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分光光度法:最广泛的氨检测办法

氨是生物系统中重要的氮源,也是氨基酸降解代谢的产物之一,在生理机能(比如酸碱度平衡)中起着重要作用。目前,市场上氨的检测方法有三类:分光光度法、电化学法以及快速检测管。其中快速检测管虽然操作方便,但是检测的精确度较差,电化学法以氨传感器为主体,虽然检测数据相对准确,但是成本较高,目前以分光光度法应用最为广泛。

参考Abnova的邻苯二甲醛荧光法 Ammonia Assay Kit,KA3772、靛酚蓝比色法 Ammonia Assay Kit,KA3707、探针检测法 Ammonia Assay Kit,KA0810

一、邻苯二甲醛荧光法

原理:利用没有荧光信号的邻苯二甲醛在碱性条件下与氨/铵离子反应产生具有荧光信号的吲哚取代衍生物,其荧光强度与氨/铵离子的含量成正比,通过测定一系列不同浓度的氨氮与邻苯二甲醛反应后产物的荧光强度,绘制成一条曲线。再由未知试样的荧光强度得到氨的含量。

优点:

操作简便,灵敏度高,检测限为0.012-1mM;

可进行高通量检测;

二、靛酚蓝比色法

原理:在碱性条件下,铵经次氯酸钠氧化生成的氯胺与苯酚被亚硝基铁氰化钠催化生成蓝色的靛酚,其在670nm波长处有强烈吸收,吸光度值与氨含量成正比,通过测定一系列不同浓度的氨氮反应后产物的吸收值,绘制成一条曲线。再由未知试样的吸收值得到氨的含量。

产品特点:

1、步骤简单,只需要30分钟即可完成检测;

2、操作快速并且方便,适用于高通量分析;

三、探针检测法

原理:氨反应后被转化成一种中间产物,该中间产物可以与OxiRed探针发生反应,最终的反应产物显现颜色(λmax = 570 nm),吸光度值与氨含量成正比,通过测定一系列不同浓度的氨氮反应后产物的吸收值,绘制成一条曲线。再由未知试样的吸收值得到氨的含量。

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