Biogradetech改良Masson三色染色液染色程序说明

在狭义上，结缔组织是指它所包含的三种纤维：胶原纤维、网状纤维和弹性纤维，其中胶原纤维分布最广、含量最丰富。Masson三色染色被称为Masson染色法，是结缔组织染色最经典的方法之一，也是权威的以及胶原纤维染色的经典技术。术语“三色染色”通常是指对细胞进行染色细胞核，并选择性地显示胶原纤维和肌肉纤维。这种方法的染色原理与阴离子染料分子的大小和组织渗透性：较小的分子可以很容易地渗透致密和低渗透性组织，而较大的分子只能进入结构松散和高渗透性组织。然而，苯胺蓝分子量大，因此Masson染色后，肌肉纤维呈现红色，胶原蛋白纤维呈现绿色（浅绿色）或蓝色（苯胺蓝）。

改良Masson三色染色液基本参数：

目录号：A-CSH274

规格：8×50mL

储存：在2~8°C的黑暗中储存（12个月）

程序：

1.将组织固定在10%福尔马林固定剂中，然后常规脱水和包埋。切片被切割成4μm的厚度，然后进行常规的脱蜡直至脱水。

2.将切片置于Bouin溶液中，在室温下孵育过夜或置于37°C的培养箱中孵育2小时进行媒介化。然后，用自来水冲洗切片，直到切片上的黄色消失。

3.切片用天青石蓝染色溶液染色2-3分钟，然后进行短暂的水洗。

4.切片用Mayer苏木精染色溶液染色2-3分钟，然后进行短暂的水洗。

5.切片在酸-醇分化溶液中分化几秒钟，然后用水冲洗10分钟

6.切片用胭脂红染色液染色10分钟，然后用蒸馏水漂洗。

7.将切片用磷钼酸水合物溶液处理约10分钟。

8.倒出上清液，在不用水冲洗的情况下，将切片直接用苯胺蓝染色溶液染色5分钟。

9.将切片用弱酸溶液处理2分钟。

10.使用95%乙醇进行快速脱水。切片在100%乙醇中脱水三次，每次5-10秒。

11.切片在二甲苯中清洗三次，每次清洗1-2分钟。最后，使用中性安装介质进行密封

改良Masson三色染色液供应材料和储存条件：

注：

1.应尽可能彻底地对各部分进行除石蜡处理。酸性醇的分化时间应根据切片的厚度、组织类型及其年龄来确定。

2.磷钼酸的作用有两个：一方面，它将染红的胶原纤维区分为无色或淡红色，同时使肌肉纤维和纤维素仍呈现鲜红色；另一方面，它作为胶原纤维的媒染剂，促进它们与苯胺蓝染色溶液的结合。

3.苯胺蓝染色后用弱酸溶液处理，目的是去除细胞质中的蓝色，使染色生动清晰。对于用Zenker溶液固定的组织，弱酸溶液的处理时间可以延长到5分钟。

4.弱酸性溶液可提高色彩的清晰度和生动性。如果需要大量，可以制备0.1-0.3%的乙酸溶液作为替代品。

该试剂仅用于科学研究领域，不适用于临床诊断或其他用途。