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seahorse 图片结果的分析(OCR)(ECAR)

seahorse系列的细胞能量代谢检测仪器,对于检测细胞的糖酵解及氧化磷酸化等比较方便,根据本人的经验给大家讲解一下具体代表的意义希望对做试验的人们有用的。

方法/步骤

  1. 一、首先是耗氧量的检测,

       在加oligo之前显示的数值,代表的是细胞的基础耗氧量,包括线粒体氧化磷酸化及质子漏耗氧。即质子在线粒体膜通过呼吸链形成电势能后,一部分质子回流可以通过ATP合酶形成ATP,将势能转化为ATP中的能量。一部分通过线粒体膜但是只是发生氧化,势能转化为热量,但是没有用于合成ATP。oligo是ATP合酶抑制剂,加入此药后减少的耗氧代表的是机体用于ATP合成的耗氧量,间接显示此时细胞的ATP产量。FCCP是一种解偶联剂,作为一种质子载体使得大量质子回流,大量耗氧,但是这种质子回流不能形成ATP,FCCP后耗氧的增加,代表线粒体的最大耗氧能力,间接显示最大的呼吸能力,而其相对与基础值的高值代表其还具有的呼吸潜力。最后加入是抗霉素A和寡霉素,二者是呼吸链抑制剂,完全阻止线粒体耗氧。

  2. 二、细胞的胞外产酸能力间接显示糖酵解能力

        基础值代笔的是细胞的非糖酵解产酸值,加入葡糖糖后代表的是此时细胞的糖酵解能力,而加入oligo后,氧化磷酸化被抑制,此时细胞完全靠糖酵解供氧,此时产酸增加,增加值代表细胞的还具有的糖酵解能力即潜力,总的数值代表细胞的最大糖酵解能力,最后加的是糖酵解抑制剂,此药之后的数值表明完全是由糖酵解之外的机理产酸所致的。

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