Stephen J. Lippard 他的实验室令人流连忘返。他是无双的工具制造者,制造了一个又一个分子工具,揭开细胞深处神秘的生命活动。早期的一个成功案例是Fura-2,一个使细胞内钙离子显像的荧光指示剂。钱永健描述Fure-2和相关的钙指示剂的最重要论文被引用超过20000次。 钱永健的其他生物钙指示剂的发明包括螯合物,例如BAPTA,能与钙离子结合并抑制其功能;乙酰氧基甲基酯,即使细胞膜通透性较差时也让使荧光指示剂进入细胞;还有所谓的“笼锁(caged)”复合物,经光化学分解后能释放活性物质,发出荧光。这个工具可用来控制探针的定时,定位及信号强度。 钱永健对文献有百科书般的知识,能让他设计出以最少的步骤合成分子的方法。我从他实验室回到自己在麻省理工的实验室,便着手开展自己的课题,对中枢神经系统中的移动锌离子进行显像。 我们经过许多步骤得到了第一个合成品Zinpyr-2,在体外和锌反应良好,我让永健帮忙,在活细胞中让锌显像。他听到我的成果也很兴奋,我都能想像到电话那头他“永健式”的挥舞着手,因为,他恰好也为了另一个目的,独立合成了一个非常相似的复合物,而且只用了一步!我们一起发表了这个成果,不用说,他的Zinpyr-1成了我们的探索之路早期移动锌成像的必备工具。
Zinpyr-1 | A New Cell-Permeable Fluorescent Probe for Zn2+.J. Am. Chem. Soc., 2000, 122 (23), pp 5644–5645 钱永健关于钙离子信号的成果应该获得诺贝尔奖,但当斯德哥尔摩那边宣布他以绿荧光蛋白(GFP)获奖时,许多人都吃了一惊。这个由下村脩在维多利亚多管发光水母(Aequorea victoria)中发现的神奇蛋白,就像Martin Chalfie展示的那样,当受到蓝色-紫外光波段激发时能发出绿色荧光,还能把这个基因编进其他动物体内,用以观察其他生物现象。永健说这种GFP“暗淡,飘乎,幽冥不纯”,他修改了其中一个关键位点上的氨基酸,得到了增强版GFP,更加明亮,之后又扩大实验,试着把这个11条β桶状结构的蛋白各处氨基酸进行修改,创造了各种彩虹光谱的版本。下村脩,Chalfie和钱永健共同获得了诺贝尔奖。 再后来,钱永健想要对医学做点贡献,他设计了一种方法将神经细胞着色,让外科医生在手术执刀时能避免损伤到它们——荧光引导手术。不久他又有了一个想法:探寻大脑中长期记忆贮存的奥秘,并设计方法不断验证。癌症的早期检测也是他的兴趣之一,而且他认为肿瘤荧光指示剂(其中一个正在进行临床试验)比神经荧光指示剂更为重要。 真不知道生物化学界痛失钱永健,会失去多少富有创造力的发明。他走后留下了妻子Wendy,两位兄弟Richard和Louis,以及他的继子Max Rink。我们深深地愐怀他。