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优化的Cas9核酸酶特征和相关研究

优化的Cas9核酸酶化脓性链球菌设计用于活细胞或生物体的基因组编辑以及体外消化。使用 Cas9/RNP 递送提高基因组编辑效率 成功的 CRISPR/Cas9 基因组编辑可以通过多种方法(质粒、mRNA、核酸酶、病毒递送)进行。

优化的Cas9核酸酶#CAS9050描述和特征:

Cas9核酸酶来源于化脓性链球菌。包含一个 N 端 His 标签、2 个优化的核定位序列 (NLS) – 1 个 N 端 NLS 和 1 个 C 端 NLS + 1 个真正的靶向序列。

大小: 164.48 kDa

等电点:9.26

浓度:1 毫克/毫升:以 Hepes 10 mM pH 7.5、250 mM 氯化钠、1 mM DTT、50% 甘油提供

100 μg Cas9 核酸酶 = 608 pmol这种 Cas9 核酸内切酶是 CRISPR/Cas9 机制的一部分,该机制起源于细菌,其中它通过 RNA 引导的切割提供针对入侵的外来 DNA 的获得性免疫。

Cas9核酸酶(CRISPR相关蛋白9)是一种RNA引导的核酸内切酶,用于通过产生序列特异性双链断裂(DSB)进行基因组编辑。DNA中DSB的存在导致细胞修复过程的激活,其中DNA恢复通过非同源末端连接(NHEJ)或同源定向重组(HDR)发生,从而改变基因组。基因敲低、缺失或插入说明了CRISPR/Cas9系统的主要成就。

图:用sgRNA编程的Cas9核酸酶。结合后,短向导RNA(sgRNA)特异性靶向短DNA序列标签(PAM)。Cas9核酸酶在PAM序列上游切割DNA三个核苷酸。

优化的Cas9核酸酶相关研究:

Crispr/Cas9基因组编辑

CRISPR Cas9转染试剂

蛋白质输送

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