作 者：府谷县人民医院 高红红 审 核：杨占良 蔚俊霞 编 辑：高少卉
问1：PCR实验室设计的核心控制目标
控制病原污染：保证生物安全，防止病原污染操作人员和环境
控制核酸污染：保证实验质量，防止核酸污染试剂、样本、操作过程
问2：实验室需要几个功能区？
传统PCR分为四区：试剂准备区、样本制备区、核酸扩增区、产物分析区
本次新冠：
使用RT-PCR需三个区：试剂准备区、样本制备区、扩增分析区
使用一体机，需要二个区：试剂准备区、提取扩增分析区
问3：实验室各个区必须相邻布置吗？
不 是 实验室可分为两种形式：
分散布置形式——各个区不相邻
集中布置形式——各个区相邻
分散形式：各个实验室用房彼此相距较远，呈分散布置形式；各个实验室之间不易产生交叉污染；简化复杂的“特殊”的条件要求。
问4：必须设置样本接收室吗？
不是 可直接进入样本制备间
若在样本接收室进行灭活等操作，诊室应为BSL-2(在生物安全柜中打开样本包装盒，对采样管等进行表面消毒，而后拿出进行灭活)
问5：一定要设缓冲间吗？
是 缓冲间是阻隔空气交换的首要措施。
集中式，一定需要PCR专用走廊？
不，首先设置缓冲间，所谓PCR走廊并无多少积极作用。面积不足时，不设走廊。
关于PCR专用走廊作用：主要是将实验室与其他区域分开，而这种分开并无实质性意义，在控制交叉污染方面，并无多少积极作用。相反，更易导致交叉污染，应优先设置缓冲间。若设走廊，可作共用前室，存放备用物品，放置更衣柜，以更换清洁工作衣帽，不可在工作区储存备用物品。
问6：PCR走廊必须前后两个出口吗？
不是，临检导则：进入各工作区域应当严格按照单方向进行，即：试剂储存和准备区→标本制备区→核酸扩增区→产物分析区 ，上述核心指单向工作流程而非人员“一去不复返”
注意：上述单项工作流程−指同一批人“串联工作”
实际工作中−时常，不同人员同时在不同区域，“并联工作”，因此，说不上“按单一方向进行”
走廊乃清洁区-因此，所谓的“PCR走廊”并非需设前后两个出口-更何况完全可以不要这条走廊。
问7：实验室必须设污物走廊？洁污分流？
不是 实验室生物安全的本质：不允许污染外泄，废弃物可安全打包，必要时表面消毒，安全运送出来灭活。也可原地消毒----即无“污物”，则不需污物走廊
难道设了污物走廊就可以让走廊被污染吗？可以肆无忌惮？皆不可以！
设置污物走廊（带来问题）1.挤占面积2.实验室结构复杂化（多开口，多通道）3.实验室操作复杂化（管理体系更复杂）……诸多问题
问8：必须设置传递窗吗？
不是 根据需要设置，适于难于随身携带时
不需要“洁污分流”
分散式：各区之间无传递窗可言
集中式：需要特别注意：样本制备间与核酸扩增之间，易有交叉污染，--是否设置，需根据具体情况进行评估
其他毗邻工作区：相互之间，空气交换并不影响实验结果---为了方便，宜设置
问9：是否一定要用B2型生物安全柜？
不是 无论是A2还是B2均符合生物安全要求。
A2与 B2有好坏之分吗？
没有 生物安全防护性能是“相同”的，均符合要求，无“高低贵贱”之分。
适用性不同
BSC-II-B1/B2型-适用于散发有毒有害气体的实验活动
BSC-II-A1/A2型-适用于不散发有毒有害气体的实验活动
选择BSC-II- B2，需注意：
负压实验室设计，选用B2生物安全柜，需要特别当心，易出现问题。B2排风量很大，启动，停止，实验室压力急剧变化。谨慎选用：排风翻N倍多，启停过程压力波动很大，控制难度很大，甚至运行失控，失败，需格外谨慎。
问10：实验室（含缓冲间）必须设置洗手池吗？
不是 样本制备间：是BSL-2/3实验室 GB19489-2008如果实验室不具备供水条件，则应设非手动手消毒灭菌装置
可以设洗手池的前提是-应有下水消毒灭菌措施，（活毒废水灭活设施），不得将污染物排入社会。否则不可以！
问11：实验室必须设冲淋装置吗？
不是 没用伤害便没有防护 GB19489-2008：若操作腐蚀性物质，必要时应设紧急喷淋装置。
问12：实验室必须设洗眼装置吗？
是 GB19489:应在实验室工作区配备洗眼装置
大多数实验室为了避免上水供应和下水处理所带来的的麻烦，通常选用洗眼瓶，这也是国外实验室常见的做法。
问13：是否一定要在实验室设置高压锅？
不是 GB19489-2008：应在实验室或其所在建筑内配备压力蒸汽灭菌器或其他适当的消毒灭菌设备。
不得在核心工作区间设置高压锅？
不是 理由同上
问14：在实验室核心工作间设置？在实验室所在建筑内设置？
在楼层间（同层）设置（大部分）
问15：PCR实验室是BSL-2实验室吗？
不是 只有样本制备区有生物安全问题，从事病原微生物实验（包括医学实验室人体样本检测）的是BSL-2/3实验室，其他区均非BSL-X实验室
问16：各工作区需要设置更衣室吗？
宜设 除试剂准备间外，进入其他工作间均需更衣（穿进不穿出），有条件的，可为样本制备间，核酸扩增间，产物分析间分别设置更衣室。若无更衣室，可在走廊或其他干净的地方更衣。在缓冲间更衣-不可取。
问17：新冠检测是否一定要负压BSL-2？
不是 无论是常压（普通P2）还是负压（P2+）,均符合新冠病毒核酸检测要求，以及其他所有适用于BSL-2实验室的实验要求，合规合理。
问18：BSL-2负压是否更加安全？
负压的主要作用是保护环境而非实验人员，室内负压，可阻止室内空气无组织外泄
负压实验室：--设计正确，才能起到保护人员的作用
--设计不正确，则更加危险，不如不做。
正确设计须设计定向气流，GB19489:防护区房间内送风口和排风口的布置应符合定向气流的原则。送风口、排风口的布置应利于减少房间内的涡流和气流死角。送排风口，尽量均匀，对称布置。
实验室压力如不确定，临检导则:为防止扩增产物顺空气气流进入扩增前的区域，可按照空气压力递减的方式进行。
试剂储存和准备区→样本制备区→扩增区→扩增产物分析区方向
有一个矛盾， 上述压力递减存在一个矛盾。
样本制备区是BSL-2，相对第三区为正压，空气流向核酸扩增区，不符合生物安全原则。
应对措施（1）若墙体多密闭-问题不大
若房间不相邻-问题不在
应对措施（2）样本制备间与核酸扩增间持平
四区压力分布：高、平、平、低
问19：PCR实验室排风需要高度过滤吗？
应区别对待，无论PCR需要多少工作区 ，只有样本制备区是生物安全实验室（BSL-2），排风应高效过滤。其他工作区，排风不需要高效过滤。
问20：为什么负压P2排风可以不过滤？
P2+：设计为负压，是业主自住选择的高配措施，而非标准规定
P2:出于与初衷保持一致（保护环境）
专家建议：应高效过滤后排出-合理性，但这不是标准规定，不可强制。
问21：缓冲间设计为最高压或最低压是否合理？
不 1.设计为最高压，有名曰“防护墙”，设计为最低压，有名曰“负压陷阱”，无论是正压还是负压，在人员开启缓冲剑门进出过程，都会增加工作区的空气外溢的程度（有国内外标准，实验结果为依据）。压力递减的作用，保持定向气流 阻止空气外溢、倒流 是铁律，最可靠、有效的措施。
问22：实验室空气是否一定要净化？
不 房间空气是否净化与实验结果没有什么关系。换句话说，不需要净化。
问23：气流是否一定要上送下排？
不是 上送上排 上送下排均可
问24：如何设置通风空调？
可采用简单做法：普通排风装置（如排风扇）+温度控制装置（如分体空调、暖气等），作恒定负压设计，向室外排风即可达到减少空气外溢的目的。
可采用复杂做法：集中空调系统-作恒定负压设计，顺便达成洁净、恒温、恒湿 。
集中空调系统原则：集中送风、分别排风
排风：试剂准备间，可只送不排，若排风，应设置独立排风口
样本准备间:属于BSL-X，若排风，应设置独立排风
核酸扩增间、产物分析间：可分别独立排风，也可俩间合并排风
四区合并排风是不可以的，容易在停机后产生生交叉污染，停机后，空气倒流回房间，存在被空气污染的可能性。
备注：本文中的临检导则指《医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则》
为什么需要“感控钥匙”
新冠肺炎防控使感控工作进一步受到了医疗机构的关注，也得到普通老百姓的熟知。几乎所有的医院都会要求医务人员进岗时必须经过感控培训，但不同科室的诊疗又有不同特点，我们的培训也不可能使用一个课件培训所有的人，而很多基层医疗机构的老师又不太熟悉PPT的制作，或找不到更好素材，很多规范也不知道在哪里下载，临床科室的院感知识培训也不能每年都一样，感控护士、医生需要一些课件给他们科室人培训需要新的PPT，如何应对？
感控钥匙，内容演示
感控钥匙是一个最值得拥有的感控助手，原版PPT+培训视频，基本覆盖感控实践中的90%以上的问题，包涵的上百个规范标准则是感控plus运营主编董宏亮老师从业十年的积累，很多的规范标准都很难在百度中找到，全部毫无保留放在感控钥匙中，培训PPT则是一线感控专职人员多年工作经验的积累和展示，我们不讲高大上的内容，就是告诉你怎么做，为什么。如果您真的想做好感控工作，那么感控钥匙您必须拥有，绝对物超所值、相见恨晚！
联系客服
