白癜风样小鼠皮肤脱色模型研究进展与思考[9]

3. 黑素瘤-调节性 T 细胞（regulatory T cells，Treg）诱导的白癜风样小鼠模型：由于人白癜风发病由多种识别不同黑素细胞特异性抗原的CD8+ T细胞驱动，而黑素瘤免疫治疗可激活 CD8+ T 细胞来识别这些黑素瘤和黑素细胞共有抗原，因此临床上接受免疫治疗的黑素瘤患者中13.5% ~25.7%发生白癜风［26⁃28］。此外，Treg细胞的缺失可诱导自身免疫CD8+ T细胞活化，导致白癜风发生。使用CD4抗体耗竭 CD4+ CD25+ Treg 细胞后不会对 B16 原发 肿瘤的生长产生显著影响［29］。基于此，北京生命科学研究所陈婷团队在前人基础上建立了一种黑素瘤⁃ Treg 诱导的白癜风小鼠模型［30］。他们采用B16F10黑素瘤细胞接种联合Treg细胞缺失来激活内源性自体反应性CD8+ T细胞靶向杀伤表皮黑素细胞，诱导白癜风发生，大致步骤为：先在8 ~ 9周龄 C57BL/6 小 鼠 右 侧 背 部 皮 内 接 种 2 × 105 个B16F10黑素瘤细胞，分别于第4、10天注射CD4抗体，于第12天行手术切除原发肿瘤，由于小鼠皮肤表皮更替时间为30d［31］，于第 30 天左右在肿瘤切除部位逐渐出现白发，45天左右小鼠尾部皮肤出现肉眼可见白斑。C57BL/6 小鼠背部皮肤的黑素细胞位于毛囊而非表皮，而小鼠尾部皮肤的黑素细胞具有与人皮肤相似的特点，位于毛囊和表皮内，因此该模型使用小鼠尾部皮肤进行观察分析。观察发现，诱导后30 d表皮黑素细胞丢失达到高峰，诱导后60 d色素脱失进一步明显。小鼠尾部皮肤表皮色素脱失起初呈斑片状并逐渐发展，最终覆盖整个表皮，连续观察1年多后仍未复色，且未发现红肿或表皮鳞屑等皮肤炎症反应。