细胞增殖是生物体的重要生命特征,生物以细胞细胞分裂的方式产生新的细胞,补充体内已经衰老和死亡的细胞,用以维持新陈代谢,同时细胞增殖也是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础。故细胞增殖是评价细胞活性、代谢、生理和病理状况的重要指标。直接测定 DNA 合成是细胞增殖检测的最准确方法之一,是测定物质毒性、评估药物安全评价、细胞健康的基本方法,其中以前常用的方式是利用胸腺嘧啶核苷酸类似物——BrdU 进行检测。
EdU 也是一种胸腺嘧啶核苷类似物,但其连有的炔羟基团在天然化合物中很少见,在细胞增殖时能够插入正在复制的 DNA 分子中,基于 EdU 与染料的共轭反应可以进行高效快速的细胞增殖检测分析,可以有效地检测处于 S 期的细胞百分数。与传统的免疫荧光染色 (BrdU) 检测方法相比,更简单,更快速,更准确。EdU 只有 BrdU 抗体大小的 1/500 ,在细胞内更容易扩散,不需要严格的样品变性(酸解、热解、酶解)处理,有效地避免了样品损伤。
细胞增殖检测方法讨论:EdU VS BrdU
细胞增殖检测方法讨论:EdU VS BrdU
细胞增殖检测方法讨论:EdU VS BrdU
CCK-8 试剂中含有 WST-8,它在 1-Methoxy PMS 的作用下被细胞中的线粒体内的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比,与细胞毒性成反比,间接反映活细胞数量。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。MTT 和 CCK-8 基本原理基本相似,都是被活细胞线粒体内的一些脱氢酶还原成有色甲瓒。不同之处在于 CCK-8 法生成的 formazan 是水溶性的,不需要再吸出培养液加入有机溶剂溶解这个步骤,因此可以减少一定的误差。其他优点就是重复性优于 MTT,对细胞毒性小,为1瓶溶液,无需预制,即开即用。但是 CCK-8比MTT 的价格要贵不少,所以一般来说,还是 MTT 法用的多。MTT 相关实验全应用指南
做了 5 年 MTT 实验,分享几点心得体会
MTT 实验前注意事项及贴壁细胞/悬浮细胞实验大汇总
更多细胞常用实验相关内容,点击下方小程序免费查看,还能一键订阅,有更新第一时间收到通知。如果你是实验小白可以收藏、转发文章,在做实验的时候按照流程一步步操作。如果你是师兄师姐,也可以把本篇文章分享给师弟师妹们!
本站仅提供存储服务,所有内容均由用户发布,如发现有害或侵权内容,请
点击举报。