白癜风样小鼠皮肤脱色模型研究进展与思考[10]

该模型的优点是：造模周期较短，操作方法相对简单，可重复性强，依靠激活小鼠自身CD8+ T细胞实现，造模效果好、白斑稳定。缺点是：因C57BL/6小鼠表皮无黑素细胞，白斑的主要观察部位为鼠尾和毛囊，而在鼠尾进行外用药物研究会因尾部表皮鳞片透皮性差等原因产生一定局限性；其次该模型对B16F10及CD4+ T细胞抗体质量要求颇高，对操作者的技术亦有较高要求，注射深度和药量等因素都会对最终的成模效果产生影响；此外该模型中Treg细胞最初是耗竭的，未来使用该模型研究Treg等CD4+ T 细胞在驱动白癜风发生进展中的作用时应考虑到这些因素。

（三）转基因小鼠模型

1. FH 转基因小鼠：Gregg 等和 Nichols 等在 AAD+（主要组织相容性Ⅰ类重组分子，含有人HLA⁃A*0201的多肽结合区，与小鼠H⁃2Dd的CD8结合域相连）白化小鼠基础上构建趋化因子受体和效应分子缺陷的FH小鼠，在该小鼠出生后24 h内和7 d后分别注射100 mg抗CD4抗体、抗CD8抗体 和抗 CD25 抗体，以清除体内CD4+、CD8+和CD25+ T细胞，再通过磁珠从脾脏和淋巴结中分选出IFN⁃γ+/+ 和IFN⁃γ-/- FH CD8+ T细胞，将纯化的CD8+ T细胞尾静脉注射入亚致死剂量辐照的AAD+ 非转基因C57BL/6鼠体内，随后隔日注射白细胞介素2连续10 d，最终构建成白癜风小鼠模型。该模型能识别酪氨酸酶抗原表位，所有表达FH基因的AAD+ 酪氨酸酶阳性鼠都出现表皮和毛囊的进行性脱色。造模结果显示，小鼠产后3 d双耳出现均一的色素脱失斑，5 d眼周形成色素脱失环，随后口鼻部也开始出现白斑。产后21 d时尾部出现色素脱失并逐渐扩大，在小鼠7周龄时色素脱失部位出现斑点状复色，颜色先变灰后又再次出现色素脱失，此后白斑稳定存在，并逐渐扩大累及全身，但并非所有色素脱失的小鼠均有这种现象；在20 ~21周龄时，色素脱失停止进展并趋于稳定。

该小鼠模型皮损发生部位、白斑进展过程及其免疫学机制与人白癜风高度相似，且均为自发性产生而无性别差异，白斑的发生发展对IFN⁃γ和CXC趋化因子受体3依赖性强，其表达降低可使皮损部位 CD8+ T 细胞浸润减少。因此，适合研究细胞因子及相关免疫通路在白癜风中的作用。但该小鼠模型存在如造模复杂、色素脱失不稳定、白斑发展受年龄因素影响等局限性。