:基因工程中:基因表达载体中的启动子是质粒上原本就有的还是人为加上去的,如果是原来就有的话,怎么会刚好就在转座子附近,而且后面马上就有终止子,它们之间没有基因的话这个启动子和终止子存在就没有必要。所以我怀疑是人为加上去的。另外目的基因的筛选,用DNA杂交的方法,但是这个探针本身就难以找到,知道了探针,实际上就意味着找到了目的基因。本身就在寻找目的基因,又怎么会有探针呢?用限制性内切酶切割获得目的基因本身就很大,而且带了其他的基因,怎么处理好这样的干扰?
问题补充:
基因探针是双链还是单链?我觉得双链比较好,只要到时候变性就可以,但是为什么杂交后的的探针不会被洗掉,而没有配对的探针会被洗掉呢?
答 :你觉得质粒上的35s启动子、lac启动子都是天然存在的么?都是人工构建上去的!探针可以是基因的一部分序列。这样用探针可以调出其旁邻序列,从而获得全长基因。限制性内切酶不能获得基因,只能获得可能带有基因的DNA片段。所以现在找基因都是直接构建cDNA文库来搜。探针是单链的。
联系客服