矮小相关转录因子 (RUNX) 家族在前列腺癌中的作用

Role of the runt-related transcription factor (RUNX) family in prostate cancer

Abstract

Prostate cancer (PCa) is a very complex disease that is a major cause of death in men worldwide. Currently, PCa dependence on the androgen receptor (AR) has resulted in use of AR antagonists and antiandrogen therapies that reduce endogenous steroid hormone production. However, within two to three years of receiving first-line androgen deprivation therapy, the majority of patients diagnosed with PCa progress to castration-resistant prostate cancer (CRPC). There is an urgent need for therapies that are more durable than antagonism of the AR axis. Studies of runt-related transcription factors (RUNX) and their heterodimerization partner, core-binding factor subunit b (CBFβ), are revealing that the RUNX family are drivers of CRPC. In this review, we describe what is presently understood about RUNX members in PCa, including what regulates and is regulated by RUNX proteins, and the role of RUNX proteins in the tumor microenvironment and AR signaling. We discuss the implications for therapeutically targeting RUNX, the potential for RUNX as PCa biomarkers, and the current pressing questions in the field.

     在这篇综述中，我们讨论了 runt 相关转录因子 (RUNX) 转录因子家族在前列腺癌 (PCa) 中的作用，以及这些知识如何潜在地用于推进 PCa 治疗。PCa 是美国男性癌症死亡的第二大原因，也是全球男性第二常见的癌症 [ [ 1 , 2 ] ]。当 PCa 完全定位时，它基本上是可治愈的。然而，一旦肿瘤扩散，患者的生存机会就会急剧下降[ [ 3 ] ]。RUNX 转录因子家族与从局部到转移性 PCa 的进展有关。RUNX 是一个转录因子家族的联名，它们在控制正常细胞生长和发育所需的各种过程中发挥关键作用，包括细胞增殖、分化、细胞谱系规范和细胞凋亡 。RUNX 蛋白在其中发挥重要作用的其他过程是表观遗传记忆、DNA 修复、上皮-间质转化和炎症 [ [ 6 ] ]。RUNX基因已在绝大多数后生动物基因组中发现，但基因数量因物种而异 [ [ 5] ]。在大多数双侧动物中，通常只有一个RUNX基因拷贝，而在昆虫和脊椎动物中，通常有三个或更多拷贝RUNX。在包括人类在内的哺乳动物中，该家族由称为RUNX1、RUNX2和RUNX3的三个成员编码，每个 RUNX 的表达水平在组织之间有所不同 [ [ 5 , 7 ] ]。在恶性组织中也观察到RUNX因子的异常表达。根据具体情况，有证据表明RUNX既可以作为肿瘤抑制因子，也可以作为 PCa 中的癌基因 。

RUNX 在前列腺癌患者和模型系统中的表达

     虽然所有 RUNX 家族转录因子都存在于正常前列腺组织中，但随着疾病的进展，每个 RUNX 蛋白在 PCa 中的表达不同 [ [ 7 ] ]（图 1）。RUNX1 以 PCa 表示；然而，它的表达已被证明在高级别肿瘤中降低 [ [ 10 ] ]。RUNX2 也在 PCa 中表达，其表达在转移性 PCa 中增加 [ [ 11 ] ]。RUNX2 的异常高水平也与肿瘤分期和转移潜能呈正相关 [ [ 12 ]]。有趣的是，在患有转移性去势抵抗性前列腺癌 (CRPC) 的男性中，RUNX2 经常显示循环肿瘤细胞 (CTC) 的拷贝丢失 [ [ 13 ] ]。相反， RUNX3 表达式在 PCa [ [ 14 ] ] 中丢失。RUNX3 的缺失与肿瘤进展阶段的增加相关。PCa 中 RUNX3 的低表达与肿瘤邻近的正常前列腺组织中 RUNX3 蛋白的高表达相关，表达水平差异高达 20% [ [ 14 ] ]。因此，每个 RUNX 转录因子的表达在 PCa 进展过程中发生改变。RUNX 蛋白都具有相同的 DNA 结合特异性 [ [ 15 ]]。因此，在 PCa 进展过程中 RUNX 蛋白的差异丢失和过表达开启了由任何一种 RUNX 蛋白调节的基因表达程序发生变化的可能性。例如，RUNX1 现在可能与通常由 RUNX3 占据的基因组位点结合。

图。1

RUNX1、RUNX2 和 RUNX3 在前列腺癌进展过程中的表达。RUNX1 表达在高级别肿瘤中降低。RUNX2 表达在肿瘤中与正常相比增加，在高级别肿瘤中与低级别相比。RUNX3 表达在进展为前列腺癌期间丢失。BPH，良性前列腺增生；PIN，前列腺上皮内瘤变。使用 BioRender 创建。

RUNX1 和 RUNX2 表达，以及缺乏 RUNX3 表达，已在永生化 PCa 细胞系中得到证实 [ [ 7 ] ]。在 PPC1、LNCaP 和 PC3 PCa 细胞系中观察到 RUNX1 和 RUNX2 表达，但未观察到 RUNX3，而所有三个 RUNX 家族成员都存在于合并的正常前列腺样本和永生化、未转化的 267B1 细胞系中。RUNX1 在代表早期和晚期 PCa [ [ 16 ] ] 的细胞系中表达，并且在小鼠前列腺的转基因腺癌 (TRAMP) [ [ 17 ] ]中高度上调。PCa 细胞系中的 RUNX2 表达是可变的，并且与癌症进展的阶段相关 [ [ 18] ]。侵入性和转移性细胞系显示出比非侵入性细胞系更高的 RUNX2 蛋白水平的趋势。RUNX2 蛋白在 10 个 PCa 标本和来自相同组织切片的大多数未受累腺体的基底细胞和腔细胞中检测到。与非侵入性 PC-3 细胞系和 LNCaP 及其三个亚系 C4、C4-2、和 C4-2B [ [ 18 ]]。RT-qPCR 和蛋白质印迹的进一步分析证实，与其他 PCa 细胞系（LNCaP、C4-2B 和 RWPE）相比，RUNX2 的最高表达在转移性 PC-3 细胞中。此外，在胫骨内转移模型中，高 RUNX2 水平通常与大肿瘤的发展有关 [ [ 19 ] ]。引人注目的是，在永生化的 267B1 细胞系和合并的正常前列腺样本中观察到 RUNX3 表达，但在任何测试的 PCa 细胞系中均未观察到 [ [ 7 ] ]。总之，RUNX1 和 RUNX2 表达升高，而 RUNX3 表达在 PCa 进展过程中丢失。

RUNX 本地化

PCa 细胞中的 RUNX2 免疫染色可以是细胞核和细胞质，这表明 RUNX2 蛋白在稳定状态下存在明显定位的亚群 [ [ 18 ] ]（图 2）。此外，免疫染色显示 RUNX2 核和细胞质穿梭，其中 RUNX 与细胞质中的微管结合 [ [ 11 , 20 ] ]。在更多的转移性 PCa 细胞系（PC3 和 C4-2B）中，RUNX2 定位主要是核 [ [ 18 , 21 ]]。相反，在 LNCaP 细胞中观察到弥漫性细胞质和核分布。用抗 S319-磷酸-RUNX2 特异性抗体染色表明，核 P-S319-RUNX2 染色的强度与 PCa 线的转移潜能相关 [ [ 21 ] ]。在高度转移性 PC3 细胞中观察到最强的染色，其次是 C4-2B，然后是非转移性 LNCaP 细胞。有趣的是，RUNX3 定位受胃癌和乳腺癌中的磷酸化调节，其中 c-src 在多个酪氨酸位点磷酸化 RUNX3 [ [ 22 ]]，因此，问题仍然是 RUNX2 磷酸化是否调节其细胞定位。PCa 细胞的核 RUNX2 水平高于良性前列腺增生 (BPH) 和高级别前列腺上皮内瘤变 (PIN) [ [ 23 ] ]。此外，非转移性 LNCaP 细胞表现出相当多的 RUNX2 [ [ 21 ] ] 细胞质染色。具有较高核 RUNX2 水平的患者样本与较高的 Gleason 评分、区域扩散和淋巴结转移相关 [ [ 21 , 23 ] ]。这表明在更晚期的前列腺肿瘤中 RUNX2 的转录活性有所增加。

图 2

RUNX2 在前列腺癌进展过程中的定位和表达。在癌症进展过程中，RUNX2 表达增加并变得更具核性。RUNX3 磷酸化可以驱动细胞质定位，提高了 RUNX2 亚细胞定位也受翻译后修饰调节的可能性。使用 BioRender 创建。

RUNX 蛋白的致癌和抑癌作用

正如各种研究报告的那样，RUNX 蛋白可以作为肿瘤抑制因子或癌基因，具体取决于细胞环境 [ [ 24 ] ]。建议在癌症早期降低 RUNX 表达水平，通过促进细胞生长、携带癌症起始突变、损害 DNA 修复、促进基因组不稳定性或阻止干细胞/祖细胞室的退出，在促进癌症发展中发挥作用。在晚期 PCa 阶段，RUNX 基因活性促进细胞生长和转移潜能 [ [ 25 ]]。所有三个 RUNX 家族成员都表现出肿瘤抑制生物学。据报道，低水平的 RUNX1 表达与患者因更具侵袭性和侵袭性疾病而导致的较短生存期相关 [ [ 26 ] ]。在 PCa 的早期阶段，据报道 RUNX2 具有肿瘤抑制作用。然而，当 RUNX2 将其功能转换为癌基因时，这种作用在 PCa 的后期阶段发生了显着变化。与 RUNX1 不同，有人提出 RUNX2 表达升高与 Gleason 分级增加相关，从而缩短复发时间并降低存活率 [ [ 26 ] ]。鉴于 RUNX3 的下调与肿瘤生长有关，RUNX3 可能是一种肿瘤抑制因子 [ [ 27] ]。RUNX 蛋白作为癌基因或肿瘤抑制因子的作用因 RUNX 蛋白的共享 DNA 结合基序而变得复杂，从而创造了一种可能性，即一个 RUNX 成员可以替代和调节通常由另一个 RUNX 成员蛋白调节的基因。

RUNX 蛋白的调节

在 TRAMP 小鼠模型中，对富含与 RUNX1 和 RUNX2 相互作用的基因的通路进行生物信息学分析，发现 PCa 信号通路具有重要意义。进一步的分析缩小了对 PI3K/AKT/PTEN 通路以及细胞生长控制 (p53/p27 kip1 ) 的关注，这可能是 RUNX 调节 PCa 的潜在机制 [ [ 17 ] ]。对 TCGA 数据的查询显示，AKT 和 PI3K 基因表达与 RUNX1 和 RUNX2 [ [ 17 ] ] 呈正相关，而在 PCa 患者样本中观察到 RUNX2 蛋白的过度表达和 PTEN 蛋白的部分丢失[ [ 12 , 28 ] ] . 纯合缺失PTEN增加 RUNX2 mRNA 和蛋白质表达，表明PTEN基因剂量对于控制RUNX2基因表达至关重要 [ [ 28 ] ]。

RUNX2 过表达和 PTEN 缺失共同诱导 CXCR7 表达，从而促进 AKT 磷酸化 [ [ 28 ] ]。虽然 CXCR7 不是 PTEN 熟练细胞中 RUNX2 的典型结合靶点，但 PTEN 或 RUNX2 过表达的部分缺失允许 RUNX2 结合并促进 CXCR7 的转录及其膜重定位。这引发了一个前馈信号循环，最终导致 AKT 过度激活并促进 PCa 的发展和进展。在 PTEN-null CRPC 中，RUNX2 激活导致肿瘤内雄激素合成和肿瘤微环境 (TME) 重塑，最终增加肿瘤发生和疾病进展 [ [ 29 ] ]。

Forkhead box 蛋白 FOXO 是 PTEN 的下游效应子，是 RUNX2 的负调节因子。这种抑制受 Akt/PTEN 通路的调节 [ [ 12 ] ]。PTEN 激活增强了 FOXO1 对 RUNX2 的抑制，而组成型活性 AKT 的表达降低了 FOXO 对 RUNX2 的抑制。在用 RUNX2 和 FOXO1 共转染的细胞中，FOXO1 足以降低与转移有关的 RUNX2 靶基因的表达，包括骨桥蛋白 (OPN)、白细胞介素 (IL)-8、血管内皮生长因子 (VEGF) 和基质金属蛋白酶 (MMP)13 ，并抑制 RUNX2 诱导的迁移。当 FOXO1 被敲低时，IL-8 和 VEGF 的表达增加，进一步支持 FOXO1 负调节 RUNX2 及其下游靶点的假设 [ [12 ] ]。

另一种 AKT 通路效应子，zeste 同源物 2 (EZH2) 的增强子，通过组蛋白修饰负调节 RUNX3，特别是通过RUNX3 启动子上的 H3-Lys 27的甲基化 [ [ 30 ] ]。在 PCa 中，EZH2 表达与病理状态有关 [ [ 31 ]]。与对照相比，EZH2 敲低导致五种癌细胞类型（胃癌、乳腺癌、前列腺癌、结肠癌和胰腺癌）的细胞核和细胞质 RUNX3 染色增加，增殖减少。此外，通过 AR 介导的卵巢颗粒细胞转录使 EZH2 失活导致 miR-101 表达的诱导，然后靶向 EZH2 导致 H3K27me3 的更永久下降。雄激素对组蛋白修饰的调节间接调节特定基因的表达以调节卵巢功能，包括 RUNX1，EZH2 的下游靶标 [ [ 32 ] ]。

除了受 PI3K/AKT/PTEN 通路及其下游效应器的调节外，RUNX 还受其他蛋白质和生长因子的调节。PCa 细胞中升高的 MAPK 活性磷酸化 RUNX2 并刺激基因转录以增加肿瘤生长和转移 [ [ 21 ] ]。RUNX1 表达受 TGF-β1 在正常人前列腺来源的间充质干细胞 (MSC) 中的调节，RUNX1 在分化为肌成纤维细胞期间影响 TGF-β1 刺激的基因表达 [ [ 33 ]]。结缔组织生长因子 (CTGF) 通过 p300 诱导其乙酰化来减少 RUNX2 的泛素化依赖性降解并增加 RUNX2 蛋白的稳定性。然后 RUNX2 的乙酰化导致 MMPs 表达上调和 RANKL 的产生增加，RANKL 是一种破骨细胞分化因子 [ [ 34 ] ]。有趣的是，一氧化氮以浓度依赖性方式调节 RUNX2 水平 [ [ 35 ] ]。低浓度的一氧化氮足以增加 RUNX2 的表达，这可能通过增加与癌症进展相关的 RUNX2 下游靶标（VEGF、Bcl-2 和 IL-8）来促进肿瘤细胞的生长和活力。

哺乳动物核心结合因子 (CBF) 是一种转录因子，由 RUNX1、RUNX2 或 RUNX3 之一和非 DNA 结合蛋白核心结合因子亚基 β (CBFβ) [ [ 36 ] ] 组成。CBFβ的敲低导致卵巢和前列腺肿瘤细胞的锚定非依赖性生长减少和体外肿瘤生长延迟。CBFβ 敲低还导致 200 个基因的差异表达，其中 20% 具有推定的 RUNX 结合位点 [ [ 37 ] ]。总之，这些数据表明 RUNX 和 CBFβ 协同作用以促进卵巢和前列腺肿瘤的肿瘤发生 [ [ 37 ] ]。

在 TRAMP 小鼠模型的肿瘤发生和早期疾病进展过程中，当 RUNX1 和 RUNX2 表达增加时，靶向 RUNX1 和 RUNX2 的 microRNA (miRNA) 会发生失调 [ [ 17 ] ]。miRNA 是小的非编码单链 RNA 分子，在 RNA 沉默和基因表达的转录后调节中起作用 [ [ 38 ] ]。miRNA 已被认为是 PCa 和其他癌症类型中的潜在生物标志物，并且已被鉴定为具有治疗潜力 [ [ 39 ] ]。在患者中也观察到 RUNX 家族的表达与其靶向 miRNA 之间的反比关系 [ [ 27 ]]。与 BPH 患者相比，miR-301a 在 Gleason 6 或 7 前列腺腺癌患者的血清和组织中高度表达，而 miR-301a 靶向的 RUNX3 在这些组织样本中不存在 [ [ 27 ] ]。miR-466 和 miR - 141 在 PCa 中下调，其靶标 RUNX1 和RUNX2高度表达 [ [ 37-39 ] ]。

microRNA 通过直接结合 RUNX 的 3'-UTR [ [ [ 27 , 40 , 41 ] ] 来靶向 RUNX 家族成员。靶向 miRNA 的过表达会影响 RUNX 家族蛋白活性和 mRNA 表达，以及下游靶点的表达和 RUNX 相关的细胞过程。在 PCa 细胞系中，lncRNA TUC338 靶向 miR-466 上调 RUNX2 mRNA 和蛋白质，进而促进迁移和侵袭[ [ 40 ] ]。然而，miR-466 的过表达克服了 TUC338 对 RUNX2 的影响 [ [ 40 ]] 并降低 RUNX2 下游靶基因的表达，包括血管生成素 1 和血管生成素 3、基质金属蛋白酶 (MMP)11、OPN 和骨钙素 (OC) [ [ 42 ] ]。同样，靶向 RUNX1 的 miR-141 的上调可减少癌细胞增殖并诱导促凋亡因子增加，例如 FOXO 和 p21 [ [ 41 ] ]。MMP2 和 MMP9 水平随着 miR-141 上调而降低，从而抑制细胞迁移和侵袭。在高度转移性 PCa 细胞系 DU145 中，miR-301a 的过表达抑制 RUNX3 的肿瘤抑制功能，导致 RUNX3 蛋白减少和细胞活力增加 [ [ 27 ]]。RUNX3 还被 miR-301a-33p 靶向，这会增加 PCa 细胞的增殖和侵袭 [ [ 43 ] ]。

RUNX 调节参与前列腺癌转移和细胞侵袭的基因

RUNX转录因子家族在 PCa 中的一个主要作用是它们对 MMPs 的调节[ [ 19,44,45 ] ]。为了逃离原发性肿瘤部位，癌细胞必须破坏细胞外基质。一系列降解细胞外基质的酶（如 MMP）促进了转移事件。MMP 是调节细胞迁移和细胞外基质重塑的内肽酶，在成骨细胞和破骨细胞中均有表达 [ [ 46 ] ]。在 PCa 中，MMP9 已被证明是一个关键的转移因子 [ [ 44 ]]。在具有低内源性 MMP9 水平的 PCa 细胞中，即 PC3-L 和 LNCaP 细胞中，RUNX2 显着诱导 MMP9 的表达 [ [ 19 , 45 ] ]。在 PC3 细胞中，内源性 MMP9 表达与外源性 RUNX2 表达呈剂量依赖性增加 [ [ 41 , 44 ] ]。相反，在缺乏 RUNX2 的骨组织中，MMP9 表达丢失 [ [ 44 ]]。RUNX2 通过直接与 MMP9 基因上的 250 bp 启动子位点结合来特异性靶向并激活 MMP9 的转录。该启动子位点也对 RUNX1 有反应。RUNX 和 MMP9 之间的直接关系有助于 RUNX1 和 RUNX2 参与 PCa 细胞的转移和侵袭。RUNX 家族还调节与癌症转移相关的其他 MMP，如 MMP2 和 MMP13 [ [ 19 ] ]。具体来说，在 PC3 和 LNCaP 细胞中，RUNX2 的表达强烈地促进了 MMP13 的表达。此外，当 CBFβ 被击倒时，MMP3 的表达会降低，这是另一种与癌症进展相关的 MMP [ [ 37 ]]。总之，RUNX1 和 RUNX2 调节 MMPs 的表达，暗示 RUNX 参与 PCa 转移和细胞侵袭。

RUNX3 对 MMPs 的调节与 RUNX1 和 RUNX2 对立，与其作为 PCa 肿瘤抑制因子的作用一致。在正常前列腺组织和具有外源性 RUNX3 表达的 PC3 细胞中，RUNX3 上调基质金属蛋白酶 2 (TIMP-2) 的组织抑制剂，因此下调 MMP2 的表达。RUNX3 的外源表达及其对 TIMP-2/MMP2 的调节降低了转移性 PCa 细胞的迁移和侵袭行为 [ [ 14 ] ]。

骨基质蛋白构成骨的细胞外基质，并与癌症转移有关 [ [ 47 ] ]。骨基质蛋白，包括 OPN、OC 和骨唾液蛋白 (BSP)，均受 RUNX2 [ [ 19 ] ] 的调节。在 PC3 和 LNCaP 细胞中，RUNX2 的表达显着上调 OPN 的表达。这种效应在具有很少或没有内源性 RUNX2 和低水平内源性 OPN 的 PC3-L 和 LNCaP 细胞中尤其显着，表明 RUNX2 激活了 OPN 的表达。RUNX2 对 OPN 的调节可见于 mRNA 和蛋白质水平 [ [ 45 ]]。在 C4-2B 细胞中，RUNX2 的表达刺激 BSP 的转录；RUNX2 敲低导致 BSP 基因失活，而外源 RUNX2 表达强烈增加 BSP mRNA 水平 [ [ 48 ] ]。RUNX 转录因子是 PCa 向骨转移过程中骨基质蛋白的关键调节因子。

在 PCa 中，RUNX2 调节 VEGF。VEGF 是正常骨骼发育和肿瘤形成过程中血管生成的关键调节因子 [ [ 48 ] ]，并且已知通过促进肿瘤生长和存活来增强溶骨和成骨细胞疾病 [ [ 19 ] ]。在 PC3 细胞中敲低 RUNX2 后，VEGF mRNA 水平显着降低 [ [ 19 , 44 ] ]。相反，RUNX2 的过表达导致 VEGF 的上调 [ [ 48 ] ]。与 RUNX3 对 MMP 表达的抑制类似，VEGF 也同样被 RUNX3 抑制。当 RUNX3 在 PC3 和 DU-145 PCa 细胞中过表达时，VEGF 分泌显着减少 [[ 14 ] ]。因此，RUNX 转录因子通过调节 VEGF 在 PCa 肿瘤的血管化中发挥作用。

RUNX2 调节参与分泌途径的蛋白质。具体来说，RUNX2 调节构成异源三聚层粘连蛋白 511 [ [ 49 ] ] 的蛋白质的分泌。在 PCa 中，层粘连蛋白 511 参与转移和癌症侵袭性，并与整合素信号传导的激活有关。层粘连蛋白 511 由三个亚基组成：层粘连蛋白 α5 (LAMA5)、β1 (LAMB1) 和 γ1 (LAMC1)。在 C4-2B 细胞中，RUNX2 显着增加了 LAMA5 和 LAMB1 的分泌。鉴于 RUNX2 上调了层粘连蛋白 511 的三种成分中的两种，很可能 RUNX2 调节其组装 [ [ 49 ] ]。

RUNX 转录因子调节 IL-8 和 IL-11。IL-8 是一种已知可促进骨吸收和诱导破骨细胞活性的趋化因子 [ [ 19 ] ]，此外还具有募集中性粒细胞的公认作用 [ [ 50 ] ]。在 RUNX2 高表达的 PC3 细胞中，IL-8 的水平也同样高，而 RUNX2 低表达的 PC3 细胞显示 IL-8 的低表达。为了进一步将 RUNX2 与 IL-8 的调节联系起来，在 PC3 细胞中敲低 RUNX2 几乎完全消除了 IL-8 的表达 [ [ 19 ] ]。IL-11 在炎症、侵袭和骨转移中发挥作用，并调节 PCa 细胞中的溶骨基因，如 RANKL 和 PTHrP [ [ 51] ]。RUNX2 与 SMAD 和 TGFβ1 复合，协同上调 PC3 细胞中 IL-11 的表达。IL-11 启动子具有 RUNX2 和 SMAD 结合元件，暗示该复合物直接调节 IL-11。此外，RUNX2 与 c-Jun 形成核复合物，这也正向诱导 IL-11 表达。C-Jun 结合 IL-11 启动子的近端和远端区域，但当 RUNX2 被敲低且 c-Jun 表达仍然很高时，IL-11 表达降低。通过调节已知的转移和溶骨性疾病标志物 IL-8 和 IL-11，以及几类转移基因，RUNX 与 PCa 的溶骨病理学有关 [ [ 51 ] ]。

最后，RUNX1 和 RUNX2 在前列腺特异性抗原 (PSA) 的调节中发挥作用，这在 PCa 的临床诊断中具有重要意义[ [ 7 ] ]。在 PSA 调节区域中有四个共有位点，RUNX1 通过 runt 同源域结合。当使用含有 PSA 上游控制区 (7PSA-Luc) 的荧光素酶报告基因时，RUNX1 表达与 PC3 细胞中报告基因活性的适度剂量依赖性增加相关，而 RUNX1 矮小结构域中的突变会阻止报告基因的激活。在 LNCaP 细胞中，内源性 RUNX1 也与 PSA 调节区结合。值得注意的是，当 RUNX1 和 RUNX2 与前列腺衍生的 Ets 因子 (PDEF) 共表达时，7PSA-Luc 报告基因被高度激活 [ [ 7 ]]。RUNX1 和 Ets-1 激活基因转录的直接协同结合是通过它们的 DNA 结合结构域和 RUNX1 的自抑制结构域 NRDB（以前称为 AML1）和 Ets-1 的外显子 VII [ [ 52 ] ]。

RUNX 调节参与细胞凋亡、细胞周期和 DNA 损伤反应的基因

癌细胞的一个标志是能够通过改变凋亡基因的表达来逃避细胞死亡[ [ 53 , 54 ] ]。Survivin 是一种细胞凋亡蛋白抑制剂，在包括 PCa 在内的几种不同类型的癌症中过度表达 [ [ 55 ] ]。RUNX2 通过直接结合区域 I 或 II 的 survivin 启动子来正向调节 survivin 表达，具体取决于细胞环境。通过敲低或抑制降低 RUNX2 表达会降低 survivin 表达。此外，RUNX2 沉默显示出与 survivin 沉默相似的细胞凋亡水平 [ [ 56 ] ]。因此，RUNX2 与 PCa 细胞凋亡的调节密切相关。

RUNX1 和 RUNX2 也是细胞周期的重要调节剂。p21、p27 和 p57 是细胞周期蛋白依赖性激酶 (CDK) 抑制剂，可在整个细胞周期中调节检查点控制。RUNX1参与细胞周期基因p21 WAF1/CIP1的调控[ [ 57 ] ]。此外，在具有高水平 cyclin D1（在 RUNX2 降解中起作用）的 PC3B 细胞中，p57 表达水平升高。相比之下，具有低水平细胞周期蛋白 D1 的 PC3A 细胞显示 RUNX2 表达增加而 p57 表达减少。此外，具有较低 RUNX2 表达的 LNCaP 和 C4-2B 具有较高水平的 p27 和 p21 [ [ 58 ]]。这些数据表明 RUNX1 和 RUNX2 是细胞周期失调的重要因素。

众所周知，DNA 损伤反应 (DDR) 失调会导致癌症进展 [ [ 55 , 56 ]]。RUNX2 与 DDR 相关基因的调节有关，即 RUVBL2、INTS3 和 BAZ1B。这些蛋白质直接与 RUNX2 的 DNA 结合 runt 同源域相互作用。RUVBL2、INTS3 和 BAZ1B 参与细胞对 DNA 损伤的反应，通过 RUVBL2-INTS3 网络或 BAZ1B 网络与组蛋白 H2AX 相连。BAZ1B 是一种蛋白激酶，可磷酸化 H2AX 上的 Tyr142。Ser139 (γ-H2AX) 的 H2AX 磷酸化是 DDR 中的关键，因为它会募集 DNA 损伤修复机制。BAZ1B 对 Tyr142 的磷酸化抑制 Ser139 的磷酸化并导致细胞凋亡。这两个位点之间的磷酸化平衡了响应 DNA 损伤的细胞死亡和细胞存活。在 RUNX2 敲低后，Tyr142 的磷酸化增加。由于 BAZ1B 直接与 RUNX2 相互作用，RUNX2 可能结合并抑制 H2AX Tyr142 的 BAZ1B 磷酸化。因此，RUNX2 对 BAZ1B 的调节破坏了 H2AX 的正常激活及其在调节细胞凋亡和 DDR 中的作用。[ 55 ] ]。

如前所述，EZH2 是一种组蛋白-赖氨酸 N-甲基转移酶，参与转录抑制和 RUNX 调节 [ [ 10 ] ]。EZH2 表达也受 RUNX1 [ [ 59 ] ] 的调节，这表明 EZH2 和 RUNX1 可能存在反馈回路。然而，需要进一步的研究来建立这种反馈回路的机制。

RUNX2 调节成骨细胞分化、肿瘤微环境和转移性前列腺癌

转移性 PCa 生长迅速，并有转移到骨的趋势。这种对骨骼的偏好尚不完全清楚，但有证据表明 RUNX2 可能在这种组织嗜性中起作用（图 3）。RUNX2 参与骨成熟、成骨细胞分化和骨相关蛋白的调节[ [ 18 , 60-62 ] ]。RUNX2 与成骨细胞特异性顺式作用元件 (OSE2)结合并形成复合物， OSE2 存在于 PCa 细胞系 PC3 的骨钙素启动子中 [ [ 18 , 63 ]]。鉴于 RUNX2 在侵袭性 PCa 肿瘤细胞中的表达较高，并且RUNX2促进成骨细胞活性和骨重塑，RUNX2似乎是 PCa 转移进展和骨转移的驱动因素[ [ 18,19,60,61 ] ]。

图 3

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研究表明，RUNX 调节的前列腺癌细胞变化创造了一个更有利于骨转移的骨肿瘤微环境。RUNX 蛋白可能驱动 PCa 转移进展和骨转移。RUNX1 和 RUNX2 通过调节 MMP、VEGF、骨桥蛋白和骨钙素促进成骨细胞活性和骨重塑，并可驱动 EMT、血管生成和骨重塑。使用 BioRender 创建。

RUNX2 在控制骨代谢中起重要作用，可能与 PCa 骨转移导致骨重塑的能力有关，主要通过上调骨相关基因 [ [ 18 ] ]。研究表明，RUNX2 在 PCa 细胞中的表达可能会引发人前列腺组织和细胞系中骨特异性基因的不适当表达 [ [ 12 , 17 ] ]。RUNX2 通过调节与侵袭、转移、粘附、溶骨性骨病和骨重塑有关的基因参与了肿瘤环境的改变 [ [ 18 , 19 ]]。此外，RUNX2 在成骨细胞中上调，以响应骨微环境中的 PCa 细胞 [ [ 64 ] ]。如前所述 [ [ 19 ] ]，在 PC3 细胞中，RUNX2 促进 PCa 细胞的侵袭并增加转移基因的表达。RUNX1 和 RUNX2 都通过正向调节参与内皮-间质转化 (EMT)、血管生成和细胞外基质降解的转移基因来改变骨微环境 [ [ 19 , 29 ] ]。这些研究表明 RUNX 调节的 PCa 细胞变化创造了一个更有利于骨转移的骨微环境。

已经表明，CBFβ 是 RUNX2 调节的骨发育所必需的，因为 CBFβ 通过直接相互作用有助于稳定 RUNX2 [ [ 37 , 65 ] ]。在体外，CBFβ 的敲除会显着降低前列腺和卵巢癌细胞系以不依赖锚定的方式生长的能力 [ [ 37 ]]。此外，与恶性肿瘤有关的基因发生了显着改变，包括 EMT 促进蛋白 MMP3 的减少和与肿瘤抑制因子有关的 cadherin-13 的增加。这些结果表明，CBFβ 表达对于不依赖锚定的细胞生长是必需的，并且在前列腺和卵巢癌细胞的恶性肿瘤和肿瘤发生中发挥作用。鉴于 CBFβ 增强了 RUNX2 介导的骨发育调节，并且在 PCa 中发现了高 RUNX2 表达，RUNX2 与 PCa EMT 有关。

RUNX 蛋白也参与基质微环境的调节 [ [ 29 , 33 ] ]。反应性基质的发展和基质微环境的改变在 TME 和癌症进展中起重要作用。特别是，基质微环境的硬化允许增加肿瘤细胞的侵袭[ [ 29 , 66 ] ]。研究表明，RUNX2 在重塑 TME 中发挥作用，特别是在 PTEN-null 肿瘤中 [ [ 29 ]]。野生型小鼠具有非常低水平的 RUNX2 和高度浓缩的 SMA 阳性基质层，这是抵抗肿瘤侵袭的天然屏障。PTEN-null 小鼠的 RUNX2 表达比野生型小鼠高得多，具有多层胶原蛋白和小肌肉纤维和更松散的 SMA 阳性基质层 [ [ 29 , 56 ]]。然而，在 RUNX2/PTEN 双敲除小鼠中，这一观察结果被逆转，存在多层 SMA 阳性基质，这表明 RUNX2 在调节 PTEN 缺失诱导的基质微环境重塑中很重要。RUNX2 敲除降低了小鼠 PTEN-null 肿瘤中的 MMP9，这可能解释了 RUNX2 对 TME 重塑的影响，特别是在基质微环境方面[ [ 29 ] ]。研究还表明 RUNX1 通过其在间充质干细胞增殖和分化中的作用参与反应性基质的发育。RUNX1 是间充质干细胞增殖和分化成肌成纤维细胞所必需的 [ [ 33 ]]。肌成纤维细胞是反应性基质的关键成分，存在于肿瘤微环境中并促进肿瘤发生 [ [ 67 ] ]。RUNX1 阻止肌成纤维细胞的完全分化，从而促进肌成纤维细胞的积累和反应性基质的发育 [ [ 33 ] ]。因此，高水平的 RUNX2 和 RUNX1 有助于通过重塑基质微环境和促进反应性基质发育来介导肿瘤细胞侵袭。

体内小鼠模型表明 RUNX2 是溶骨性骨病发展所必需的 [ [ 19 , 68 ] ]。股骨内注射 PCa 细胞系 MDA PCa 2b 和 PC3 的小鼠分别发展成成骨细胞和破骨细胞病变。此外，将 MDA PCa 2a 和 2b 细胞与原代小鼠成骨细胞共培养会导致 RUNX2 和 OC 表达上调，诱导成骨细胞分化，并形成成骨细胞病变 [ [ 68 ] ]。根据 RUNX2 表达，PC3 细胞可分为 3 个亚系：PC3-H（RUNX2 高表达）、PC3-M（RUNX2 中表达）和 PC3-L（RUNX2 低表达）[ [ 18 ] ]。在体内，与 PC3-L 相比，PC3 细胞（PC3-H 和 PC3-M）中较高的 RUNX2 表达与小鼠胫骨溶骨性骨病的显着增加呈正相关 [ [ 19 ] ]。RUNX2 表达与溶骨性骨病之间不仅存在正相关，而且还表明 RUNX2 是体内溶骨性骨病变发展所必需的。

RUNX2 在 PCa 中上调并介导 PCa 和骨转移中骨相关因子的表达。PCa 晚期 RUNX2 水平升高通过正向调节参与骨重塑的基因、修饰 TME 和促进成骨细胞和溶骨性病变的形成而导致转移性骨病。越来越多的研究表明 TME 在 PCa 进展和治疗中的重要作用。鉴于 RUNX2 在骨重塑和改变肿瘤微环境中的作用，RUNX2 是转移性 PCa 患者的一个有希望的治疗靶点。

RUNX 和 AR 之间的直接相互作用促进了前列腺癌的病理学

雄激素受体 (AR) 是一种核转录因子和类固醇激素受体，可调节雄激素的活性：睾酮和二氢睾酮 (DHT) [ [ 69 ] ]。AR 是 PCa 进展为致死性转移性 CRPC 的关键调节因子。如前所述，RUNX 家族转录因子也是参与 PCa 转移和溶骨性疾病进展的几个基因的关键调节因子。鉴于这两种蛋白质都有助于转移性 PCa 的进展，研究已经检查了 RUNX 蛋白和 AR 在雄激素信号传导和去势抵抗背景下的相互作用。

RUNX 和 AR 在 PCa 中直接相互作用并相互调节转录 [ [ 10 ]]。在 RUNX1 位点附近，在转录起始位点下游 50 kb 和上游 200 kb 处有一个强大的 AR 结合位点 (ARBS)。在 293T 细胞中，外源性 AR 通过 RUNX1 的 N 端区域以配体依赖性方式与 RUNX1 相互作用。当 N 末端结构域被删除时，这种相互作用会减少。在 LNCaP 细胞中，内源性 AR 和 RUNX1 之间存在类似的相互作用。此外，ARBS 和 RUNX1 结合位点之间存在显着重叠，并且 RUNX1 向其代表性 ARBS 的募集是由雄激素介导的。或者，在人附睾细胞 (HEE) 细胞中，发现 RUNX1 在 AR 峰附近结合。然而，这种结合不依赖于雄激素的激活，这表明在这些细胞中，RUNX1 结合先于 AR [ [ 70 ]]。

与 RUNX1 一样，RUNX2 也直接与 AR 关联。在内源性表达 AR 的 LNCaP 细胞中，含有 RUNX2 抗体的免疫沉淀物富含 AR，表明 AR 和 RUNX2 相互作用 [ [ 58 ] ]。作为相互作用的进一步证据，RUNX2 和 AR 在用 DHT 治疗后也会在细胞核中共定位 [ [ 71 , 72 ] ]。RUNX2 和 AR 在 AR DNA 结合域 (AR-DBD) 发生物理相互作用。使用 GST 下拉分析，RUNX2 将仅与完整的 AR-DBD（氨基酸 540-647）结合，而不是单个氨基酸残基或单个锌指。此外，AR-DBD 中的突变阻止了结合，这表明 RUNX2-AR 结合依赖于完整的 AR-DBD [ [ 71 ]]。在三个 RUNX2 结构域中，runt 结构域、谷氨酰胺-丙氨酸 (QA) 结构域和脯氨酸-丝氨酸-苏氨酸 (PST) 结构域、runt 结构域和 C 末端 (aa 464-596) PST 结构域就足够了用于 AR-DBD 绑定。

RUNX 和 AR 之间的直接相互作用通过调节雄激素诱导型和 AR 靶基因在雄激素信号传导中发挥重要作用。如前所述，ARBS 和 RUNX1 结合位点之间存在重叠。在 LNCaP 和 VCaP 细胞中敲低 RUNX1 后，AR 结合和 ChIP-seq 确定的显着 ARBS 数量减少。此外，RUNX1 的敲低会抑制雄激素诱导基因的雄激素反应性，并抑制雄激素介导的基因和 AR 转录活性 [ [ 10 ]]。RUNX2 和 AR 通过 RUNX2 将 AR 募集到增强子元件，协同刺激某些 AR 靶基因的表达。具体来说，催乳素诱导蛋白 (PIP) 是一种在 PCa 中上调的 AR 靶基因，对雄激素高度敏感。在转录起始位点的上游，有 RUNX2 和 AR 结合基序。在存在 RUNX2 的情况下，AR 的募集显着增加，这可能是 PIP 在 PCa 中协同上调的原因。此外，在 T47D 细胞中，这种 PIP 的上调以前馈方式起作用，调节其他 AR 靶基因的雄激素反应。PIP 的敲除显着降低了几个 AR 靶基因的 DHT 反应，例如 FKBP5、PSA、FASN 和 SGK [ [ 73 ]]。更直接地，当与 PTEN 共删除 RUNX2 时，会导致其他 AR 靶基因的表达显着降低，例如 Probasin、NKX3.1 和 TMPRSS2 [ [ 29 ] ]。RUNX2 和 AR 之间协同作用的另一个强有力的例子是 SNAI2 的调节。DHT 对 RUNX2 和 AR 的共激活强烈且协同地刺激 C42B、LNCaP 和 22Rv1 细胞中的 SNAI2 转录 [ [ 72 ] ]。由于 AR-RUNX 直接相互作用，复合物与 SNAI2 增强子区域结合。总之，RUNX 和 AR 之间的直接相互作用以及 RUNX 在 AR 募集到其靶基因中的作用在雄激素信号传导中起重要作用。

尽管 RUNX-AR 相互作用对雄激素信号传导具有看似积极的作用，但 RUNX 和 AR 之间的相互作用也与某些系统中 AR 和 RUNX 的转录沉默有关。在研究 HEK293T 细胞中雄激素不敏感综合征的机制时观察到，RUNX1 过表达通过与 AR CpG5-7 启动子结合来降低 AR mRNA [ [ 74 ] ]。此外，在 DHT 存在的情况下，当与 AR 结合时，COS7 细胞中 RUNX2 向 DNA 的募集受到抑制 [ [ 71 ]]。一种假设是AR和RUNX2之间的物理关联涉及RUNX2的runt域；然后 AR 会阻止 RUNX2 与 DNA 结合，因为 runt 域参与 DNA 结合。然而，很明显，前面描述的大量证据表明 RUNX 和 AR 对许多基因的协同正向调节。

RUNX 和 AR 结合的不同影响可能与上下文有关。在 AR 依赖性 PCa 中，RUNX1 缺失与癌细胞增殖减少有关，但在 AR 非依赖性 PCa 中，RUNX1 缺失与癌细胞增殖增加有关。RUNX1 丢失后细胞增殖的这种增加反过来与预后不良和较高的 Gleason 评分相关 [ [ 10 ]]。此外，RUNX2 对基因表达有不同的影响，抑制或进一步刺激 DHT 刺激的基因，这种抑制或刺激在不同的细胞系中或多或少常见。在 LNCaP 和 C42B 细胞中，RUNX2 抑制 DHT 刺激的基因更为常见，而在 22Rv1 细胞中，RUNX2 增加 DHT 刺激的基因表达更为常见。RUNX1 和 RUNX2 更有可能增强 CRPC 中 DHT 激活的基因。例如，通过 RUNX2-AR 相互作用对 SNAI2 的正向调节会增加肿瘤的侵袭性和复发率 [ [ 72 ]]。与用 RUNX1 观察到的趋势相似，随着 PCa 从雄激素依赖性 PCa 发展为 CRPC，RUNX2-AR 相互作用的作用可能从抑制变为促进侵袭性 PCa 表型。需要进一步的研究来阐明 RUNX 在雄激素信号传导、PCa 进展和与 AR 相互作用中作为转录激活剂与转录沉默剂的作用机制和背景。

RUNX 临床潜力——生物标志物和治疗靶点

迫切需要更有效和持久的 PCa 治疗。PCa 的发展、进展和复发依赖于 AR，这导致使用抗雄激素疗法来减少内源性类固醇激素的产生，以及使用 AR 拮抗剂。转录因子通常作为恶性肿瘤的关键调节因子发挥作用，因此是癌症治疗特别有吸引力的靶标。转录因子的活性水平通过多种机制在多种癌症中发生变化，使其成为抗癌药物开发的目标 [ [ 75 ]]。AR 拮抗剂以及其他配体激活的类固醇受体的拮抗剂在靶向转录因子方面取得了早期成功。然而，转录因子并不单独起作用。相反，它们在需要靶向细胞内蛋白质-蛋白质或蛋白质-DNA相互作用来破坏的大型多蛋白组装的背景下发挥作用。由于相互作用表面的性质和组件的复杂性，靶向这些相互作用比靶向酶活性更具挑战性。因此，有人提出转录因子是“不可下药的”。即使转录因子被成功靶向，药物反应也并不总是持久的。例如，几乎所有接受雄激素剥夺治疗 (ADT) 的 PCa 患者都会产生耐药性，进而发展为 CRPC [[ 3 ] ]。

鉴于本文描述的数据，直接在 PCa 中靶向 RUNX 是一种有前途的方法。迄今为止描述的最具选择性的 RUNX 抑制剂是一类新的小分子变构抑制剂，其靶向异二聚 CBF 转录因子，特别是 CBFβ 和 RUNX 之间的蛋白质-蛋白质相互作用 [ [ 76 ] ]。这些化合物可以影响多种癌症中的细胞存活和分化[ [ 76-78 ] ]。虽然这些化合物的数据很有希望，但需要做更多的工作来确定 RUNX 抑制剂作为 PCa 的有效治疗方法。

抑制 RUNX 的其他努力是间接的。化合物 FYT720 对 RUNX2 水平有间接的负面影响，并且 RUNX2 水平影响 PCa 细胞对 FYT720 的反应 [ [ 23 ]]。RUNX2 的敲低使 PCa 细胞对 FYT720 敏感，而 RUNX2 的过表达赋予对 FYT720 作用的抗性，表明 FYT720 通过另一种机制而不是直接抑制 RUNX 发挥作用。这表明 RUNX2 可能在调节某些癌症疗法的有效性中发挥作用，并表明 RUNX 抑制与其他癌症驱动因素结合将是有效的。抑制 RUNX 的其他间接方法包括靶向 RUNX 的调节剂。该方法包括使用 PI3K-Akt 信号传导抑制剂，因为 PTEN 基因剂量对于控制 RUNX2 基因表达至关重要 [ [ 28 ] ] 并且 MAPK 在 S319 上磷酸化 RUNX2 [ [ 21 ]] 导致 RUNX2 激活。这些途径的抑制剂已获得临床批准，但尚未对其调节 PCa 中 RUNX 活性的能力进行测试。

递送靶向 RUNX 的 shRNA 或调节 RUNX 的 miRNA 是一种可能的治疗方法。miR-466可以通过结合3'-UTR[ [ 42 ] ]降低RUNX2，miR-466再表达降低RUNX2靶基因的表达。因此，也可以探索引入 miR-466 来治疗 PCa。然而，应该注意的是，miRNA 或其他核酸疗法的有效临床递送存在相当大的障碍，尽管已经取得了重大进展并且有批准的核苷酸疗法[ [ 79-81 ] ]。

有证据表明 RUNX2 可能是 PCa 骨转移的生物标志物。免疫组化染色显示，与BPH和PIN相比，PCa细胞核内RUNX2含量较高，细胞核内RUNX2含量与Gleason评分和较高的PSA水平呈正相关[ [ 23 ] ]。总之，这表明细胞核中的 RUNX2 水平可能是 PCa 预后的指标。RUNX 的翻译后修饰可以进一步提供 RUNX 活性的证据，并可用作生物标志物。RUNX2 磷酸化刺激与肿瘤生长、转移、迁移和侵袭相关的其他基因的转录。MAPK 在 PCa 中升高 [ [ 82 ]]，这种酶磷酸化 RUNX2。使用 S319-phospho-RUNX2 特异性抗体和共聚焦显微镜，晚期 PCa 细胞的 S319-phospho-RUNX2 水平升高。因此，P-S319-RUNX2 可能是患者队列中更具侵袭性疾病的有效标志物，尤其是与磷酸化 MAPK 结合时。这些研究强调了 RUNX 磷酸化作为诊断标志物的潜在价值 [ [ 21 ] ]。然而，为常规临床使用而收集的组织中磷酸化的保存是一项挑战 [ [ 83 ] ]，在没有优化样本收集协议的情况下限制了 S319-phospho-RUNX2 的效用。

虽然 RUNX2 表达作为 PCa 的生物标志物更有希望，但评估 PCa 中的 RUNX1 和 RUNX3 表达也可能提供临床见解。RUNX1 在 PCa 中的表达在 Gleason 8-10 PCa 中低于较低级别的 PCa [ [ 10 ] ]。然而，在实验系统中，RUNX1 与 AR 协同驱动生长，而在 AR 阴性细胞中，RUNX1 抑制 PCa 生长。总的来说，这些结果表明 RUNX1 可能根据 PCa 的 AR 状态发挥不同的作用，使 RUNX1 作为生物标志物或治疗靶点的任何作用复杂化。由于启动子低甲基化， RUNX3 表达在 PCa 中丢失。RUNX3 表达的减少是由表观遗传沉默引起的，这一事实表明逆转这种反应的可能性 [ [ 14 , 30 ]] ]。

结论

所有已知的 RUNX 转录因子及其异二聚化伙伴 CBFβ 都与广泛的上皮癌有关，包括 PCa [ [ 75 ]]。这表明 RUNX 蛋白是治疗癌症的潜在生物标志物和有吸引力的治疗靶点。在 PCa 中，RUNX1 表现出一种有趣且复杂的关系，取决于 AR 表达；RUNX2 显示靶基因的表达、磷酸化和水平升高；和 RUNX3 表达在进展过程中丢失，这表明肿瘤抑制活性。尽管我们对 PCa 中的 RUNX 了解很多，但仍然存在许多首要问题。不同 RUNX 家族转录因子与 AR 的相互关系尚未得到充分探索。例如：RUNX1 和 RUNX2 是否竞争绑定 AR？RUNX3 绑定 AR 吗？AR与不同RUNX成员的关联是否会导致不同基因亚群的调控？AR 翻译后修饰对 RUNX-AR 结合有何影响？当 RUNX3 表达丢失时，RUNX 1 或 RUNX2 是否替代并结合 RUNX3 基因组位点？靶向单个 RUNX 蛋白会比泛 RUNX 方法更有效吗？RUNX3 沉默和 RUNX1 在 PCa 中表达减少的机制尚不清楚。RUNX1 仍然是一个谜。有证据支持在 PCa 中作为驱动因素的作用，然而，随着 Gleason 评分的增加，RUNX1 表达明显减少。关于 RUNX 家族在 PCa 如何进化以及对治疗的反应或抵抗方面的作用，仍有许多有待发现，以及 RUNX 家族如何影响癌细胞的生物学状态，从而影响与周围 TME 的交流。令人兴奋的发现就在眼前。

Abbreviations

• AKT
• protein kinase B
• AR
• androgen receptor
• ARBS
• AR-binding site
• Bcl-2
• B-cell lymphoma 2
• BPH
• benign prostatic hyperplasia
• BSP
• bone sialoprotein
• CBF
• core-binding factor
• CBFβ
• core-binding factor subunit b
• CDK
• cyclin-dependent kinase
• CRPC
• castration-resistant prostate cancer
• CTC
• circulating tumor cell
• CTGF
• connective tissue growth factor
• DBD
• DNA-binding domain
• DDR
• DNA damage response
• DHT
• dihydrotestosterone
• EMT
• endothelial-to-mesenchymal transition
• ETS
• erythroblast transformation-specific
• EZH2
• enhancer of zeste homolog 2
• FOXO
• forkhead box protein
• FYT720
• Fingolimod
• HEE
• human epididymis
• IL
• interleukin
• LAM
• laminin
• MAPK
• mitogen-activated protein kinase
• miRNA
• microRNA
• MMPs
• matrix metalloproteinases
• OC
• osteocalcin
• OPN
• osteopontin
• PCa
• prostate cancer
• PDEF
• prostate-derived Ets factor
• PI3K
• phosphoinositide 3-kinase
• PIN
• high-grade prostatic intraepithelial neoplasia
• PIP
• prolactin-induced protein
• PSA
• prostate-specific antigen
• PTEN
• phosphatase and tensin homolog
• RANKL
• receptor activator of nuclear factor kappa-Β ligand
• RUNX
• runt-related transcription factor
• SMA
• smooth muscle antibody
• TCGA
• The Cancer Genome Atlas
• TGF-β
• transforming growth factor beta
• TIMP-2
• tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-2
• TME
• tumor microenvironment
• TRAMP
• transgenic adenocarcinoma mouse prostate
• TUC338
• transcribed ultra-conserved region 338
• VEGF
• vascular endothelial growth factor

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