七八年前我写的教程，尤其是多组学测序数据分析，都是从ncbi的sra数据库里面下载sra文件，然后一步步处理。很多教程还录制成为了视频上传到b站。
但是读者多了之后我接受到的大家的反馈就是从ncbi的sra数据库里面下载sra文件实在是太慢了，因为我做演示的服务器在境外，所以自己压根就没有意识到这点。但是陆陆续续有小伙伴告诉我应该是使用aspera从ebi的ena数据库直接下载fastq文件即可，高速而且还少了一个sra文件转为fastq的步骤。所以后来我也开始在日常更新的公众号里面推荐这个方法，就是参考：使用ebi数据库直接下载fastq测序数据 , 需要自行配置好，然后去EBI里面搜索到的 fq.txt 路径文件：
脚本如下：
# conda activate download
# 自己搭建好 download 这个 conda 的小环境哦。
cat fq.txt |while read id
do
ascp -QT -l 300m -P33001 \
-i ~/miniconda3/envs/download/etc/asperaweb_id_dsa.openssh \
era-fasp@$id .
done
# nohup bash step1-aspera.sh 1>step1-aspera.log 2>&1 &
这个脚本会根据你在EBI里面搜索到的 fq.txt 路径文件，来批量下载fastq测序数据文件。
没想到，也没有过去多少年，就风水轮流转， aspera从ebi的ena数据库这个手段时灵时不灵的。现在只能是回归sra下载，见：转录组上游定量分析其实真不难，4步可定（一），从ncbi的sra数据库里面下载sra文件需要的是sra-tools这个工具套件， 如果你按照我的转录组流程配置：在全新服务器配置转录组测序数据处理环境，会发现安装的是sra-tools-2.8.0 ，后面仍然是报错，所以得指定版本，比如从github安装最新版：
不同操作系统下载后解压即可使用，但是这个软件很有意思，居然是需要先注册:
wget ....
tar zxvf ....
cd sratoolkit.3.0.0-ubuntu64/bin
./vdb-config --interactive
接下来就可以使用 sratoolkit.3.0.0-ubuntu64/bin 文件夹里面的各种各样的命令啦。
两个下载方式都可以，取决于你的网络情况，不同国家地区不同的选择，人啊要学会灵活应变！有一些学员在b站发弹幕吐槽我前面的ngs教学课程的sratoolkit代码失败，其实是它们自己的网络问题，我的课程录制较早，那个时候也没有想到过大家居然连数据都无法下载，这一点只能说请大家见谅。
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