一、显微镜的结构
(3)遮光器:可调节光圈,以获得需要的亮度,亮度不足时可改用大光圈。
3.光学部分
(1)目镜:镜筒上端接近人眼的镜头,目镜越长,放大倍数越小。
(2)物镜:安装于转换器上接近物体的镜头,物镜越长,放大倍数越大。显微镜的放大倍数=目镜放大倍数×物镜放大倍数。
(3)反光镜:采集光线及调节光线强弱,光线太强时用平面镜,光线太暗时用凹面镜。
二、显微镜的使用
1.步骤:取镜→安放→对光→放片→调焦→观察。
2.对光方法
(1)转动转换器,使低倍镜对准通光孔;
(2)转动遮光器,使较大的光圈对准通光孔;
(3)转动反光镜,直到在目镜中看到一个明亮的圆形视野。
3.调焦方法
(1)眼睛从侧面盯住物镜,向前转动粗准焦螺旋使镜筒下降到接近标本,防止物镜压碎载玻片,损坏镜头;
(2)左眼通过目镜观察,向后转动粗准焦螺旋使镜筒上升直到看到物像为止;
(3)再用细准焦螺旋调节直到物像清晰。
一、显微镜的使用方法再点拨
安放→对光→放片→调焦→观察。
(1)安放:取镜时应左手托镜座,右手握镜臂,将显微镜放在接近光源、靠体前略偏左的位置,镜筒在前,镜臂在后。
(2)对光:转动物镜转换器,使低倍物镜正对通光孔;再转动遮光器,让较大的一个光圈对准通光孔;左眼通过目镜观察,右眼睁开,以便及时记录和观察结果。同时调节反光镜,使视野中出现一个明亮的圆形。
(3)放片:将要观察的玻片标本放在载物台上,使要观察部分位于通光孔中心,玻片标本两端用压片夹夹紧。
(4)调焦距:眼睛注视物镜与载玻片的距离,用手沿顺时针方向旋转粗准焦螺旋,使镜筒徐徐下降到物镜差不多接近玻片标本(约0.5厘米)时为止(从侧面观察下降的镜筒)。
(5)观察:用左眼朝目镜内注视,同时要求右眼睁开,边观察边逆时针方向旋转粗准焦螺旋将镜筒徐徐上升,直到发现物像,继而轻微来回转动细准焦螺旋,直到观察到清晰物像为止。
(6)观察目镜,记下目镜上所刻的放大倍数;观察物镜,记下物镜上所刻的放大倍数。
【重要提醒】①要改变显微镜中视野的亮度,可调节显微镜的通光孔和反光镜。若光线太暗,调节方法是改用大光圈和凹面镜。
②转动粗准焦螺旋使镜筒下降时,眼睛应注视显微镜的物镜,原因是防止物镜接触载玻片。
③慢慢移动载玻片时,可发现目镜中物像的移动方向跟载玻片的移动方向相反。这说明显微镜中看到的物像是原物的倒像。
二、使用显微镜的注意事项
1.镜头保护:擦拭镜头时一定要用专用的擦镜纸向一个方向擦拭。
2.转换器的使用:转动转换器时,不能用手指扳着物镜,以防物镜镜头松动,改变焦距,影响观察清晰度,应该握住转换镜边缘转动。
3.关于粗、细准焦螺旋的使用:镜筒下降时,眼睛从侧面注视镜筒与玻片之间的距离,用粗准焦螺旋下调,防止镜头与玻片相碰;观察目镜内调焦时,先用粗准焦螺旋向上调,调到可以看到物像时,改用细准焦螺旋上下调。
4.寻找物像(关于对光的问题):用低倍镜、选择光圈、调反光镜(光线亮时用小光圈和平面镜,光线暗时用大光圈和凹面镜)
(1)先在低倍镜下找到物像,这样看到的视野范围大,容易找到所需观察的物像。
(2)在低倍镜下找到所需观察的物像后,反方向移动装片,使要观察的部分移到视野中心。
(3)换用高倍物镜观察。一般视野会变暗,需增大光圈来调亮视野,再调节细准焦螺旋使物像更加清晰。
5.显微镜操作问题的解决方法
(1)视野太暗
当显微镜视野变暗以至于影响观察时,应采取以下措施:
①观察周围是否有人或物体挡住了光源;
②使用凹面镜;
③换上大光圈;
④将显微镜移至光亮处重新调光,或增加照明。
(2)视野中的污迹位置确定
使用显微镜时,视野中的污迹可能存在于三个位置:目镜、物镜或载玻片上。那么,转动目镜,如果污迹也随之转动,则在目镜上;移动载玻片,如果污迹也随之移动,则在载玻片上;进行上述两种判断之后,仍有污迹不动,则可能在物镜上。
6.关于放大倍数的问题:目镜无螺纹,越短倍数越大;物镜有螺纹,越长倍数越大。对光要用低倍镜,找物像也用低倍镜。观察同一物像时,低倍镜看到的视野更亮,看到的细胞数更多,换用高倍镜后看到的视野变暗且细胞变大,细胞数变少。
7.关于物像的正反问题:显微镜中看到的像上下、左右均相反,如“F”字玻片在显微镜中看到的像是“”。视野中的像偏哪边,载玻片就得向哪边移,例如:像偏右侧时把载玻片向右移动。特别要注意的是,视野中看到的细胞质流动方向与实际方向相同。
观察细胞
制作临时装片的步骤:
1.擦:载玻片正反两面都用纱布擦拭干净;
2.滴:制作洋葱鳞片表皮细胞装片滴清水,制作人体口腔上皮细胞装片滴生理盐水;
3.撕或刮:用镊子撕取洋葱鳞片表皮细胞,用牙签刮取人体口腔上皮细胞;
4.展或涂:把洋葱鳞片叶表皮细胞展平在清水中;将人体口腔上皮细胞在生理盐水中涂抹均匀。
5.盖:盖上盖玻片,防止气泡产生;
6.染:在盖玻片一侧用染色剂染色;
7.吸:在另一侧用吸水纸吸引;
8.观察:用显微镜观察临时装片。
一、观察洋葱表皮细胞的过程分析
1.用干净的纱布将载玻片擦拭干净,在干净的载玻片上滴 1 滴清水(如图)。
2.把洋葱鳞片切成小块,用镊子撕下一小块洋葱鳞片内表皮,放在载玻片的清水中,用镊子展平(如图)。
3.用镊子夹起盖玻片,使盖玻片一侧先接触载玻片上的水滴,然后慢慢放平,以防止气泡产生(如图)。
4.在盖玻片一侧,加 1~2 滴碘液(或红墨水)。在另一侧用吸水纸吸水,使染液浸润全部标本。
5.用显微镜观察洋葱表皮细胞临时装片。
(1)如果找到洋葱鳞片表皮细胞,绘制细胞结构图,并注明细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核、液泡等名称。
(2)如果无法找到洋葱表皮细胞,可能是下列一项或几项原因,做上记号,并采取相应对策。
观察植物细胞时的问题与对策
现象 | 原因 | 对策 |
细胞有严重重叠 | 洋葱鳞片表皮细胞撕得太厚 | 重新撕几次,挑选较薄的表皮进行实验 |
洋葱鳞片表皮细胞未在载玻片上展平,甚至造成折叠现象 | 用镊子展平洋葱鳞片表皮后,重新制作装片 | |
细胞结构不太清楚 | 未加滴红墨水 | 加滴红墨水 |
有黑色圆圈等 | 气泡太多 | 重新盖盖玻片或重新制作装片 |
视野中无光斑或视野太暗等 | 显微镜操作失误(如反光镜未对好,光过强、过弱或无光,物镜未对准通光孔) | 重新按正确方法操作显微镜 |
二、观察人体口腔上皮细胞的过程分析
1.在干净的载玻片上滴 1 滴生理盐水。漱净口,用消毒牙签在自己口腔内壁上沿同一方向轻刮几下,把刮下来的口腔上皮细胞涂抹在生理盐水中,尽量涂均匀。
2.用镊子夹起盖玻片,使盖玻片的一侧先接触载玻片上的水滴,然后慢慢放平(避免气泡产生),制成临时装片。
3.在盖玻片一侧加 1 滴亚甲基蓝溶液(或稀碘液),在相对应的另一侧用吸水纸吸水,使染液浸润全部标本。
4.用显微镜观察口腔上皮细胞临时装片。
(1)如果找到口腔上皮细胞,绘制细胞结构图,并注明细胞膜、细胞质和细胞核。
(2)如果未找到口腔上皮细胞,请试着在下表中找出一项或几项原因,做上记号并采取相应的对策。
观察动物细胞时的问题与对策
现象 | 原因 | 对策 |
视野中没有细胞 | 未在口腔内壁上刮取细胞 | 找到正确部位后再刮取细胞,重新制作装片 |
刮取的细胞数太少 | 多刮取几次,重新制作装片 | |
刮取细胞后,涂抹不匀 | 重新制作装片,涂抹均匀 | |
视野中有细胞,但结构不太清楚 | 未加滴亚甲基蓝溶液 | 加滴亚甲基蓝溶液 |
视野中有许多黑色圆圈 | 气泡太多 | 重新盖盖玻片或重新制作装片 |
视野中无光斑或视野太暗等现象 | 显微镜操作失误 | 回忆前两次实验,按正确方法操作 |
【重要提醒】①关于滴清水还是0.9%的生理盐水的问题:观察植物细胞时,制作临时装片的第一步是滴清水,植物细胞有细胞壁的保护,吸清水后不会胀破。动物细胞没有细胞壁的保护,必须滴0.9%的生理盐水,以防止吸水胀破。
②关于撕洋葱表皮的问题:我们所观察的洋葱表皮其实是洋葱相邻两个鳞片之间的一层薄薄的膜,只要取的位置正确,就能得到需要的实验材料。切的大小约0.5cm×0.5cm,在载玻片上摊平不重叠即可。
③关于盖玻片的操作问题:先斜45°再放平,以防出现气泡。显微镜中看到临时装片中的气泡是一个个的小黑圈。
④关于细胞染色的问题:植物细胞染色首选碘液,效果较好,其次再用红墨水替代,效果较差。动物细胞染色首选0.01%亚甲基蓝溶液,效果较好,其次再用碘液替代,效果稍差。操作时将染色剂滴在盖玻片一侧,然后在另一侧用吸水纸(面巾纸可替代)吸水,染色剂可自动渗过达到浸染目的。
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