【精准免疫，诊断先行】实体肿瘤PD-L1免疫组化检测共识2021版线上巡讲会——肺癌篇顺利召开

大会主席致辞

目前，免疫治疗已经成为肿瘤治疗领域中一个关键、不可或缺的治疗手段。程序性细胞死亡配体1（PD-L1）表达是应用最广的免疫治疗生物标志物。为了更好地优化免疫治疗在临床的应用，梁智勇教授和步宏教授牵头制定了《实体肿瘤PD-L1免疫组织化学检测专家共识（2021版）》。《共识》一经发表，让临床病理检测有了可遵循的标准。我们知道，目前临床上可供选择的免疫治疗药物比较多，每个药物都有各自配套的检测试剂，基本处于“一药一试剂”的状态，如何平衡技术、抗体和临床药物的需求，是目前临床上面临的重要课题。优化临床PD-L1表达检测是我们病理医生的使命，对《共识》进行全面的解读巡讲、讨论和学习将助益PD-L1表达检测顺利落地。林教授指出，本次的巡讲会是《共识》发布后的第一次巡讲，意义重大，期待临床和病理的通力合作，让更多患者从免疫治疗中获得最大获益。

实体肿瘤PD-L1检测共识要点解读

讲者：河北医科大学第四医院 刘月平教授

刘教授就《共识》中6大问题展开详细介绍，包括：PD-L1检测在临床实践中的现状、PD-L1免疫组织化学检测前有关事项、PD-L1免疫组织化学检测中有关事项、PD-L1免疫组织化学检测后有关事项和自建PD-L1检测实验室及质量控制等几个方面。

· PD-L1检测在临床实践中的现状

可以明确的是，PD-L1检测对于部分肿瘤的免疫治疗具有伴随诊断和补充诊断的价值。采用免疫组织化学检测PD-L1表达作为抗PD-1/PD-L1治疗的预测性生物标志物时，需根据药物-疾病-诊断分析原则。我们需要注意的是，PD-L1免疫组织化学抗体需与配套的检测系统在对应的检测平台中进行。

· PD-L1免疫组织化学检测前有关事项

在进行PD-L1免疫组化检测前需进行充分有效的临床病理沟通。有效的临床病理沟通便于临床医师规范申请PD-L1免疫组织化学检测，以及病理科医师合理选用PD-L1检测试剂、获得正确的检测结果。在PD-L1表达检测正式应用于临床检测前，实验室需要建立标准化操作流程，并完成性能验证。最后，对于PD-L1检测前标本类型的选择，也有几个需要把握的原则：第一，推荐优先在石蜡包埋标本肿瘤组织切片中进行PD-L1免疫组织化学检测；第二，暂不推荐在细胞学标本中进行检测，如无法获得组织标本时，可在细胞学包埋蜡块中进行检测，并在备注中说明；第三，不推荐在骨转移脱钙标本中进行PD-L1免疫组织化学检测；第四，当同时有原发灶及转移灶标本时，推荐均进行PD-L1免疫组织化学检测，并分别报告检测结果。此外，在进行PD-L1表达检测前，我们需对HE染色切片进行评估。

· PD-L1免疫组织化学检测中有关事项

在对每个样本进行PD-L1免疫组织化学染色时，均需同时设阴性试剂对照。病理科在进行每轮PD-L1抗体免疫组织化学染色时，需要设置系统阳性及阴性对照，或在待检切片上放置阳性及阴性对照。

· PD-L1免疫组织化学检测后有关事项

PD-L1免疫组织化学检测后判读流程包括：系统对照切片的评估、PD-L1阴性试剂对照切片的评估及PD-L1染色切片判读；具体的要求请参照各PD-L1免疫组织化学检测试剂说明书进行。值得注意的是，PD-L1表达的评分以PD-L1抗体克隆号、检测的瘤种及拟选用的PD-L1免疫药物为依据，可检测肿瘤细胞和（或）免疫细胞PD-L1的表达水平，包括肿瘤细胞阳性评分、免疫细胞阳性评分、肿瘤细胞及免疫细胞联合阳性评分等，具体的评分内容及标准请参照相应抗体的说明书。最后，在报告结果时，请使用PD-L1免疫组织化学检测结果报告模板。

· 实验室自建检测

目前，由于国内缺乏相关的立法及实践经验，开展实验室自建检测需谨慎。如必需开展实验室自建检测，实验室需提供技术验证和使用相关参比标准品进行的间接临床验证。

· PD-L1检测的质控

质量控制包括室内质控及室间质控。室内质控要求检测实验室应设置阴、阳对照，定期进行检测人员比对、培训和数据总结分析。室间质控可以通过参加国内权威机构举办的室间质评活动来完成，也可通过与其他实验室比对的方式确定检测结果的可信度。

实体肿瘤PD-L1规范化检测与判读分享之肺癌篇

讲者：复旦大学附属肿瘤医院 李媛教授

李媛教授首先介绍了肺癌PD-L1表达检测的总体原则。目前，临床研究采用“一药一诊断”的开发模式，在肺癌PD-L1的检测上，目前有多个检测试剂，FDA、欧盟和国内分别获批了不同多个伴随诊断平台。在肺癌患者检测标本的选择上，与其他肿瘤类似，应以组织学标本为检测优选。新辅助治疗后的患者，以治疗后的标本作为优选。晚期患者可以用细胞蜡块进行检测，但细胞涂片不推荐作为检测标准。

接下来，李教授就肺癌领域常用的3个检测抗体的评估展开详细的介绍，包括 PD-L1（SP263），PD-L1（SP142）和 PD-L1（22C3）。李教授强调，在临床检测真正落地之前，我们需要组织病理医生，对每个抗体染色进行单独的培训，虽然各个检测平台有共性，但在评估上还是存在很大的差异，很多检测和评分细节值得关注。

· PD-L1（SP263）主要关注肿瘤细胞染色。首先需要评估肿瘤细胞数目，阳性、阴性对照是否合格。SP263抗体主要关注膜上的表达，如果仅有细胞浆染色，则不纳入评分标准。此外，染色强度有弱、中、强三个等级。需要注意的是，切片中的免疫细胞同样有染色的情况。因此，在进行评估时，需要对照HE切片，警惕巨噬细胞和组织细胞染色的情况。最后，我们在评估时，只需要评估活的肿瘤细胞，需要将坏死的肿瘤细胞从评分细胞中排出。此外，对于肿瘤存在肿瘤异质性的标本，我们可以同时评估4个切片，取平均值。当前，PD-L1（SP263）是对应免疫治疗药物最多的一个检测体系，也是目前唯一获批的一个适用于早期肺癌辅助治疗阿替利珠单抗的伴随诊断检测平台。

· PD-L1（SP142）同样对肿瘤细胞和免疫细胞都有染色，更多关注肿瘤细胞的表达。总体的判读流程与SP263类似。在进行评估时，我们首先要确定肿瘤细胞所在的区域，才能计算出相应的肿瘤细胞和免疫细胞百分比。主要关注膜染色阳性。SP142检测还需要重点关注免疫细胞群，包括淋巴细胞、巨噬细胞、树突状细胞和粒细胞。需要注意的是，脉管腔中的免疫细胞染色应排除。

· PD-L1（22C3）主要评估肿瘤细胞，判读流程与上述两个抗体类似。主要评估膜染色，弱、中、强都纳入评分，单纯的胞浆染色不纳入评分标准。

最后，李教授就不同PD-L1单抗检测结果及判读的一致性研究结果进行了分享。目前的结果显示，PD-L1（SP263）在肿瘤细胞中检测PD-L1表达与22C3和28-8一致性较好。后续，还需要在真实世界临床患者中，进一步进行不同检测平台的一致性评估。在免疫细胞评估上，目前各个检测平台的一致性还需要加强。

讨论总结及问题答疑

在讨论和答疑环节，专家组就以下几个问题展开讨论。

· PD-L1作为目前国内外证据等级最高的免疫治疗预测标志物，对免疫治疗的指导意义，您怎么看？对于免疫单药治疗及联合治疗时，您是否会采取不同的检测策略？

专家组一致认为，建议在开始免疫治疗前进行PD-L1表达检测。PD-L1表达是目前免疫治疗最重要、也是循证医学证据最强的生物标志物。对于免疫单药的治疗，一定要进行PD-L1表达检测；强调“一药一诊断”的原则，即用什么药，就采用对应的检测平台。值得注意的是，目前临床上免疫单药治疗的情形是比较少的，大部分患者还是采用免疫联合治疗。对于接受免疫联合治疗的患者，专家组还是建议进行进行PD-L1表达检测，PD-L1表达越高，患者的获益最大。总体而言，能检测的患者尽量检测，PD-L1表达对免疫治疗具有一定的指导价值。病理医生应该按照《共识》规范化的进行检测，为临床医生提供重要的指引。

· 面对这几年不断获批的PD-L1检测的多瘤种、多抗体、多平台、不同判读标准来说，您认为病理科是否面临挑战，挑战又如何变化？

目前，PD-L1表达检测是一个非常复杂的工作，包括不同的检测机器、不同的检测试剂。中国很多医院都不具备完全拥有上面提及的两个检测平台，4种试剂。此外，在PD-L1表达的判读上，也是一个具有挑战的工作。同一试剂用于不同的瘤种判读标准不同，不同的试剂又有不同的判读标准。一个病理医生要掌握所有瘤种的判读是非常难。因此，临床上，我们需要细分到亚专科，以最大可能的满足不同抗体、不同瘤种之间的临床需求。

· 除了既有的IVD方法，对于中国是否适用于LDT方法检测，您怎么看？

在LDT检测上，中国在这方面还缺乏很好的数据和指导的意见。从目前的情况来看，国内做LDT的可行性不大。在进行LDT检测前，一定要做好充分的验证数据，包括和其他的IVD方法进行反复对比和验证，待条件稳定后，才可以采用LDT方法作为临床检测手段。目前，中国各个实验室首选的都是IVD方法。

· 当前数字病理切片也越来越多的出现在病理诊断中，对于全片扫描的PD-L1染色切片，是否有助于判读PD-L1表达异质性比较大的肿瘤组织？

计算机人工智能（AI）读片，目前可以辅助病理医生进行评分，但是很难完全替代病理医生。对于异质性很大的组织判读，AI有一定指导价值。总体而言，AI可以作为辅助手段，但最终结果需要医生进行把控。

大会总结

最后，大会主席林冬梅教授对今天的线上巡讲会进行了总结。今天的大会内容非常细致，贴近临床，对病理医生具有非常实际的指导意义。期待今后更多地开展此类活动，让PD-L1表达检测真正落地临床，规范检测，优化免疫。