乳腺癌中PHF2的表达及其临床意义

张露，李凡，回天立，任国胜

重庆医科大学附属第一医院　

　　近年来，乳腺癌在全球范围内发病率呈逐年递增趋势。乳腺癌的发生、发展是一个多病因、多步骤的过程，与癌基因的激活和抑癌基因的失活密切相关。PHF2位于9q22.31，是Jmjc家族的成员之一，其通过使组蛋白赖氨酸的去甲基化，调节靶基因的转录。PHF2在头颈部肿瘤、结肠癌、胃癌等多种恶性肿瘤中低表达，提示PHF2可能是抑癌基因，对肿瘤发生、发展起负向调控作用。目前PHF2在乳腺癌中的研究尚处于起步阶段，在乳腺癌中的表达及具体作用尚未见相关报道。本文旨在探讨PHF2在乳腺癌中的表达及临床意义，为临床及病理医师提供有用价值。

　　目的：探讨PHF2在乳腺癌细胞和组织中的表达及其与乳腺癌临床病理特征、预后的关系。

　　方法：采用qRT-PCR法检测乳腺癌及正常乳腺上皮细胞株（n=7）及配对的癌旁组织（n=30）中PHF2 mRNA的表达水平；应用蛋白质免疫印迹法检测乳腺癌细胞株中PHF2蛋白的表达水平，免疫组化法检测乳腺癌组织（n=50）和癌旁组织（n=15）中PHF2蛋白的表达，分析PHF2表达与乳腺癌临床病理特征的关系及预后的关系。

　　结果：与正常人乳腺上皮细胞相比，PHF2 mRNA和蛋白在乳腺癌细胞株中表达下调（P＜0.01）；与癌旁组织相比，PHF2 mRNA在90%（27/30）的乳腺癌组织中表达下调（P＜0.05）；免疫组化结果显示：在70%（35/50）的乳腺癌组织中PHF2蛋白表达下调（P＜0.05）；PHF2表达下调与乳腺癌患者的淋巴结转移、ER阴性及预后密切相关（P＜0.05）。

　　结论：PHF2在乳腺癌中表达下调，可以作为乳腺癌预后判断的指标之一，有望成为乳腺癌治疗的新靶点。

　　乳腺癌的发生、发展是多病因、多步骤的过程，主要受遗传和非遗传因素的影响。从遗传学角度而言，抑癌基因的失活和癌基因的激活与肿瘤的发生、发展密切相关。人类9号染色体长臂2区2带（9q22）在多种恶性肿瘤中有不同程度的缺失，提示该区段包括一系列的抑癌基因（如FANCC、PHF2、XPA、PTCH1等）。PHF2位于9q22.31，由PHD锌指结构域和Jmjc区域共同构成，属于KDM7（Jmjc的亚家族）家族成员之一，KDM7包括KDM7A（KIAA1718）、KDM7B（PHF8）、KDM7C（PHF2）三个成员。研究显示PHF8和KIAA1718与大脑的发育密切相关，它们可以通过使H3K9Me2、H3K27Me2、H4K20Me1去甲基化，进而调节靶基因的表达。PHF2在ARID5B的协助下也参与组蛋白赖氨酸的去甲基化（如H3K9Me2、H4K20Me1），从而促进靶基因的转录。另外，PHF2可以结合到rDNA启动子处的H3K4Me3，从而促进rDNA的表达。例如PHF2通过使组蛋白赖氨酸去甲基化的方式激活相关靶基因的转录，从而促进与脂肪的形成和NF-κB通路炎症相关因子的表达。本组实验检测PHF2在乳腺癌中的表达，结果发现与配对癌旁组织比较，PHF2 mRNA在90%的乳腺癌组织中表达下调；同时，PHF2蛋白在70%的乳腺癌组织中表达下调，与之前PHF2在结肠癌、胃癌、头颈部肿瘤组织中呈不同程度低表达的研究结果相似。提示PHF2表达的下调参与乳腺癌的发生、发展，可能是乳腺癌的抑癌基因。淋巴结转移与否对于乳腺癌的预后有重要意义。乳腺癌中出现淋巴结转移，提示肿瘤的恶性程度高；转移、侵袭能力强，患者的预后差、总生存率低。本组实验发现PHF2蛋白水平表达的下调与乳腺癌淋巴结转移密切相关；这可能是由于下调的PHF2减弱甚至失去了抑制乳腺癌恶性进展的作用，从而使肿瘤迁移、侵袭、转移等恶性特征的程度加强、进程加快。ER阴性的乳腺癌往往为非激素依赖型，该类患者内分泌治疗不敏感，预后较差。本组实验发现PHF2蛋白水平的降低与ER阴性有关，提示PHF2表达下调或缺失在非激素依赖型乳腺癌发生、发展中起特殊作用，还需进一步分析。同时，我们用在线数据库KMPLOT分析PHF2的表达与乳腺癌患者预后关系，结果显示：PHF2的表达水平与患者预后有关，在PHF2低表达组乳腺癌患者预后较高表达组差。这与之前在头颈部肿瘤中报道PHF2表达的下调与患者预后关系相似。上述结果显示PHF2表达的下调与肿瘤进展密切相关，可作为判断乳腺癌患者预后的指标之一。最近研究发现，在结肠癌中PHF2通过使p53下游靶基因p21启动子处的H3K9Me2去甲基化，从而发挥PHF2介导的p53凋亡信号通路对肿瘤发生、发展的抑制作用。目前，PHF2在乳腺癌中作用机制尚未明确，其是否通过p53、p21发挥抑癌作用尚不清楚。因此，我们还将进一步探索PHF2通过何种信号通路对乳腺癌的发生、发展及生物学行为产生影响。

　　总之，本组实验发现PHF2在乳腺癌中表达明显下调，并与淋巴结转移、ER阴性及预后密切相关；PHF2可能是乳腺癌的抑癌基因，可作为乳腺癌预后判断的指标之一，有望成为乳腺癌治疗的潜在新靶点。