蓝白斑筛选原理(pUC18质粒为例)：

反应物作用来源

β半乳糖苷酶α片段（N端）组合成完整的β半乳糖苷酶pUC18质粒(载体)中lacZ序列

β半乳糖苷酶ω片段（C端）组合成完整的β半乳糖苷酶突变型lac–E. coli

X-gal生成蓝色化合物（阴性菌落/克隆）培养基

阴性克隆：

当Lac Z 基因内无外源DNA的插入， N\C完好，表达出b-半乳糖苷酶，在含X-gal的培养基上生长会出现蓝色菌落---阴性克隆。

阳性克隆：

在Lac Z 基因内插入外源DNA后，N端被破坏，不能表达出β半乳糖苷酶α片段（N端），在含X-gal的培养基上生长会出现白色菌落---阳性克隆。

X–gal：X–gal是β–半乳糖苷酶（β–galactosidase）的底物，水解后呈蓝色。基于这个特点，pUC系列载体DNA（或其他带有lacZ基因载体DNA）以lacZ 缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体载体DNA进行转染时，如果在平板培养基中加入X–gal和IPTG，由于β–半乳糖苷酶的α–互补性，可以根据是否呈现白色菌落（或噬菌斑）而方便地挑选出基因重组体。