1、技术原理:
慢病毒(Lentivirus)载体是以 HIV-1 (人类免疫缺陷1型病毒)为基础,使用疱疹病毒VSVG 外壳蛋白发展起来的工具载体。其毒性基因已经被剔除并被外源性目的基因所取代,属于假型病毒。慢病毒具有感染谱广泛特点,并且可以有效感染分裂和非分裂细胞。慢病毒可以把外源基因有效地整合到宿主染色体上,从而达到持久性表达;因此成为导入外源基因的有力工具。现在慢病毒系统已经被广泛应用到各种细胞系的基因敲除/敲入、基因过表达、RNA干扰、microRNA研究以及活体动物实验中。
2、技术优势:
慢病毒与其他病毒比较,具有以下优势:
① 表达时间长:慢病毒通过将外源基因整合到宿主细胞基因组上,可实现目的基因长时间稳定的表达,不随着细胞分裂传代而丢失,是细胞实验的首选;
② 免疫原性低:直接注射活体组织不易造成免疫反应,适用于动物实验;
③ 安全性高:未发现致病性,已被用于CAR-T 治疗作用于人体。
3、质量控制:
① 基因序列测序
② 载体酶切鉴定
③ 慢病毒通过qPCR对病毒基因拷贝进行测定
④ 一般情况下,慢病毒的滴度在108~109TU/ml
4、应用:
细胞感染:慢病毒可有效地感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞,为神经领域、心血管领域、肝脏、肌肉、眼、肺、肿瘤及其他领域的科研工作者们提供更强有力的基因研究工具。
体内注射:神经系统
病毒图片来源百度
※独有的病毒分级纯化工艺,满足您从永生化细胞到原代细胞和干细胞,到动物体内水平等不同实验需 求。
① 基因过表达慢病毒服务
② 基因干扰慢病毒服务
③ MicroRNA研究慢病毒服务
④ CRISPR/Case9慢病毒服务