摘要
《生物技术与实践》高考考查的方向往往是以微生物分离、利用为情境，以实际生产生物为问题的载体。即如何从自然界中分离出目的菌，如何利用目的菌以用于生产、生活。
采样
2018浙江11月选考：为筛选胞外α-淀粉酶分泌型菌种,一般从 C (A.果园树下 B.肉类加工厂周围 C.米酒厂周围 D.枯树周围)获得土样
2019年4月选考：通常从腐烂的水果上分离产果胶酶的微生物，其原因除水果中果胶含量较高外，还因为腐烂的水果上含有产果胶酶的微生物多。
教材：分离以尿素为氮源的微生物，通常从动物排泄物的地方获得；Taq DNA聚合酶是第一个被发现的热稳定DNA聚合酶，最初由Saiki等从温泉中分离的一株水生噬热杆菌中提取获得。
小结：想要获得某种菌，往往从其生活的特定环境下采样。
富集培养
.(2017江苏单科,31,7分)苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中,对环境有严重危害。小明同学准备依据如图操作步骤,从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题:
（1）酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作为碳源的有蛋白胨、苯酚
（2）将采集到的样品接种培养,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐 增加 ,以达到富集酚降解菌的目的。
分离、筛选
3.1 单菌落分离
划线分离和涂布分离都是分离单菌落的方法，但是应用场景不同。比如从土壤样液中分离出某种目的菌时，往往用稀释涂布分离，因为目的菌在土壤中所占的比例往往较少，划线分离不容易分离出单菌落。
若保存的菌种被杂菌污染，往往用划线分离分离出单菌落，再进行培养并保存菌种，因为目的菌所占的比例大，容易分离出目的菌。另外划线分离法获得产物表达能力高的菌株，如在培养基中加入一定量的氨苄青霉素，由于非工程菌和其他杂菌都没有抗性基因，所以在 划线后只有存在抗性基因的工程菌能生存下来。
当然也没有严格的区别，对于高考而言，两种分离方法基本上都适用，但是若题目中出现稀释或者表现为涂布分离的菌落特征，就另当别论了。
2018年4月浙江：（2）在淀粉分离生产工艺研究中，为促进淀粉絮凝沉降，添加生物絮凝剂（乳酸菌菌液），其菌株起重要作用。为了消除絮凝剂中的杂菌，通常将生产上使用的菌液，采用_划线分离法(或涂布分离法)，进行单菌落分离，然后将其扩大培养，并进行特性鉴定，筛选得到纯的菌株。
2019年4月32浙江 ：为了获得高产果胶酶微生物的单菌落，通常对分离或诱变后的微生物悬液进行 涂布分离或划线分离。
2019课标全国Ⅰ,37 ：Ⅱ号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基,若要以该固体培养基培养目标菌并对菌落进行计数,接种时,应采用的方法是稀释涂布平板法。
3.2 筛、选
往往利用选择培养基“筛”出目的菌，例如教材中用尿素为唯一氮源的培养基筛出利用尿素的微生物，根据环带直径与菌落直径比值的大小，选出产脲酶的量多和活性大的目的菌。
2015浙江自选,17：（1）土壤悬液首先经80 ℃处理15分钟,其目的是筛选出耐高温的菌株。
2018浙江11月选考：涂布到含有淀粉的选择培养基上培养,一段时间后在培养基表面滴加碘液,可在菌落周围观察到水解圈。若要筛选酶活性较高的菌种,需挑选若干个 水解圈直径与菌落直径 比值大的菌落,分别利用液体培养基振荡培养进行扩增。
2020年1月浙江29题：从泡菜汁中可分离制作酸奶的乳酸菌，首先对经多次发酵的泡菜汁进行过滤，然后，取滤液进行稀释，再用涂布分离的方法在某种含牛乳的专用的培养基中进行初步筛选。(4)自然界中醋杆菌常与乳酸菌共同生长。若要筛选出醋杆菌，则其专用的培养基中应添加乙醇。
扩大培养与应用
2015浙江自选,17：（3）筛选获得的菌株经鉴定后,将优良菌株进行液体扩大培养。培养时需要振荡,其主要目的是供氧。
扩大培养获得大量的目的菌。以此获得大量的酶，酶有胞内酶和胞外酶。若是胞外酶可以从目的菌培养液中获得；若是胞内酶需要对目的菌进行裂解。 酶还可以与酶的固定化相联系。这样就拓展了考查的范围
写在最后
1、在微生物的分离和培养中，需要根据微生物的特性制定特定的培养基。因此培养基的成分及其作用也是高考考查方向之一。
2、在微生物的分离和培养中，需要无菌条件。在复习时和学生一起分析，（1）根据实验材料的特性选择合适的灭菌方法；（2）根据实验的时间顺序，进行分析如何灭菌，比如实验前、实验中、实验后的操作过程。
3、上面论述是高考中常见的出题思路，也是实际应用的中一般操作步骤。当然限于考试的分值，每次考查的考点不会面面俱到，但是基本上都在其中。
4、小编水平有限，敬请批评指正，欢迎留言，不胜感激！
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