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液相色谱法蜂蜜含量检测方案(依据2015版中国药典)

明朝李时珍的《本草纲目》这样记载蜂蜜的功效:清热也、补中也、润燥也,解毒也、止痛也。

蜂蜜在很多中成药药丸中,都是以辅料的形式出现,为了便于成型,再就是做药引,蜂蜜有很大的药用价值的。

蜂蜜的药用价值非常广泛,不仅只体现在中成药这一块,蜂蜜对肝炎、肺结核、失眠、神经衰弱、胃肠疾病都有很好的辅助治疗作用。

检测标准

AUPOS液相色谱应用实验室依照2015版《中国药典》一部中蜂蜜样品进行检测,对蜂蜜样品中果糖、蔗糖、葡萄糖、和麦芽糖的含量做出详细应用方案 。

溶液配制

供试品溶液:取蜂蜜样品约1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入40%乙腈20ml,溶解,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

系列对照品溶液:分别精密称取果糖对照品1.0g,葡萄糖对照品0.8g,置同一具塞锥形瓶中,精密加入40%乙腈20ml,溶解,摇匀,作为果糖,葡萄糖对照品储备液。另精密称取蔗糖对照品0.2g,麦芽糖对照品0.2g,置同一具塞锥形瓶中,精密加入40%乙腈10ml,溶解,摇匀,作为蔗糖、麦芽糖对照品储备液。分别精密量取果糖,葡萄糖对照品储备和蔗糖、麦芽糖对照品储备液,加40%乙腈配成不同浓度的果糖、葡萄糖、麦芽糖混合对照品溶液。

每一浓度溶液配制中,储备液的用量和稀释体积见下表:

色谱条件

仪器:APS80-16PLUS智能液相色谱仪
流动相:乙腈:水=75:25(V/V)

流速:1.0ml/min

柱温:30℃检测器:

示差(40℃)

进样量:15ul

测试图谱及结果评价

图1:系列浓度对照品溶液叠加图表1:拟合曲线方程

图2:供试品溶液图谱:

图3:供试品溶液连续进样三针叠加图谱

对蜂蜜样品供试品测试结果显示

结 论在药典色谱条件下,APS-80-16PLUS智能液相色谱系统,采用APS-Hon-Sugar色谱柱(蜂蜜专用柱)的分离过程中,对果糖、蔗糖、葡萄糖、和麦芽糖的混合对照品溶液测定,绘制标准曲线,得回归方程,回归系数R²>0.99,完全符合药典对于四种糖准确定量的要求。        

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