浆膜腔积液或液体标本细胞学涂片的制做方法

---

时间：2004-2-3 0:03:04 来源：mbw 作者：mbw 阅读2123次

    涂片的制作是关系到细胞学诊断的成败关键，传统的沉淀方法，只要认真就可以做出可供诊断的优质涂片。下面介绍一种棉球／海绵块印片法：
采集到的积液标本应及时送检，接到送检标本也应立即离心处理，以保持标本的新鲜性。标本无需加固定液和防腐剂，因为经这样处理的标本离心沉淀后因蛋白质凝固，与载玻片结合（粘着）度低，在染色过程中有可能掉片（使细胞脱离玻片），尤其在免疫细胞化学染色时更易掉片。
送检的积液标本要求量愈多愈好，一般在100ml至500ml之间为宜。将标本在阴凉处静置5分钟，轻轻倒去一半左右；若多于100ml应再次静置5分钟，弃去一半，直至50ml左右的自然沉淀标本，分别置于两个容量为50ml塑料离心管中。平衡后以2000转／分钟的速度离心5分钟左右，轻轻取出离心管至污水池中将离心管底朝上彻底倒去上清液。采用镊子夹脱脂干棉球或一小块海棉(最好还是棉球)沾取沉淀物，在玻片上轻轻印片，稍置片刻，潮干情况下置95％乙醇固定液中2小时以上，进行染色。此法的优点是因棉球将液体吸入内部，而棉球表面的大量细胞成分被印在载玻片上，其片薄而均匀，细胞数量多，结构清晰，背景干凈。该法的关键是水份极少被涂在玻片上，摒弃了过去采用吸管的方法，吸管法使过多的水份被留滞在玻片上，从而使细胞及其背景蒙上一层着色物，影响清晰度。
    这里要特别指出，以下几点是制作一张好涂片的关键：
    (1)送检标本必须抽吸后立即送检，接受标本也要立即进行处理；
    (2)标本量要求多，多涂片用于多种染色有助于确立诊断；
    (3)液体标本内不加固定剂或防腐剂；
    (4)阶梯式沉淀：自然沉淀和离心沉淀结合进行；
    (5)彻底倒去上清液，剩余水分越少越好。沉淀物不能直接放在玻片上，采用棉球或泡沫塑料等具有吸水性的物体，将沉淀物中的剩余水份吸出，其表面则为附着的细胞成分；
(6) 印片时动作要轻，印片面积及张数自定，不可用力过重；
(7) 玻片在潮湿状态下投入固定液，固定2小时以上。
涂片的数量一般在2-4张为宜，可分别做各种常规染色，若进行细胞化学染色或免疫细胞化学染色可适当多做一些涂片。经上述步骤处理的标本，也可用于电镜取材，方法是用刀片切下约一半的棉球沾取的沉淀物，但不可带棉纤维，然后装入戊二醛固定液送检。还可用细胞块做石蜡切片。